苜?？傔疤崛」に嚨难芯课簳粤帷?孫海洲2,盧德勛2,白剛(1內蒙古農業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)與醫學(xué)學(xué)院,內蒙古呼和浩特010018:2內蒙古農牧業(yè)科學(xué)院,內蒙古呼和浩特010030;3內蒙古鄂爾多斯市三頃地種牛場(chǎng),內蒙古鄂爾多斯014600)隨著(zhù)人們對苜蓿認識的不斷深入,逐漸發(fā)現苜蓿中的一些生物活性成分,如苜蓿皂甙、苜蓿多糖摘要:筆者研究了苜?？傔暗奶崛」に?通苜蓿黃酮等,其中苜蓿皂甙因為具有溶血特性且味過(guò)乙醇濃度、固液比、提取次數、提取溫度4苦,能夠引起家畜臌氣,被認為是苜蓿中的抗營(yíng)養個(gè)單因素設定L(34)正交試驗,確定苜?？傄蜃?。Lu等(1987)研究表明,添加2%和4%的苜甙最佳提取工藝:乙醇濃度70%、固液比1蓿皂甙可分別降低瘤胃原蟲(chóng)34%和66%。劉凱10、提取2次、提取溫度80℃。等(1999報道,苜蓿皂甙能夠明顯促進(jìn)試驗大鼠關(guān)鍵詞:苜?？傔?正交試驗膽固醇的排泄,促使正常培養內皮細胞NO的釋中圖分類(lèi)號:Q946文獻標識碼:A放。叢學(xué)滋等(1988)研究表明,苜蓿皂甙可使家兔文章順序編號:1672-5190(2007)03-0028-02血清總膽固醇明顯下降,降低主動(dòng)脈壁中總膽固醇的沉積。因此,苜蓿皂甙作為一種生物活性成分具有潛在的開(kāi)發(fā)價(jià)值12.3苜?？傔暗奶崛》椒?取苜蓿草樣1000g,1材料與方法置于圓底燒瓶中,按照正交設計的條件進(jìn)行回流1,1試驗材料提取,正交試驗設計方案見(jiàn)表2。提取后過(guò)濾,濾液111樣品:苜蓿由內蒙古農牧業(yè)科學(xué)院草原研減壓濃縮,濃縮液用等體積的石油醚、正丁醇分別究所試驗基地提供。萃取3次,然后將正丁醇萃取液合并濃縮,在水浴1L2試劑:無(wú)水甲醇、無(wú)水乙醇、高氯酸、冰醋鍋上蒸干恒重,用蒸鎦水溶解,并定溶于50mL容酸、香蘭素均為國產(chǎn)分析純;齊墩果酸標品購自北量瓶備用。124標準曲線(xiàn)衷13儀器:78可見(jiàn)分光光度計、分液漏斗、1241溶液配制與旋轉蒸發(fā)儀醫用真空泵圓底燒瓶球形冷凝管①顯色劑配制:取香蘭素5g,加冰醋酸10等mL溶解搖勻?？?2試驗方法②對照品溶液配制:精確稱(chēng)取干燥至恒重的12樣品制備:從莖的基部剪取苜蓿地上部分,齊墩果酸標準品545mg,置于5mL容量瓶中,加并于65℃烘箱中干燥后,放入小型粉碎機粉碎,入甲醇定容,搖勻備用。密封保存備用③樣品溶液制備:將上述提取得到的苜?？俵.22正交試驗:采用L(34)正交表,水平設置見(jiàn)甙,稱(chēng)取50mg,用水溶解并定容于5mL容量瓶表1,通過(guò)正交試驗篩選苜?？傔疤崛」に?。中,搖勻備用。7醴坦驗的因素水平℃,%收稿日期:2007-01-25收稿日期:2007-04-1H中國煤化工作者簡(jiǎn)介:魏晚玲(1978—),女,在讀碩士研究生CNMHGO(溫度)D(乙醇濃度)主要研究方向為反魚(yú)動(dòng)物營(yíng)養與調控通訊作者:孫海洲(1971—一),男,博士,研究員,主要研究方向為反芻動(dòng)物營(yíng)養。E-mail:sunhaizhou@china.com萬(wàn)第3期垂28試驗矸寬表2正交試驗方案及其結果℃,%表3方差分析因素變異來(lái)源離均差平方和自由度方差處理號A總甙總乙醇濃度20.32362011(固液比)(次數)(溫度)(乙醇濃度)提取率提取溫度002100l1l(l:10)l(60)固液比001514481(1:10)223456l(l:10)3134提取次數(誤差)001020.0052(1:12)1注:Fos(2,2)=19000;Fm(2,2)=99.000。