聚乙二醇化干擾素治療慢性丙型肝炎

152●Foreign Medical Sciences Section on Pharmacy 2002 Jun; 29(3)聚乙二醇化干擾素治療慢性丙型肝炎駱曉梅,彭濤編譯王林校(軍事醫學(xué)科學(xué)院放射醫學(xué)研究所,北京100850)摘要:將聚乙二醇(PEG)化學(xué)連接于治療蛋白質(zhì)能增加血漿半衰期、減少毒性、增強藥物的穩定性和溶解性。PEG 結合蛋白質(zhì)通過(guò)減少免疫系統發(fā)現和攻擊外源物的能力以增加其治療效果。由活化的PEG單體與蛋白質(zhì)偶聯(lián)制備PEG蛋白結合物,這種偶聯(lián)策略有多種選擇。PEG 化干擾素-a用.于治療慢性丙型肝炎病毒性感染已進(jìn)行了大量臨床研究工作,并獲得肯定的療效。已有3種PEG蛋白結合物被FDA批準,臨床應用于治療嚴重的復合性免疫缺陷病和治療各種白細胞增多癥。關(guān)鍵詞:慢性丙型肝炎;干擾素-a; 聚乙二醇結合物中圖分類(lèi)號: R978.7; R512.6* 3文獻標識碼: A文章編號: 1001-0971(2002)03-0152-031聚乙二醇蛋白質(zhì)結合物結合的PEG單體的屏障能力可以減少或除去蛋白聚乙二醇(PEC)結合物是為增強治療蛋白的釋的免疫原性。但對蛋白結構認識的不足和對PEC藥于20世紀70年代得到了發(fā)展。PEG 結合物在藥單體位點(diǎn)的選擇性不高有可能會(huì )阻礙蛋白質(zhì)免疫原代動(dòng)力學(xué)和藥效學(xué)方面的改善促進(jìn)了腫瘤學(xué)和傳染性的除去。-般的途徑是將PEG單體與蛋白表面病學(xué)在治療領(lǐng)域的應用。無(wú)論蛋白和非蛋白分子都賴(lài)氨酸連接可得到期望的結果。與此特性相似，能與PEG連接,但研究的重點(diǎn)主要集中于PEG蛋白PEG單體的屏障效應可使PEG連接蛋白水解敏感結合物。PEG 結合物通過(guò)增加蛋白質(zhì)的分子量,減性降低,在使用高分子量分枝結構的PEG分子時(shí)，少了藥物的排泄,從而減少了服藥頻率。結合后熱這些效應特別強。將PEG單體與小分子蛋白質(zhì)連穩定性和pH穩定性的提高,促進(jìn)了蛋白質(zhì)半衰期接可形成一個(gè)更大的PEG蛋白結合物,它將減少腎的延長(cháng)。PEG 結合物還可減少蛋白質(zhì)的免疫原性并臟的清除率。上述這些性質(zhì)均涉及增加了蛋白質(zhì)的保護其免于蛋白分解而降解。由于減少了因每日多循環(huán)半衰期。PEG蛋白在體內還表現出分布的變次給藥所致血藥濃度的波動(dòng),藥物的毒性得到降低?；?，皮下注射時(shí)其吸收取決于PEG單體的分子量。多年來(lái),在食物、化妝品和藥物領(lǐng)域應用的經(jīng)驗已確證PEG無(wú)毒。PEG具有低免疫原性已得到許2聚乙二醇結合物的化學(xué)多研究的支持。一個(gè)有趣的例子是兔在極端的條件將PEG單體與蛋白質(zhì)偶聯(lián),首先需要活化的下產(chǎn)生了抗PEG抗體。但此免疫應答無(wú)臨床意義,PEG,即將末端羥基轉變?yōu)橐子谂c同蛋白表面官能因為沒(méi)有實(shí)例表明人注射PEC結合蛋白可產(chǎn)生抗團反應的基團。最常用的方法是將PEG單體上的PEG抗體。研究了不同分子量PEG單體的清除作官能團活化為可以與賴(lài)氨酸和N端氨基反應的官用,結果表明PEG的清除不涉及結構的改變,其清能團。典型的是使用單官能團PEG(mPEG),因為這除率與分子量成比例。其中低于約20 ku 分子量的種聚合物能抵抗交聯(lián)和聚合。