肽合成

54天津藥學(xué)Tianjin Pharmacy 2011年 第23 卷第5期低,甚至已降至80%以下”。隨著(zhù)微生態(tài)學(xué)的興起和到之處。微生態(tài)療法的應用,目前通過(guò)動(dòng)物模型和體外實(shí)驗研1金新民. 雷貝執唑給療十二指腸微瘍76例的療效分析.中華臨床醫參考文獻究得到證實(shí),乳酸桿蘭具有抗HP作用[02i,為HP感染學(xué)研究雜志,00 ,13(22) :3264的治療提供了新的思路。2楊新昌. 奧美拉喧與小榮臧等聯(lián)合治療消化性胰痛療效觀(guān)察.中國潘彤膨(;用嗜酸乳桿菌死菌制劑(樂(lè )托爾)聯(lián)合現代醫生,2007 ,17(1):91傳統三聯(lián)療法治療兒童HP感染,取得良好效果。對3楊躇軍。 奧美拉疃聯(lián)合呋喃唑酮及阿莫西林治疔+二指腸饋瘍療照組和治療組均采用奧美拉唑膠囊0.8 mgkg●d",效觀(guān)察.臨床和實(shí)驗醫學(xué)雜志,200 ,6(7):52晨空腹頓服;克拉霉素片15 mg/kg.d"', 2次/d;阿莫胡彥飛摔托拉疃.甲硝墮與克拉霉索聯(lián)合治療十二指腸球部潰瘍合并HP感染100例分析中國設診學(xué)雜志,2008 ,8(3) :651西林膠囊50 mg/ kg.d- ,3次/d,療程14d。治療組s直憲偉.三聯(lián)療法治療幽「]螺桿附陽(yáng)性消化性出揣56例臨宋觀(guān)察。加用樂(lè )托爾1包/d頓服。結果治療組HP根除率為亞太傳統醫藥,0,6(11);4392. 5% (37/40) ,對照組為74.3% (26/35),兩組比較6段薦，六君子湯加味治療+二指腸遺痧30例臨床觀(guān)察云南中醫中差異有統計學(xué)意義(P<0.05)。治療組不良反應發(fā)生7陳成家胃康靈膠囊治療十二指腸遺病50例浙江中西醫結合雜藥雜志,200.28(4):24率明顯低于對照組,差異有統計學(xué)意義(P<0.01)。忠,20007 ,17(10) :624同時(shí),觀(guān)察還發(fā)現補充嗜酸乳桿菌可以明顯減輕治療8王枕戰 胃費靈融抗消化性哉瘍復發(fā)40例中國中西醫結合潮化過(guò)程中腹瀉惡心等胃腸道癥狀的發(fā)生率,對提高患兒雜志,2010,18(1):59依從性及療效有一定的幫助。， 張玲霞,張行。馬京玲,等荊花四康聯(lián)合PP三聯(lián)治療幽門(mén)螺桿蘭馬瑙華141觀(guān)察了奧美拉唑聯(lián)合米索前列醇治療用性十二指腸球部積病臨床觀(guān)察.中國醫藥指南21111)12十二指腸潰瘍的療效。選擇確診為+二指腸球部潰瘍10 彭于侖.康復新掖聯(lián)合潘托拉唑治療消化性觀(guān)瘍40例療效觀(guān)察廣西醫學(xué),2010.32(2):192患者空腹吞服奧萸拉唑20 mg/次,1次/d;米索前列醇11 胡伏蓮幽門(mén)媒桿菌耐藥及其根除失敗原因研究.中國醫藥導報，800 ug/d,三餐前及睡前分次口服,療程4周。結果痊20006 ,8(5) :340愈率為87.5% ,總有效率97.9%。12 Sgoure D,Mrnghoudakie P,Petraki K M, al. In vitm and in riro in-總之,治療消化性漬瘍主要包括抗胃酸分泌藥和hibien of Helicobacter plori by Labeilue cuei stunin Shirogu. ApplErion Micnbial 2004 ,70(1) :518防御因子增強藥,而對由HP感染引起的消化性潰瘍,13 潘彤影,朱歡.盧華社.益生苗箱助三聯(lián)療法治療兒童幽門(mén)螺桿菌則必須同時(shí)應用抗HP藥物,需應用質(zhì)子泵抑制劑加感染療效觀(guān)察.海峽藥學(xué),2010 22(2);:109兩種抗生素的三聯(lián)方案和三聯(lián)方案加鉍劑的四聯(lián)方14 馬瑞華奧美拉唑聯(lián)合米索前列醉治療+二指腸使醬48例療效分案。