花生殼乙醇提取物(EEPH)抗菌性的研究

2004年2月中國糧油學(xué)報Vol. 19No 1第19卷第1期Journal of the Chinese Cereals and Oils AssociationFeb.2004花生殼乙醇提取物EEPH航菌性的研究周建新嵇美華2汪海峰↓姚明蘭1〔南京經(jīng)濟學(xué)院食品科學(xué)與工程系1南京210003)湖洲職業(yè)技術(shù)學(xué)院2湖州313000摘要測定了花生殼乙醇提取牧EFPH對食品中常見(jiàn)污染菌的抗菌活性探討了熱處理和pH值對其抗菌活性的影響闡明了花生殼乙醇提取物的抗菌特點(diǎn)以及作為食品天然防腐劑的開(kāi)發(fā)價(jià)值。結果發(fā)明滟花生殼乙醇提取物的抑菌作用顯著(zhù)其抗菌活性隨著(zhù)其濃度增加而增強對細菌和真菌的最低抑制濃度(MC)別為0.28‰和0.50‰花生殼乙醇提取物的抗菌活性具有熱穩定性能忍受高溫短時(shí)的熱處理并且在pH5~9的范圍內均具有抗菌活性。關(guān)鍵詞花生殼乙醇提取物抗菌活性食品天然防腐劑0前言辟一條新途徑。食品由于微生物的污染常會(huì )腐敗變質(zhì)而造成直接經(jīng)濟損失向食品中加入防腐劑是一種簡(jiǎn)單有效的1材料與方法方法。近年來(lái)國外專(zhuān)家對一些合成防腐劑如苯甲1.1材料酸鈉)的安全性不斷提出質(zhì)疑消費者亦對其使用具1.1花生殼乙醇提取物的制備有不安全心理促使更多的科學(xué)工作者把注意力轉向考慮到花生殼提取物用于食品應考慮其安全天然防腐劑的研究、開(kāi)發(fā)上隊從植物中尋找有抑菌防性所以將文獻3的提取劑以乙醇代替甲醇。稱(chēng)腐作用且安全性高的活性物質(zhì)有著(zhù)廣闊的前景1。取粉碎花生殼100,置于200L燒杯中,用乙醇花生 Arachis hypogaea),屬豆科一年生草本油100mnL并加蓋浸提24h過(guò)濾后殘渣再用1000nL料植物,目前其開(kāi)發(fā)利用主要是花生仁和衣果殼大乙醇提取兩次合并濾液用旋轉蒸發(fā)器蒸發(fā)至近干、部分用作燃料直接影響了花生的綜合利用價(jià)值。我真空干燥箱中干燥、粉碎即得花生殼乙醇粗提取物,國是花生主產(chǎn)國之一年產(chǎn)英果600萬(wàn)噸,按含殼得率為2.5%木犀草素含量12.8%此提取物進(jìn)行33%計算可得殼約200萬(wàn)噸2〕,該資源的開(kāi)發(fā)利用柱層析用乙醇水溶液洗脫洗脫液低溫干燥得花生潛力大殼乙醇提取物EEPH)木犀草素含量為48%備用。汪海峰等3)對花生殼甲醇粗提取物成分的分1.1.2供試菌種析其中主要的黃酮類(lèi)化合物——木犀草素的含量達大腸桿菌( Escherichia coli)微球菌( Micrococcus12.6%有關(guān)藥理及臨床試驗的結果表明木犀草素在)枯草芽孢桿菌( Bacillus subtilis)金黃色葡萄體內具有抗菌、抗病毒及降低血脂和膽固醇的作球菌( Staphy lococcusaureus)綠膿桿菌(Pe用4但國內外對花生殼提取物抑制食品中污染菌 lomonas aeruginosa)鼠傷寒沙門(mén)氏菌( Salmonella的作用研究尚未見(jiàn)報道。本文研究了花生殼乙醇提 typhimurium)福氏痢疾桿菌 Shigella flexneri)黃取物對食品中常見(jiàn)污染菌的抑制作用以及有關(guān)理化曲霉( Aspergillus flauus)產(chǎn)黃青霉( Penicillium因素對其抗菌活性的影響,旨在能開(kāi)發(fā)出一種chys中國煤化工ulsp.)由本院食品天然的食品防腐劑同時(shí)也為花生殼的綜合利用開(kāi)微生CNMHG學(xué)院微生物學(xué)實(shí)驗室提供。