奈拉濱的合成工藝改進(jìn)

中圓藥師2010年第13卷第4期 China Pharmacist2010,vl.13N.4ml/10g的伊文思藍(0.5%),腹腔注射0.6%的醋酸溶液引起的家兔毛細血管通透性。短管兔耳草水提物具有顯著(zhù)0.1ml/10g,20min后脫日處死,剖開(kāi)腹腔生理氯化鈉溶液降低毛細血管通透性的作用。沖洗腹腔,每次5m沖洗3次,共15m生理鹽水,收集腹腔現代研究表明,短管兔耳草化學(xué)成分主要有黃酮、苯丙洗液。2000rmin1,離心10min,吸取上清液590mm測定素苷、環(huán)烯醚萜等化合物。黃酮類(lèi)化合物有抗炎調節免疫光吸收度。結果見(jiàn)表4。TL對醋酸引起的小鼠毛細血管通抗衰老作用,作用機制與其抗自由基或抗氧化有關(guān)。本實(shí)驗透性增加有明顯抑制作用,且隨劑量增加抑制作用加強。與通過(guò)小鼠二甲苯致耳廓腫脹試驗、大鼠肉芽腫實(shí)驗、大鼠鮮空白對照組相比阿司匹林組(200mgkg)和TFL高劑量蛋清致足腫脹試驗和小鼠毛細血管通透性增高實(shí)驗觀(guān)察短組(100mgkg1)對醋酸引起的小鼠毛細血管通透性增加有管兔耳草總黃酮的抗炎作用。結果表明,局部涂抹不同劑量明顯抑制作用(P<00),但TFL高劑量組抑制作用弱于短管兔耳草總黃酮(100,50,25mgkg)均可使小鼠耳片腫阿司匹林組;TL中劑量組(50mgkg2)亦有顯著(zhù)抑制作用脹的程度明顯減輕抑制率為2273%~43.13%;可抑制大(P<0.05),抑制作用弱于阿司匹林組;TFL低劑量組(25鼠蛋清性足腫脹,尤其在100mgkg作用顯著(zhù)(P<0.01),mgkg-)對醋酸引起的小鼠毛細血管通透性增加有抑制的優(yōu)于地塞米松;還能抑制醋酸所致小鼠腹腔毛細血管通透趨勢,但差異無(wú)統計學(xué)意義(P>0.05)性,其中以100mg·kg作用最明顯(P<0.01)。在大鼠棉表4THL對酸所致小鼠毛細血管通透性增高的影響球肉芽腫的實(shí)驗中,不同劑量TL均可減少新生肉芽組織生成,以100mg·kg作用最明顯(P<0.01)。綜上結果表生理鹽水0.274±0046明短管兔耳草總黃酮具有明顯的抗炎作用,抗炎療效以高劑阿司匹林40ThL高劑量0.174±0.051·量組為優(yōu),且呈現一定的量效關(guān)系TPL中劑量0.187±0.0583l.75魯考文獻TFL低劑量0.244±0.054注:與生理鹽水組比校,·P<0.05,"P<0.011楊水呂.藏藥志[M]西寧:青海人民出版社,1991.4454503討論2李冬梅,尹曉飛,蔡大偉淫羊總黃酬急性毒性實(shí)驗研究[]中國藥師007,10(10):1011-1012獻報道,藏藥短管兔耳草的抗炎藥理作用如下:①3徐丘紅,李東,萬(wàn)于軍等通風(fēng)方劑顆粒鎮痛抗炎作用的實(shí)驗研究[門(mén)]中對大鼠血清性關(guān)節腫有預防作用。②對大鼠頭部急性充血4潘國慶段鵬弊藏藥兔耳草超聲提取總黃酮的工藝研究[刀青海師范大性水腫有抑制作用。③對大鼠甲醛性關(guān)節炎有預防作用。學(xué)學(xué)報,2006,3:68-70④對大鼠氣囊性肉芽腫有治療作用。短管兔耳草水提物的5李儀中兩藥理實(shí)驗方法[M,上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,91,398作用與氫化可的松相似,對大鼠氣囊性肉芽腫之囊壁的增生6陳奇中藥藥理研究方法學(xué)[M]北京:人民衛生出版社,199.36367及滲出液均有一定的抑制作用。⑤對大鼠棉球肉芽腫增生7 Brunelli C,. Oscon P.,BonP,“a. Evaluation of quality of life in patient有影響。短管兔耳草水提物對大鼠棉球肉芽腫的增生具有(2009-10-28收稿2009-12-15修回)抑制作用,其作用強度與氫化可的松相似。⑥能增強組織胺奈拉濱的合成工藝改進(jìn)陳磊宗在偉杜有國蔣亮(南京海光應用化學(xué)研究所南京21000摘要目的:改進(jìn)奈拉濱的合成方法。