同時(shí).中醫藥或中西醫結合治療消化性潰瘍有獨析.西南軍醫,200 ,9(3):21肽合成張字,烏恩',王國成(1.內蒙古醫學(xué)院藥學(xué)院,呼和浩特010110; 2. 天津天士力研究院化學(xué)藥物研究所,天津300402)摘要藥用多肽因其涉及范圍廣、藥用活性高、生物利用性好、副作用少等優(yōu)點(diǎn)正被越來(lái)越多的藥學(xué)工作者列為將來(lái)藥物發(fā)展的主要方向。8前多肽合成方面主要以液相合成為主.本文在查閱大量文獻的基礎上對肽合成過(guò)程中.氨基酸的保護、肽鍵縮合等常見(jiàn)的方法做了總結，希望為科研工作者對肽類(lèi)藥物開(kāi)發(fā)提供參考。關(guān)鍵詞氨基酸保護,多肽合成中團分類(lèi)號:R914文獻標識碼:A文章編號:1006-5687(2011 )05 0054405中國煤化工上世紀90年代，多肽領(lǐng)域研究進(jìn)人--1i傳統藥物相比,活性肽具有藥展階段。研究表明,生物體內含量極微的活MYHC N M H GF.副作用少等優(yōu)點(diǎn)。因此活性命過(guò)程中起著(zhù)重要的調控作用1-3) ,這些活性肽與生肽的開(kāi)發(fā)利用引起 了各國科學(xué)家包括有機化學(xué)家、生物的發(fā)育、生長(cháng)代謝、免疫、疾病學(xué)習、記憶和衰老都物化學(xué)家 藥物化學(xué)家、結構化學(xué)家等與生命科學(xué)有關(guān)●收稿日期:201106-13天津藥學(xué)Tanjin Paraey 2011 年第23 卷第5期ss的科學(xué)家的高度重視,近幾年,其已發(fā)展成為國際市場(chǎng)環(huán)肽等副產(chǎn)物， 與目標化合物A-B混在- -起。上的一.大類(lèi)重要藥物0(-06。目前，得到活性肽的途徑所以,在肽合成過(guò)程中,對不參與肽鍵形成的所有多種多樣,本文主要就合成方面對肽進(jìn)行簡(jiǎn)單鬧述。官能團必須用暫時(shí)、可逆的方式予以保護.即每- -個(gè)肽1肽簡(jiǎn)介鍵的形成,包括三個(gè)步驟:第- .步,對縮合反應中不參兩分子氨基酸經(jīng)脫水以酰胺鍵聯(lián)接生成的化合物與反應的活性部分進(jìn)行保護;第二步, N-保護氨基酸稱(chēng)為肽。肽分子中的酰胺鍵稱(chēng)為肽鍵”。由兩個(gè)氨基的羧基必領(lǐng)先活化為活性中間體,隨后于羧基保護的酸形成的肽叫二肽,三個(gè)氨基酸形成的肽叫三肽，肽分氨基酸進(jìn)行縮合形成肽鍵;第三步,對保護基進(jìn)行選擇子中的每- -個(gè)氨基酸部分稱(chēng)為氨基酸殘基，開(kāi)鏈狀的性 脫除或全脫除。肽的自由氨基- -端稱(chēng)為肽鏈的氨基末端或N端,另- - 2 氨基酸保護端則稱(chēng)為羧基末端或C端。通常把小于10個(gè)氨基酸2.1 氨基保護及脫保護 用于氨基保護的保護基數殘基的肽稱(chēng)為寡肽或小分子肽, 10 ~ 80(或100)個(gè)氨目很多,按其結構可分為烷氧羰基?；?、烷基三大類(lèi)?；釟埢碾姆Q(chēng)為多肽。烷氧羰基是目前應用最廣的氨基保護基。表1列舉了在溫和反應條件下,肽鍵的形成是通過(guò)活化一個(gè)幾種有代表性的烷氧羰基保護基及脫保護條件。氨基酸(A)的羧基部分,第二個(gè)氨基酸(B)則親核進(jìn)2.2 羧基保護及脫保護 目 前已知的大多數羧基保攻活化羧基部分而形成二肽。如果羧基組分(A)的氨護基是由一 -級、二級,或三級醇制備的酯。表2列舉了基未保護,肽鍵的形成則不可控制,可能形成線(xiàn)性肽或幾種常見(jiàn)的羧基保護基。表1氨基保護基及脫保護條件保護基縮寫(xiě).