細菌于營(yíng)養瓊脂斜面培養基上活倀36±1℃收稿日期2002-06-27周建新男,1964年生工學(xué)碩士副教授,食品科學(xué)與工程專(zhuān)業(yè)培養24h)霉菌于察氏斜面培養基上活化(28±1℃培養120h)酵母菌于麥芽汁斜面培養基上活倀28±1℃72h第19卷第1期周建新等花生殼乙醇提取物EEPH骯航菌性的研究1.1.3培養基5表1花生殼乙醇提取物對供試菌的抑菌率EFPH濃廈(%)EEPH的供試菌種0.080.120.160.200.240.280.320.360.400.440.50MIC(%)大腸桿菌57.70.16微球菌枯草芽孢桿菌50.277.587.21001000.28綠膿桿菌+36.750.468.477,51001000.28金黃色葡萄球菌50.971.988鼠傷寒沙門(mén)氏菌100福氏痢疾桿菌1000.20黃曲霉35,652.478.979.887.21001000.44產(chǎn)黃青霉28.937.246.367.179.989.7紅酵母23.240.950.787.8100注營(yíng)養瓊脂培養基pH=η.θ際氏培養基、麥芽汁培養基pⅠ=4.5冫表中數據為四次平行試驗的平均值;+″表示基本沒(méi)有抑制作表示未做實(shí)驗營(yíng)養瓊服培養細菌):察氏培養嵐培養霉菌);此以這10種菌作為測試對象具有一定旳代表性。麥芽汁培養基培養酵母菌表1的結果表明花生殼乙醇提取物對于供試菌有顯方法著(zhù)的抑制作用并且隨著(zhù)其濃度的增加其抑菌率明1.2.1花生殼乙醇提取物EEPH)抑菌試驗(6顯增高在EEPH的濃度在0.28‰則能完全抑制所EEPH先用少量酒精溶解按不同比例加入到已有供試細菌的生長(cháng)要完全抑制真菌的生長(cháng)則需濃滅菌的培養基中混勻活化旳菌用無(wú)菌生理鹽水制成度為θ.5‰玊EPH抗細菌活性和抗真菌活性有較大103~106個(gè)/mL的菌(或孢子)懸液,取lnL與含差異不同的菌種對其敏感性不同鼠傷寒沙門(mén)氏菌EEPH的培養基(45℃左右)5mL傾入無(wú)菌培養皿混最為敏感而產(chǎn)黃青霉最不敏感。合后于恒溫箱中培養細菌36±1℃24h滇真菌ε8±2.2花生殼乙醇提取物抑菌成分耐熱性試驗1℃72h)以未加EEH的培養基作對照。每個(gè)濃由表2可知,不同熱處理條件對EEPH的抗菌度試驗作4個(gè)平行樣按稀釋分離平板菌落計數法進(jìn)活性有不同程度的影響其中低溫長(cháng)時(shí)間熱處理影響行計數并計算抑菌率最大,而高溫短時(shí)間處理EEPH的抑菌率仍接近抑菌取%)對理試驗的菌故×00100%9說(shuō)明EFPH的抑菌能力具有良好的熱穩定根據抑菌率為100%時(shí)的EEPH的濃度,即為性表2花生殼乙醇提取物抑菌成分耐熱性試驗表中數據為抑菌率%EEPH最低抑菌濃度MTC1.2.2花生殼乙醇提取物抑菌成分耐熱性試驗熱處理溫度與時(shí)間供試菌種75℃85℃95℃121℃EEPH置于不同加熱條件于處理,以各供試菌的未熱處理30min 20min 15mMIC的量(1.2.1"項測出),在滅菌培養基中加入大腸桿菌82.091.093.699.7微球菌10085,278.297.798,9EEPH分別測定抑菌率以觀(guān)察不同熱處理條件下枯草芽孢桿菌EEPH抑菌效果的變化。實(shí)驗操作與結果計算同1綠膿桿菌10084.484.495.798.72."項。金黃色葡萄球菌10087.690.鼠傷寒沙門(mén)氏菌10082.289.310098.21.2.3pH值對花生殼乙醇提取物抑菌作用的影響福氏痢疾桿菌10070.39297.0100選用金黃色葡萄球菌作為試驗菌用酸堿緩沖液黃曲霉91,494.398,0調節營(yíng)養瓊脂培養基的酸堿度分別測定抑菌率,以產(chǎn)黃青霉10082100觀(guān)察不同pH值下EEPH抑菌效果的變化。實(shí)驗操紅酵93,792作與結果計算同1.2.1"項中國煤化工養基麥芽汁培養基山為4.5:ECNMHG值表中數據為四次平行試驗平均值2結果與討論2.3不同pH值環(huán)境對花生殼提取物抑菌作用的影2.1花生殼乙醇提取物的抑菌效果響供試菌魁槍中常見(jiàn)的污染菌且危害性大因pH值環(huán)境對EEPH抑菌作用的影響如表3。結中國糧油學(xué)報2004年第1期果表明EEPH在pH5.0~9.0的范圍內對金黃色葡3.3花生殼乙醇提取物可在較大pH值范圍內使萄球菌的MIC均小于0.24‰抑菌作用較強同時(shí)用在偏酸或偏堿性的條件下抗菌效果更好。這一點(diǎn)隨著(zhù)pH降低或升高以pH7為起點(diǎn)C有減少趨作為食品防腐劑是一個(gè)很大的優(yōu)點(diǎn)目前應用的防腐勢如pH值為5.0或9.0時(shí)對金黃色葡萄球菌的如苯甲酸)只有在酸性條件下有效而在中性乃MC僅為0.20‰。