方法:以2·氯基6-氯嘌呤和2,3,5-三0-芐基-1-0-對硝基笨甲?；鵇-阿拉伯呋喃糖為起始原料,經(jīng)取代、氯代、縮合、水解四步反應合威奈拉濱。結果:合成的目標化合物,其結構經(jīng)核磁共扳氬譜、核磁共振碳譜、質(zhì)譜及元素分析確證。結論:本方法簡(jiǎn)化了操作步驟,優(yōu)化了反應條件,降低了成本,提高了收率。關(guān)鍵詞奈拉濱;合成;工藝;改進(jìn)中圖分類(lèi)號:TQ464.6文獻標識碼:A文章編號:1008049X(2010)04050503Improve the Synthetic Method of NelarabineChen Lei, Zong Zaiwei, Du Youguo, Jiang Liang( Nanjing Haiguang Institute of Applied Chemistry, Nanjing 210009, China)ABSTRACt Objective To study on synthesis of Nelarabine by improving method. Method: Nelarabine was synthesized startingfrom 2-amino-6-chloropurine and 2, 3, 5-Tri-0-benzyl-1-0-(4-nitrobenzoyl)-D-ar-abinofuranose via four steps, including permutationchlorination, condensation,hydrolysis Result: The structure of the target compound was confirmed byH-NMR, C-NMRental analysis. Conclusion: This optimal synthetic procedure with lower cost and higher yield is worthy to have a furtherKEY WORDS Nelarabine; Leukemia; Synthesis; Process improvement中國煤化工奈拉濱( Nelarabine,1)化學(xué)名為2氨基9B-D-阿拉伯呋喃糖HCNMH GLaxoSmithKline)公司通訊作者:陳磊Te:(025)51198987E-mal:akcl2008@163.cmwww.zgy8.org研究報告研發(fā),2005年10月獲得美國FDA的快速批準,成為治療至甲醇鈉(23g,413mmol)和甲醇400m,攪拌并升溫至60少對兩種化療方案無(wú)反應或治療后復發(fā)的急性T細胞淋巴℃,于60~65℃反應1h。TLC檢測反應完全后轉入單口瓶母細胞性白血病(TAL)和T細胞淋巴母細胞性淋巴瘤(T中濃縮至干。殘余物中加入200m水,攪拌0.5h,加人二BL)新藥,20年在美國正式上市。奈拉濱是T淋巴細氯甲烷萃取合并有機相依次用1 molL HCI洗至pH胞選擇核苷的類(lèi)似物,是水溶性脫氧鳥(niǎo)苷的類(lèi)似物anaG的3,飽和碳酸鈉溶液洗至pH7~8,再飽和氯化鈉溶液洗至中6甲氧基衍生物,已證實(shí)核苷類(lèi)似物作為治療血液系統腫瘤性,有機層尤水硫酸鈉干燥,過(guò)濾濾液濃縮至干,得到(3)的細胞毒藥物療效顯著(zhù)。araG的前體藥物奈拉濱已被證明(17.6g,106mmol)收率:90.3%TLC:乙酸乙酯:甲醇=6:1,可有效治療T淋巴細胞急性白血病。在體內奈拉濱分解R物=0.7,Rf料2)=0.9為anG的類(lèi)似物在白血病細胞內經(jīng)過(guò)磷酸化后速轉化2.22’,3’,5∵-三0芐基1氯-阿拉伯呋喃糖的合成(5)為 ara-GTP,抑制DNA合成并引起細胞凋亡1。