結構脫保護條件參考文獻芐氧羰基HB/H0Ae,H/Pd/C.Nu/NH,(液) ,HF ,CH,SO,H8叔丁氧贓基.beHCIVHOAc . HCV二氧六環(huán), HF ,TFA ,HBc/ HOA:9-12 .9-藥甲氧顏基Fnee種肢溶液，如50%吸呢/CH.C213-15表2代表性的羧基保護基保護基.縮寫(xiě)脫除方法甲基MeNoOH溶液.KOH路液16- 18叔丁基.HCV有機溶劑,HB/HOAe ,IFA .HF(液)等19-20芐基健化氫化、Na/液NH、NaOH溶波、KOH溶被.BF,乙醚2.3側鏈官能團保護在氨基酸縮合反應中，由于不副反應的發(fā)生，在多肽合成中往往也選用適當的保護少氨基酸的側鏈.上都帶有易參與反應的活性基團，如基將其保護起來(lái)。表3列出了幾個(gè)側鏈官能團的常用羥基.巰基、酚基、胍基.咪唑基、吲哚基等。為了避免保護基及脫保護條件。表3側鏈保護基及脫除 條件側鏈官能團肌基2.對甲苯磺?；?. 硝基中國煤化工液)23瞇唑基1.對甲氧基苯磺?；鵆NM HG242. 2.4-二硝基苯基MYH酚基1.節基1. Bo1. H2/Pd. HF. Na/NH,(液)2.叔丁基2. tBu2. TFA, HC疏基1.芐基1. Ba1. Nw/NH(液)262. Np-a天津藥學(xué)Tanjin Pharmacy 2011 年第23 卷第5期2.4保護基的匹配對于用在一個(gè)特定肽合成的各高、經(jīng)濟性好等優(yōu)點(diǎn),因此備受當今藥學(xué)工作者的厚種不同類(lèi)型的保護基.保護基的選擇必須具備正交性，愛(ài)。南京農業(yè)大學(xué)宓鵬程等人[0于2007年成功利用正交的意思就是每- - 類(lèi)保護基的脫除各不相干。因此法合成出了胸腺五肽(TP5)中間體Fmoc - Tyr(t-此,為獲得最佳正交性,各個(gè)化學(xué)裂解機制應該是不Bu) - WangResin。同的。反應過(guò)程中，羧基組分首先與氯甲酸異丁酯在低3肽鍵的生成方法溫下( - 15 C左右)反應生成混合酸酐,然后在叔胺存3.1?；B氮物法早在 1902年,就有人將?；B在的堿性條件下與氨基組分反應生成肽。反應機理如氮物法引人到肽化學(xué)中,因此。該方法是最古老的縮合圖3所示。方法之一,在肽縮合反應過(guò)程中,疊氮物法對氨基酸很少發(fā)生消旋作用,因此，該方法- - 直被肽合成工作者廣以是泛使用。最近我國學(xué)者李勤耕等(21利用此種方法成功合成出-系列谷氨酰胺類(lèi)抗腫瘤化合物。MF.CHR'COR疊氮法接肽分為三步,首先，發(fā)基部分被甲酯,乙脂、芐酯等保護的肽在室溫下進(jìn)行肼解生成酰肼,然后酰肼在低溫(-15C以下)和酸性條件下與亞硝酸化圖3混合酸酐法接肽機理物反應生成疊氮物。最后用有機堿調節pH 8 ~9,加入3.3碳二亞胺法在碳二 亞胺法類(lèi)方法發(fā)展過(guò)程中，氨基組分完成接肽反應。機理如圖1。二環(huán)已基碳二亞胺( DCC)首先用于肽合成,并且得到廣泛應用,DCC相對便宜,而且可溶于肽合成常用試,NINH, .業(yè)的鵬化物.劑,但是用DCC作縮合劑會(huì )有二環(huán)已基脲( DCU)生成,DCU在水中和有機溶劑中均有- -定的溶解度，致使NH_CHR?COR3在產(chǎn)物純化過(guò)程中很難將其除盡。為此人們開(kāi)發(fā)了水yR溶性的碳二亞胺EDC來(lái)代巷DCC,反應完后只需要用酸或水洗滌即可除去反應生成的脲，有效的解決了這個(gè)問(wèn)題。劉國都等l251在合成活性三肽法氏囊素中也圖1疊氮法接肽 反應機理用到此方法。.除此以外,人們還發(fā)現了-種磷酸酯型縮合試劑碳二亞胺類(lèi)的縮合試劑機理如圖4,縮合試劑先與DPPA,其可以不經(jīng)肼解,直接由羧基變成疊氮鹽。與羧基組 分生成活性中間體,然后再與胺基組分在堿性傳統疊氮物法相比,由于其不需要酰肼中間體,簡(jiǎn)化了條件”下完成肽鏈增長(cháng)反應。