2(1:12)20.72根據正交試驗結果,提取工藝優(yōu)化條件為固液2(1:12)3l(60)l(70)l:16)190比1:10,提取次數2次,溫度80℃,乙醇濃度70%。4.2303(1:16)23結語(yǔ)3(1:16)30.702571該試驗僅作為苜?？傔疤峁┕に嚨某醪教?9TTTKKK3.8613.2912970l.410索,以期為后來(lái)的苜?？傔疤崛」に嚨母倪M(jìn)提供3.471參考。3.3093.4590.857參考文蔽0970.9900.553〔1〕劉凱,余書(shū)勤苜蓿皂甙對膽固醇排泄和內皮細胞釋放10231.1631.157一氧化氮的影響[J〕.徐州醫學(xué)院學(xué)報,1999,19(6)1.1031.1531.267442-444.0.2640.0660.2772〕叢學(xué)滋,秦孟根,王書(shū)安苜?？傇碓嚨奶崛∨c分析[J注:苜?？傔疤崛」に囉绊懙闹鞔雾樞驗橐掖紳舛?提中藥通報,1988,13(9):39取溫度>固液比>提取次數?！?〕賀玉薇王松柏王代軍,等苜蓿皂甙提取工藝研究[草原與草坪,2005,11(5):27-291242標準曲線(xiàn)及回歸方程〔4〕秦孟根,劉大躍,姜春根紫花苜蓿不同部位總皂甙含吸取對照品溶液40,50,60,70,80,90μ,水量測定[J中草藥,1999,21(1):38-39浴揮干溶劑,加入顯色劑02mL及高氯酸08(5)賀玉微,王松柏,許俊東,苜蓿天然成分的營(yíng)養保健功mL,水浴70℃加熱15mn,流水冷卻后加入冰醋能及其開(kāi)發(fā)前景[A第二屆中國苜蓿發(fā)展大會(huì )論文酸5mL,搖勻,靜置10min。以722型可見(jiàn)分光光集C北京:北京出版社,2003度計于545mm處測定吸收度,根據對照品濃度和6)LnCD, Jorgensen N A. Alfalfa saponins affect site and吸收值可得回歸方程式:C=10.119A+1.5093,其中extent digestion in ruminants [J]Journal of NutritionR2=0.9995,A為吸光度,C(mg/100mL)為濃度。1987,117:919-9271.2.4.3樣品含量測定吸取樣品液100μL,按標準曲線(xiàn)制備項下方法操作,顯色,于545m處測定吸收度,隨行空白坦桑尼亞有49人死于裂谷熱根據上述回歸方程計算樣品中總甙的總提取率。據報道:截至2007年4月9日,坦桑尼亞2結果與分析境內已有49人死于裂谷熱病。這一統計數字試驗設計采用L4(34)正交表,即四因素三水平是坦桑尼亞總理洛瓦薩9日在多多馬省視察做9次試驗,正交試驗方案及其結果見(jiàn)表2。時(shí)公布的。由表3可知,乙醇濃度對總甙的提取率有顯多多馬省是坦桑尼亞的畜牧大省,飼養有著(zhù)性影響(P<0.05),而提取溫度、固液比、提取次300多萬(wàn)頭(只)牛羊,但到目前僅有7萬(wàn)多頭數均無(wú)顯著(zhù)影響(P>0.05),由表2可知,隨著(zhù)溶劑(只)注射了裂谷熱疫苗用量的增加,總甙提取率下降,所以固液比選擇1裂谷熱是東非大裂谷地帶雨季易流行的10;提取次數在二次浸提時(shí)達到最大值1163%V中國煤化工羊中傳播,自所以浸提次數選擇2次;隨著(zhù)溫度的升高,總甙提CNMHG動(dòng)物傳播取率增加,因此提取溫度選擇80℃;乙醇濃度從給人?；颊叨喑霈F急性腹瀉、高燒、腦水腫,并70%增加到90%,但總甙提取率呈下降趨勢,因伴隨肝腎功能?chē)乐厥軗p,有些病人還會(huì )因腦血此乙醇濃度選擇70%為宜。管破裂出血而死亡。(本刊輯)2007年第3期