于1L三口反應瓶中加入(4)(40.5g,71.2mmol)、氯化奈拉濱的合成路線(xiàn)已見(jiàn)文獻報道,雖然文獻公開(kāi)氫二氯甲烷溶液500ml,磁力攪拌下,冰水浴保溫10℃左了奈拉演的制備工藝,但該工藝方法以2氨基6甲氧基嘌右反應4h,TC檢測反應完全后,過(guò)濾,濃縮蒸除溶劑得到呤和尿嘧啶阿糖苷為原料,使用生化方法得到月標產(chǎn)物奈拉溶液(5)(27.8g,63.4mmol)收率:89.1%TC:三氯甲烷:濱,該方案的難點(diǎn)在于菌種較難得到,反應時(shí)間較長(cháng),反應條石油醚=5:3,R=0.4,RG4=0.6。件較苛刻。國內專(zhuān)利公開(kāi)了合成奈拉濱的方法,以6氯232氯基6甲氧基9B-D-(2,3',5·三0芐基阿拉伯鳥(niǎo)苷為原料,經(jīng)6步化學(xué)合成將呋喃核糖構型轉化為阿拉伯糖制得奈拉濱雖然合成路線(xiàn)原料易得到價(jià)格合適但實(shí)驗呋喃糖基)嘌吟的合成(6)步驟多需在此基礎上進(jìn)行工藝優(yōu)化研究簡(jiǎn)化操作,提高收于500ml三口反應瓶中加入(3)(9.9g,60mmol)、四氯率也是當前迫切需要解決的問(wèn)題。文獻合成步驟較長(cháng),操化錫300ml,室溫攪拌40min,10℃左右慢慢滴加(5)(278作繁瑣收率偏低不利于工業(yè)化生產(chǎn)。參考文獻對2,3,g,63.4mmol),1h內滴畢室溫反應1h,TC檢測反應完5-三0芐基-1-0-對硝基苯甲?；鵇阿拉伯呋喃糖進(jìn)行氯畢,過(guò)濾濾液濃縮蒸除溶劑,殘余物中加人100m二氯甲代制備中間體2,3,5·三0芐基-1·氯阿拉伯呋喃糖參考報烷溶解水洗,有機層無(wú)水硫酸鈉干燥,過(guò)濾濾液濃縮至干,的工藝路線(xiàn)并在實(shí)驗過(guò)程中對奈拉濱的合成工藝進(jìn)行了得(6)(285g,50.3mm)直接用于下步反應。收率:改進(jìn)以2氨基6氯嘌呤和2,3,5三0芐基10對硝基苯838%TC:二氯甲烷;甲醇=5:1Rr=0.6,B(料,經(jīng)取代、氯代、縮合水解四步反應合成奈拉濱,總收率達23%。在水解步驟中,2.4奈拉濱的合成釆用5%PdC催化,縮短了反應時(shí)間,提高了收率。此工藝于500m三口反應瓶中加入甲酸銨(41.2g,653.9操作方便,適合工業(yè)化生產(chǎn)。工藝合成路線(xiàn)如圖1。mmol)5%鈀炭催化劑4.12g和甲醇206ml,通入N2,攪拌并升溫至40℃,滴加(6)(28.5g,50.3mmol)與甲醇285ml配成的溶液,1,5h滴畢,保溫反應2h,TC檢測反應完全后趁熱過(guò)濾濾液濃縮殘余物加入甲醇攪拌并加熱至回流,趁熱過(guò)濾濾液減壓濃縮至干,殘余物攪拌下加入無(wú)水乙醇、乙醚冷卻放置析晶,過(guò)濾固體用無(wú)水乙醇洗滌,干燥NO, CH? CL+得白色粉末狀固體(1)。(51g,34.2%)mp:201.2-203Bno oBn℃(文獻mp:209~217℃),TC:乙酸乙酯石油醚:甲醇=21:1,Rf宀w=0.5,R原料(6)=0.9。純度94%(HPLC法)。元素分析(C1H15N,O3),理論值(%):C44.44,H5.09,NN2.cH3OH、H223.56,026.91;實(shí)測值(%):C4.52,H5.09,N23.5,05%Pd/C, HCOO NH42689。HNMR(300MHz, DMSO-D)8:7.9(8,H,嘌呤環(huán)),6.41(s,2H,嘌呤環(huán)氨基),6.14-5.50(b,H,呋喃糖環(huán)),5.06(t,H,呋喃糖環(huán)),4.06~4.11(m,2H,呋喃糖環(huán)),圖1奈拉濱的合成路線(xiàn)4.00(8,3H,呋喇糖環(huán)甲氧基),3.76~3.79(m,H,呋喃糖1儀器與試劑環(huán)),360-3.70(m,2H,亞甲基)。CNMR(500MHz,DM1H-NMR譜以DMsO為內標,13cMMR以DMS0-d6為S0-D6)8:160.74,159.94,154.19,139.6,113.38,84.42(嘌溶劑和內標。