反應步驟.而且反應條件更加溫和,因此受到人們的歡O-me=c=s-D7rcnrmo迎。機理如圖2。DCCEDCRCOOH+ N-k-orh --DPFA一士 RCON,r RCONHR'+Hl,+物圖4碳二亞胺偶合反應機理圄2 DPPA 接肽機理3.4酰鹵法該法類(lèi)似于有 機化學(xué)方法,用酰氯活化忙氣條件下形成酰胺,是一種常用3.2混合酸酐法該方 法是指先將保護中國煤化工去在試劑應用中只用于Fmo-羧基制成高活性的混合酸酐,之后與氨基的方法?；旌纤狒ㄊ巧鲜兰o50年代初期HC N M H Gf Fme在酸性條件下非常穩起來(lái)的,開(kāi)始使用的制備混合酸酐的試劑主要是二米足，的大心價(jià)士體內氨基酸很少用該法進(jìn)行合成，基磷酸,然后是苯甲酸，現在應用最廣的是氯甲酸烷基因為多數學(xué)者認為酰氯法*過(guò)度活潑"且易發(fā)生消旋等酯類(lèi),主要有氯甲酸乙酯.氯甲酸異丁酯和氯甲酸異丙3.5苯并三唑型(BOP族) 以 BOP為第-代苯并三多種副反應。酯?；旌纤狒ň哂蟹磻俣瓤?、產(chǎn)物純度高、產(chǎn)率唑型的縮合試劑可以說(shuō)是縮合試劑里的- -場(chǎng)革命,因天津藥學(xué)Tianjin Plarmary 2011年 第23 卷第5期57為其接肽的效率要遠遠高于DCC,引起消旋的風(fēng)險也機堿的參與下先與羧基組分反應,生成羧酸的苯并三明顯減小。之后,人們又發(fā)現了同類(lèi)型的縮合試劑唑嘴活性中間體，然后再與氨基組分反應生成目標多HBTU、ByBOP .TBTU等。其共同點(diǎn)就是縮合試劑在有肽,如圖5所示。.MoN... PF。PF。BFBOPPyBOPHBTUTBTUo-A*.B'Rlcoo.q~^*R,COOH+ DIEA-- + R'coor . HDEA+ H-DIEA+ 'B。R'coo ●HDEA"R'CONIR?←HNR?| RCOOA" +圍5 BOP 族縮合試劑接肽機理4結語(yǔ)Biochimia e Bophysica Aelta, 2011, 1814(5):724目前，多肽類(lèi)藥物涉及激素.神經(jīng)細胞生長(cháng)和生4李體.多肽藥物一 醫藥市場(chǎng)的亮點(diǎn)。 上海醫藥,2004 ,25(4).119殖等各生命領(lǐng)城并有直接影響細胞分化、神經(jīng)質(zhì)傳遞、3余志紅,魯保構,向明.生物肽的臨床應用及現狀分析.中國醫象藥學(xué)雜志2009.29(23) 2034腫瘤病變和免疫調節等多種重要功能[2)。據有關(guān)方6 A. Mahnoudia, K. Nsar, M. Khornseha. Can amino scids protect面報道,2008年,全球多肽類(lèi)藥物總銷(xiāo)售額已達750 ~boseadish peroxidee sqgin its swicide - perxide subtnle . Enxyme800億美元,每年還以20%的速度快速增長(cháng),肽類(lèi)藥物and Microbial Tecbnobog, 2008 ,43(4 -5): 329.已經(jīng)成為國際醫藥市場(chǎng)上的亮點(diǎn)。鑒于此,本文在查7 Yingwei Chiang, Wang Taubsien, Weachie Lee. Chioan coutig fuwthe pratction od amnin meide that wer etnpped witin hnydeganted閱大量文獻的基礎上,對多肽常見(jiàn)的合成方法進(jìn)行了fal. Food Hodollodo 2009 ,23(3) :1057歸納總結，希望以此推動(dòng)肽類(lèi)藥物在治療疾病中的8 Emneso M. Arbeon , Mario 0, Canigoan . e al. Myeoperie - like應用。