分子經(jīng)腎臟清除，由尿液排出。更高分子量的PEG賴(lài)氨酸取代以及PEG分子量的不均勻性在分子經(jīng)腎臟清除速度很慢,隨著(zhù)PEG分子量的增PEG蛋白藥學(xué)中很重要。通常需要建立一種特殊的加，肝臟的清除速度亦將增加。藥學(xué)方法進(jìn)行測定和復核。但在某些情況下,可以PEG蛋白結合物的性質(zhì)與許多天然聚合物相減少或除去取代位點(diǎn)的不均勻性。中國煤化工主要問(wèn)題是mPEG中似，因此可展現出許多期望的特性,所有這些作用都依賴(lài)于結合PEG 的單體的分子量。常觀(guān)察到PEG經(jīng)常MHCNMHGH)。一些制造商生連接對小分子藥物的溶解度具有顯著(zhù)影響。共價(jià)鍵產(chǎn)出含低比率二醇的mPEG,但這些雜質(zhì)總是存在。二醇的含量高達10% ~ 15%。二醇的活化導致雙收稿日期:2001-12-28官能團的混雜,它可產(chǎn)生交聯(lián)和聚合。二醇的出現國外醫學(xué)藥學(xué)分冊2002 年6月第29卷 第3期153●來(lái)自于催化環(huán)氧乙烷聚合生成mPEG過(guò)程中的水污限的分布體積。這使得給藥方式更為簡(jiǎn)便(一周1染,在制備高分子量mPEG中即便使用更低濃度的次,非修飾的IFN-a為一周3次)?，F已獲得PEG(40甲氧化物作為誘發(fā)劑，在這個(gè)反應中水污染和二醇ku)IFN-2a的臨床結果。曾進(jìn)行了開(kāi)放式和平行服的形成依然是非常嚴峻的問(wèn)題。而且由于二醇鏈可用劑量的全球多中心II期臨床試驗。531 名患者隨以在任何一端連接,因此污染的二醇比所期望獲得機每周1次給予PEG(40 ku) IFNa-2a ,劑量為180的mPEG具有更高的分子量。μg,持續48周(n=267)或給予每周3次非修飾的PEG結合物化學(xué)的-一個(gè)特征是二醇和其產(chǎn)生的IFNa-2a,每次6 MIU持續12周后改為每周3次每次雙官能團的PEG是不可除去的。因此在終產(chǎn)品中3 MIU再持續36周(n=264)。結果顯示,在48周.存在一些蛋白交聯(lián)相應產(chǎn)物需設法除去。另一種可PEG(40 ku) IFNa-2a與非修飾的IFNa-2a 相比較,前選擇的方法是純化活化的PEG試劑并除去雙官能者表現出較強的病毒學(xué)應答反應(69%對28%,P=團物質(zhì)。這種途徑的優(yōu)點(diǎn)是能減少昂貴的蛋白質(zhì)的0.001),在72周有持續的病毒學(xué)應答反應(39%對損失。19%,P=0.001)。在271名慢性HCV患者和組織活檢為肝硬化或橋接纖維化的患者中進(jìn)行了另一項3聚乙二醇化干擾素-a開(kāi)放隨機的平行劑量臨床研究。病人隨機接受48慢性傳染性丙型肝炎病毒(HCV)感染是- -種流周IFNa-2a每周3次每次3MIU的治療(n = 88)或每行廣泛的疾病,可致肝硬化和肝細胞癌。干擾素周1次PEG(40 ku)IFNa-2a ,劑量為90 μg( n = 96)或(IFN)-a蛋白已經(jīng)廣泛用于治療HCV ,但單用IFN180μg(n=87)的治療,隨后是24周的非治療期。.治療僅有少量患者產(chǎn)生持久的作用。這可能是由宿接受劑量為180 pg PEG(40 ku) IFNa-2a組治療的患主的多樣性、病毒因素以及IFN不良的藥代動(dòng)力學(xué)者到48周結束時(shí)44%有病毒學(xué)應答反應( P=因素所造成。尤其是單次皮下給予IFN后血清濃度0.001,與IFNa-2a相比),而且30%的患者在72周有在24h以?xún)染徒档綑z出限以下。