美國 Perkin-Elmer公司的240C型元素分析呤環(huán));83.58,5.70,75.53,61.17(呋喃糖環(huán));53.34儀;zF6型三用紫外線(xiàn)分析儀;YRT3熔點(diǎn)儀(溫度未經(jīng)校(-0CH3)。MS(m/2):29827(M+)。驗);所用主要原料與試劑:2氨基6氯基嘌呤(江蘇省金壇3討論市茂盛助劑廠(chǎng),純度99%);2,3,5-三0.芐基10-對硝基苯在制備奈拉濱的過(guò)程中,本工藝做了如下的改進(jìn):①水甲?；鵇阿拉伯呋喃糖(南京祥兆工貿有限公司,純度解反應中通△N,作保護使體系隔絕空氣避免結構發(fā)生鍵99%);5%P山C(上?；嚰瘓F),其他試劑均為分析純斷裂中國煤化工氣使體系均相而是2實(shí)驗與結果加入2.12-氯基6甲氧基喋呤的合成(3)CNMHG完全將芐基轉換成3,回收的鈀炭催化劑于500ml三口反應瓶中依次加入(2)(20g,118mml)、(集中給廠(chǎng)家處理)可以重復利用3-5次(對產(chǎn)品反應沒(méi)影中圓藥師2010年第13卷第4期 China Pharmacist2010,vol.13N.4根痛平膠囊的質(zhì)量標準研究黃榮增(湖北中醫學(xué)院中藥資源與中藥復方省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗室武漢430065)孟軍華(武漢市三醫院)吳娟(湖北中醫學(xué)院摘要目的:建立根痛平膠囊的質(zhì)量標準。方法:采用薄層色譜法對該制劑中的葛根和牛膝進(jìn)行鑒別,采用高效液相色譜法測定制劑中芍藥苷的含量。色譜柱:迪馬C1(250mmx4.6mm,5μm);流動(dòng)相:甲醇0.05mol·L'磷酸二氬鉀水溶液三乙胺(28:72:0.5);流速:0.8ml·vmin';柱溫40℃;檢測波長(cháng)為230mm。結果:薄層色譜斑點(diǎn)清晰,重現性好;芍藥苷的平均加樣回收率為98.46%,RSD為1.3%(n=6)。結論:該方法準確可靠,重復性好,為根痛平股震的質(zhì)量控制和評價(jià)提供了依據。關(guān)鍵詞葛根;牛滕;芍藥苷;根痛平膠囊;質(zhì)量標準中圖分類(lèi)號:TQ460.72文獻標識碼:A文章編號:1008449X(2010)04050703Study on Quality Standard of Gentongping CapsulesHuang Rongzeng( Key Laboratory of Traditional Chinese Medicine Resource and Compound Prescription, Hubei College of TCM, Wuhan430065, China)Meng Junhua(Third Hospital of Wuhan ) Wu Juan( Hubei College of Traditional Chinese Medicine)ranches Root were identified by TLC, and the content of peoniflorin was determined by HPLC. The Diamonisil Cu(250 mm x4.6ABSTRACT Objective: To establish the quality standard for gentongping capsules. Method Kudzuvine Root and Thvotoothed Ac5 Hm)analytic column was used and the mobile phase was mixture of 0.5% triethylamine/methanol(28%)and 0. 5% triethylamine/0.05 mol-L- potassium dihydrogen phosphate water(72 %) The detection wavelength was set at 230 nm. Result: The TLcere clear and reproducible. Therecovery rate of peoniflorin by HPLC was 98. 