amino secid cuntent in the BE8 ancmnte Aulectinia marplaienais, Onulac.-中國煤化工si . Cmpapnie Bicdomin1 Sun Guoying, Gun Chuxing, 2hou Yong Vasacive inte:216e- balances TREM- I/TREM -2 ratio in sente hung iMHC N M H GHM.osal. Pytlheh - terine. amirtory Peptide, 2011, 16(7) :56_tin acid (MAA) iclated from the hem2 Ao Xiwrxiso, Fang Fang, Xu Feng Vaoctive intetial pepide poypie conal Peiloporus capiata. Joumal of Plotochomistry and Potabi-tects alseolar epthelial cells aguinst hyperoxin via pronoting the stivaeology. 2009 ,94(3); 191tion od STAT3. Regulatory Pepide, 2011,168(1-3);110 Zhans Krowchukn, Begonye Vieedo, Victor Flomn,nt al. Prining for JA3 Yohitaka Uimetsu, Takchi Terns. Structural difrerae of vso8ctire- dependent detenses using bexandie seid is a eletive mechanisn lointestinal peptidle in two distinct nembrane - minicking environment.protect Anbidopsis gtint B. cinece. Joumal of Plant Prysiologr 。58天津藥學(xué)Tnjin Pharnacy 2011 年第23 卷第5期201,168(4); 359conijngte for the tealmemt o connel nevsilanization.. Binserials,Linda K. Friedman, Menahem Sogal. Early expoure of cllured hipp-2009,30 (30) :6026ocampad neuns to excitetory amino ecids prtecdis from later exitonox.9 Tomas Ratvilavici ,Anunae Lapunericius. Selctive inacivaion d Miciy. Int J Dol Naunwcionce. 2010.28 (2) :195-MuLV RT RNae H etiviy by site - deced PECyaion: aen im.12 R Rink, A AkemaMeter, I Bsudoin ,e al. To poet pepide phaume-prred ubiliy w synthe sie long eDNA molecule. New Biechnolog.eutials agint pepidases. Jourmal d Purmacolopiel and Taicologi2011 ,3(2):!2eal Mchode,2010,61 (2): 21020 Jan Chen, Bei Zhang. Ca Xie ,n al. Symubeis of a highly hyropho-13 Trmm Treaktmog. Bend w. Miler. Peperation and dhrderiation ofbie eyeie doxmpepite by solid - phase spuheis of liner popide and出pide cortaining w/o emslion. Inenntional Joumal of Pumacei-edintion in sluion. 