這樣即使治療方持久的病毒學(xué)應答反應(P=0.001,與IFNa-2a 相法需要每周皮下注射3次IFN,但病毒在藥物沒(méi)有比)。在88名接受IFNa-2a每周3次每次3MIU治處于治療有效的濃度時(shí)還是在復制。IFN 加利巴韋療的患者中,在48周僅14%有病毒學(xué)應答反應,至林治療HCV可以增加持久病毒學(xué)應答的患者數目72周8%有持續的病毒學(xué)應答反應。.(從38%增至43%)。但這種應答的增加伴隨著(zhù)高眾所周知,IFN和抗病毒藥物利巴韋林聯(lián)合治不良反應的發(fā)生率,使得- -些患者終止了治療。療比單獨用IFN治療會(huì )提高療效。因此希望提高療IFN的PEG化改善了藥代動(dòng)力學(xué)特性,因此藥效而將PEC(40 ku)IFNa-2a與利巴韋林合用治療,這效學(xué)也相應得到了提高。曾臨床評價(jià)了5 ku分子引起人們的興趣。這類(lèi)臨床試驗正在進(jìn)行之中,并量的mPEG交聯(lián)的1IFNa-2a治療慢性HCV患者的效且在20名患者中已經(jīng)完成PEC(40 ku)IFNa-2a 加利果。每周給予該藥的劑量分別為15,45,90和135巴韋林治療的一項小規模試驗。在20名患者中9puy,沒(méi)有發(fā)現比每周用300萬(wàn)國際單位(MIU)的未修名觀(guān)察到持續的病毒學(xué)和生物化學(xué)應答反應。感染飾IFNa-2a有增強的效果。最近對由分子量為40HCV基因1型的16名患者中5名有持續的病毒學(xué)ku的分枝結構的PEG與IFNa-2a交聯(lián)而成的應答反應,并且所有4名感染其他基因型HCV的患PEGIFNa-2a進(jìn)行了臨床評價(jià)。這些試驗的的結果者也產(chǎn)生了上述反應。令人振奮。此外最近歐盟和美國批準- -種分 子量為PEG使用mPEG-SC12000為原料制備分子量1212 ku的線(xiàn)性PEG化的IFNa-2b 用于HCV治療。ku的線(xiàn)性PEG化IFNa-2b技術(shù)( PEG IFNa-2b)已獲研究還表明,分子量為40ku的PEG化IFNa-2a得專(zhuān)利。這項工作的特別之處是,在低pH(約pH=可能具有期望的藥代動(dòng)力學(xué)特征和活性。特別是預5)條件下經(jīng)由一個(gè)可水解的不穩定鏈與組氨酸偶聯(lián)測其穩態(tài)血藥濃度為常數。實(shí)際上,試驗結果證實(shí)中國煤化工的結果表明，PEG化一周1次的皮下注射血藥濃度幾乎不變。用PEG2-IFNaYHCNMHG的IFNa2b每周給藥NHS40000進(jìn)行PEG化后與原始的IFNa-2a 相比，腎3次進(jìn)行比較,在最佳劑量為1.0 μg*kg~ '時(shí),在PEG廓清率減少到1%，清除半衰期為77 h,原為9 h?；疘FNa-2b組297名患者中25%有持續的HCV清除PEG(40 ku)IFN-a經(jīng)皮下給藥顯示出持續吸收和有作用, 而在IFNa-2b組303名患者只有12%顯示出154●Foreign Medical Sciences Section on Pharmacy 2002 Jun; 29(3)持續的病毒清除作用(P <0.001)。最近報道了涉度復合性免疫缺陷病(SCID),這種疾病與一種腺苷及1530名患者的Ml期臨床試驗結果,表明PEG脫氨基酶( ADA)遺傳缺陷病有關(guān)。在培加酶出現之IFNa-2b 組對病毒應答反應比IFNa-2b 與利巴韋林:前,SCID患者用含有ADA的紅細胞進(jìn)行部分交換合用組高,雖然兩組差值僅為7%。