這一點(diǎn)與常用的化學(xué)合成防腐劑至偏堿性的食品中使用效果明顯下降5。EEPH的苯甲酸和山梨酸等酸性防腐劑相比適用食品的pH開(kāi)發(fā)利用,可拓寬防腐劑使用的食品pH范圍。值范圍更為廣泛[53.4花生殼是藥飼兼用材料安全可靠而其乙醇提表3EEPH在不同pH值下對金黃色葡萄球菌的抑菌率(%)取物廣譜、高效的抗菌活性可有效地防止微生物引起EEPH的食物中毒同時(shí)可起到防止食品腐敗、延長(cháng)食品保0.20質(zhì)期等作用因此EEPH可用作食品天然防腐劑從40.271.6而使花生殼的開(kāi)發(fā)利用具有更廣闊的前景。7.063.5參考文獻9,0注表中數據為四次平行試驗的平均值?！?嘈曹郁生.食品防腐劑應用現狀及發(fā)展.中國調味品,1988,3結論〔2)張志義主編,中外食品發(fā)展統計.北京中國物資出版社,3.1本實(shí)驗結果表明花生殼乙醇提取物對食品中1995278常見(jiàn)的污染菌具有廣譜、高效的抗菌活性且隨著(zhù)其〔3迂海峰楊慧萍曹錫忠等.花生殼甲醇提取物木犀草素濃度的增加而增強對細菌和真菌的最低抑制濃度的分離與鑒定研究.中國糧油學(xué)報,1997x3)48-52(MC)分別為0.28‰和0.50‰。不同的菌種對(4王憲楷主編天然藥物化學(xué)北京民衛生出版社1994EEHH的敏感性不同其中鼠傷寒沙門(mén)氏菌最為敏〔5頂項奇主編,糧油食品微生物學(xué)檢驗.北京中國輕工業(yè)岀版感而產(chǎn)黃青霉最不敏感。社修訂版)20002432633.2花生殼乙醇提取物的抗菌活性不受高溫短時(shí)6)周邦靖.常用中藥的抗菌作用及其測定方法.科學(xué)技術(shù)出熱處理的影響使它可以與食品熱處理并用提高加版社重慶分社,987289-306工食品的保存性。Antimicrobial charateristics of ethanolicExtracts of Peanut HuIK EEPH)Zhou Jianxin' Ji Meihua Wang haifeng Yao minglanDept. of Food Science and Engineering Nanjing University of Economics Nanjing 210003)Huzhou Vocational and Technical College- Huzhou 313000)Abstract The antimicrobial activities of ethanolic extracts of peanut hull EEPh against common food con-taminative microorganisms were determinded. The effects of heating conditions and ph value on the antimicrobialactivities were discussed. The antimicrobial characteristics of EEPH and the -prnenert for the development of EPHas a natural food antiseptic were envisaged. Results showed th中國煤化工 f EEPH was high andincreased with increasing its concentration The minimal inhibitionCNMHGre 0. 28% against bacteria and 0. 50%against fungi. The antimicrobial activity of EEPh was characterized by its heat stability. The artimicrobial activity ph tolerance ranged from 5 to 9Key words ethanolic extracts of peanut hull antimicrobial characteristics natural food antiseptic