46% and RSD was 1. 3%(n=6). ConcltThe method is reliable and accurate with high reproducibility. It can be used for quality control of gentongping capsulesKEY WORDS Kudzuvine Root; Twotoothed Achyranthes Root; Peoniflorin; Gentongping capsules; Quality standard根痛平膠囊(自制制劑)由白芍、伸筋草、狗脊、續斷、葛有限公司);AT-201電子分析天平(d=0.01mg,瑞士)。芍根、牛膝等中藥材制成,規格為每粒裝0.3g(約相當于原生藥苷對照品(供含量測定用,批號:0736-20020)、葛根素對藥0.85g),具有活血、通絡(luò )、止痛的功效,用于風(fēng)寒阻絡(luò )所致照品(供含量測定用,批號:075220009)及牛膝對照藥材的頸椎病。本文參照有關(guān)文獻,HPLC法測定該制劑中芍藥(供鑒別用,批號:1066200203)等均由中國藥品生物制品檢苷的含量,采用TLC法鑒別葛根和牛膝1361,為控制該定所提供;硅膠C(青島海洋化工廠(chǎng)),甲醇(色譜純,上海振制劑質(zhì)量提供可靠的實(shí)驗依據。興),水為雙蒸水,其他試劑均為分析純。1儀器和試藥2方法與結果zF22三用紫外分析儀(上海安亭電子儀器廠(chǎng)); Dionex-2.1薄層色譜鑒別P80液相色譜儀,UvD170U檢測器,四元低壓梯度泵,2.1.1葛根取本品10粒,傾出內容物,加乙醇30mlHKJz2830171BAF戴安變色龍高效液相數據處理系統(美聲處理30min,濾過(guò),濾液水浴蒸干,殘渣加乙醇lml使溶?chē)靼补?;SK5200H超聲波清洗機(上?？茖С晝x器解,作為供試品溶液。按處方除去葛根,制備陰性樣品,取陰通訊作者:黃榮增Tel:(027)65056187E-mail:hr09@163.comleooocoooeoeoeoeoeoeoeoeoeoeoooooooooooooooooooeoeoooeoeoeoeoeoeoeoeoooooeoeoooooooooc響);③粗品只需重結晶一次,產(chǎn)品的純度就能達到994%2 Parker WB. Secrist JA, Waud WR,aa. Aurine nucleoside analogues in devel以上;④總收率提高至23%,且操作簡(jiǎn)便,適合工業(yè)化生產(chǎn)opment for the treatment of cancer[J]. Curtin Investig Drugs, 2004, 5(6): 592唯一不足就是起始原料價(jià)格偏高,增加了患者的經(jīng)濟負擔3 Krenitsky TA, Kozalka GW,Jooem LA, et a. Antiiral Compoun[ P].EP: 0294114在今后將繼續對奈拉濱的工藝進(jìn)行研究改進(jìn),使之能降低A2.198806527成本減輕患者經(jīng)濟魚(yú)擔4 Averett DR, Wilson, D, Krenitsaky TA, e al. Heterocyclic compounds [P]. wo90456A1,19064,目標化合物的結構經(jīng) MS-FAB、元素分析HNMR、C5顆群,孫學(xué)偉徐存震一種條拉腐的合成才法[P中國專(zhuān)利MR予以確認200716 Grit中國煤化工urine deriative[P]. EP考文讞YHCNMHG2012修圓)1朱爾佳梁可張浩等治療T淋巴細胞白血病新藥—奈拉濱的研究進(jìn)展[J新藥指南2007,12(69):7475