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Res Guanging Toul Syuheris of MC2 -日Food Chenisry, 208,1111 (2):302Peptide fom Moenondia Charntie and Is Hpogyceoie Actri. Chi23 李動(dòng)耕.嘉水鵬.陳建,等疊氮法合成谷氨默膠類(lèi)化合物及其抗腫nese Joural of Neural Medicies ,2011, 9(1):58瘤話(huà)性.重慶大學(xué)學(xué)報,2002 .25(5);15917 HL Trvedi, A v Vaniker, U Thaker,t al. Human Adipose Tsue -24 宓鸚程,朱顯中,張琪，等圖相合成購腺五肽(TP5).有機化學(xué)，Derived Meenelymal Sterm Celle Corbined With Henitpietie Ster2007 ,27(12);1525Cell Tasplention Snptheise Insulin. Trunsplntation Peoceding,15 劉國都.周樂(lè ).活性三肽法氏囊素的液相合成西北農業(yè)大學(xué)，2008 ,40(3);11352008,17(1):4618 Eun Ja Oh, Kiae Pak, JunSub Chai,日al. Syntheia, chancteriar26 陳貫虹,遲建國,邱維忠,等。多肽藥物的研究進(jìn)展，山東科學(xué)，tion, and pelininary asesset of anti - Fl pepide - hyluronate2008 ,21(3):42論大黃屬和酸模屬在化學(xué)成分上的內在聯(lián)系和差異”劉景',夏忠庭” ,周桂榮“,張蘭蘭(1.中國藥科大學(xué),南京11198; 2.天津天士力集團研究院,天津300410)摘要酸模屬的多種植物在民間習稱(chēng)“土大黃”,與大黃形態(tài)相似,因此常被當作其偽品或混淆晶處理。大黃為臨床常用中藥,國內外對其研究頗多,關(guān)注度較高。而士大黃為民間常用草藥，目前對其研究相對較少。雖然在化學(xué)成分上兩者有一定重疊,但是仍存在許多特異性成分。本文對大黃屬和酸模屬植物近年的化學(xué)成分研究進(jìn)行綜述和比較,以期為酸模屬植物進(jìn)-一步的開(kāi)發(fā)利用提供科學(xué)依據。關(guān)鍵詞酸模屬,大黃屬,化學(xué)成分中團分類(lèi)號:R284文獻標識碼:A文章編號106-687(2011)05. 0058-03大黃和土大黃均為夢(mèng)科多年生草本植物。大黃屬而酸模屬植物在我國有26種[),2個(gè)變種,目前植物在我國有41種" ,4個(gè)變種,其中掌葉大黃唐古未被《中國藥典》收載。其主要成分類(lèi)型包括蒽醌類(lèi)、特大黃及藥用大黃被藥典收載使用。大黃的主要中分管 明米鹽馬勢租*黃酮類(lèi)、色原酮類(lèi)、二苯乙烯苷、類(lèi)型包括蒽醌類(lèi)、蒽酮類(lèi)、二苯乙烯苷色中國煤化工穿。該屬植物在治療皮膚癬及質(zhì)、?；擒蘸捅蕉⊥盏?。大黃作為傳統YHC N M H G確切，但是對其深人的藥理研現代藥理研究表明其還有解熱、止血、抗腫瘤，證明,大 黃和土大黃在治療病抗衰老和雙向調節肌體免疫功能等廣泛的藥理活證方面雖然多數重疊,但也各有側重,說(shuō)明兩屬植物客生刀。觀(guān)存在的共性和個(gè)性差異14)。本文對大黃屬和酸模屬●收稿日期2011309