輸血治療。這些換血療法使得患者處于鐵負荷過(guò)多基于所得試驗數據,很明顯PEG 化的IFNa-2b和與靜脈注射有關(guān)的病毒性感染的危險中。培加酶和PEG(40 ku)IFNa-2a 與未修飾的IFNa-2b 和IFNa-每毫升中ADA活性大約比紅細胞高1800倍,因此2a相比分別具有更好的效果。具有較高分子量和藥物產(chǎn)生的ADA活性濃度比部分換血高。培加酶分枝結構的PEG化1FNa-2a 可能比較低分子量的可用于治療急性淋巴細胞白血病、急性成淋巴細胞PEG化IFNa-2b有更好的藥代動(dòng)力學(xué)和藥效學(xué)性白血病和慢性髓性白血病。天然的門(mén)冬酰胺酶化合質(zhì),每周1次給藥即可維持足夠的血清IFN濃度,這物與高變態(tài)反應和縮短自身中性抗體半衰期的發(fā)展使得更多很難治療的患者也能獲得改善的持續應答有關(guān),難以維持有效的血漿濃度。培加酶能減少酶反應。尚需要在PEG(40 ku)IFNa-2a和PEC化IFNa-誘導的免疫反應傾向,這樣就允許對天然酶有高過(guò)2b之間進(jìn)行直接的臨床試驗。已經(jīng)清楚的是,總體敏癥的患者接受培加酶治療而不產(chǎn)生過(guò)敏反應。.上PEG結合物治療蛋白都是有益的,并且IFN的FDA還批準了用于治療Kaposi肉瘤的PEG結合的PEG結合物在不斷增長(cháng)的被診斷為HCV感染的人多柔比星脂質(zhì)體和用于肺部手術(shù)密封劑的PEC-丙群中有希望能夠增加治療的成功率。交酯~乙交酯-丙烯酸酯。尚有一些重要的PEG結合蛋白正處于臨床試驗的最后階段,包括治療肢端肥4其他PEG藥物結合物大癥的PEC-生長(cháng)激素受體拮抗劑、自由基清除劑、一些PEG蛋白結合物已被美國FDA批準用于血液衍生藥物、抗腫瘤藥、心血管藥物和抗原藥物。臨床或臨床研究中。培加酶是1990 年批準用于重預計某些將在近年得到批準。人工病毒載體吳波'編譯仲伯華'王嘉璽2審校(軍事醫學(xué)科學(xué)院1. 毒物藥物研究所，2.基礎醫學(xué)研究所，北京100850)摘要:基因傳遞十分復雜,使用簡(jiǎn)單的載體分子難以完成。模擬病毒的重要性質(zhì),設計合成多組分載體。有些解決方法,如遞送細胞錨定分子或正常功能的內源性核輸入機制是直接拷貝自細菌和病毒的作用過(guò)程;另一些方法具有原創(chuàng )性,如由去污劑二聚體化進(jìn)行單分子基因組濃縮,或由質(zhì)子吸附作用引發(fā)核內體的破裂,這些效應是天然的細胞侵襲者所不具備的。所有這些功能組分有待裝配成一種獨特的超分子系統,即“人工病毒”。關(guān)鍵詞:人工病毒;基因傳遞;合成多組分載體中圖分類(lèi)號: Q782文獻標識碼: A文章編號: 1001-0971(2002)03-0154-041簡(jiǎn)介的胞內轉運,使數十億的基因拷貝中最多只有少數基因治療依賴(lài)于核酸載體。病毒的多樣性可以幾個(gè)能夠到達靶細胞核。滿(mǎn)足臨床上對基因傳遞的大多數要求。但病毒和宿主平行進(jìn)化,使外源性蛋白顆粒及受感染的細胞成2 DNA 濃縮中國煤化工雜的多階段過(guò)程,為免疫系統的有效靶位。合成的超分子載體,可以需要多AHC N MH心無(wú)- -例外地均設計不含有多肽,甚至帶有惰性的衣殼層,藉此逃避是陽(yáng)離子多聚物,可以誘導DNA聚集。把線(xiàn)狀的多數的免疫識別。但是,不利的生物分布以及無(wú)效DNA分子轉變?yōu)榫o密的微粒,提高了化學(xué)和物理穩收稿日期:2002-02-01定性。質(zhì)粒DNA被陽(yáng)離子性的脂質(zhì)體或多聚物壓