黃芩乙醇回流提取工藝研究

實(shí)用中醫藥雜志2013年6月第29卷6期(總第245期)JOURNAL OF PRACTICAL TRADITIONAL CHINESE MEDICINE 2013. VoL 29 No6黃芩乙醇回流提取工藝研究楊宏靜(重慶三峽醫藥高等專(zhuān)科學(xué)校,重慶404020)[中圖分類(lèi)號]R282.710.2[文獻標識碼]A[文章編號]1004-2814(2013)06-492-02[摘要]目的:研究?jì)?yōu)選黃芩♂醇回流的提取工藝。方法:采用單因素考察及正交試驗設計,以黃芩苷的含量為考察指標優(yōu)選黃芩提取工藝。結果:黃芩提取工藝選擇為加8倍量σ%乙醇提取2次,第1次2h,第二次1.5h。結論:用此方法提取黃芩藥材效率高、結果穩定。[關(guān)鍵詞]黃芩;黃芩苷;單因素考察;正交設計;提取工藝[Abstract]Objective: To study the best extraction process for Scutellariae Radix.Methods: Using single factor and orthogonal design todetermine the content of baicalin as the index of evaluation Results: The optimum condition for the extraction of Scutellariae Radix was adding 8 times of60% alcohol, extracting for 2 hours first time and 1.5 hours second time, totally extracting 2 times. Conclusion: The optimum condition was efficient andI Key words Scutellariae Radix; Baicalin; Single factor; Orthogonal design; Extraction technology黃芩為唇形科植物黃芩 Scutellaria baicalensis Georgi合并,定容至20mnL量瓶中,備用。的干燥根。黃芩味苦、性寒。歸肺、膽、脾、大腸、黃芩苷含量測定方法:①對照品溶液的配制:取小腸經(jīng),具有清熱燥濕、瀉火解毒、止血、安胎的功效黃芩苷對照品約10mg,精密稱(chēng)定,置250mL量瓶中,2。黃芩中主要含有黃酮類(lèi)化合物,以黃芩苷為代表的加甲醇溶解并稀釋至刻度,即得。②供試品溶液的制黃酮類(lèi)成分是黃芩抗菌、抗炎、解熱的主要有效成分3。備:各精密量取提取液2mL,置50mL量瓶中,加甲醇為了充分提取黃芩的有效成分,我們用單因素考察及正稀釋至刻度,搖勻,精密量取1mL,置10mL量瓶中交試驗設計,對黃芩的提取工藝進(jìn)行了研究,確定了適加甲醇稀釋至刻度,搖勻,濾過(guò),即得。③色譜條件合黃芩生產(chǎn)提取的工藝以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-0.2%磷1實(shí)驗儀器與材料酸溶液(45:55)為流動(dòng)相,流速1mL/min;檢測波長(cháng)儀器回流提取裝置、高效液相色譜儀( Agilent 1100)、280m。④測定法:分別精密吸取對照品溶液和供試品色譜柱: Waters Sunfire184.6×150mm。溶液各10μL,注入液相色譜儀,測定,即得。試劑與藥品。黃芩藥材(購于安國以嶺中藥飲片有實(shí)驗結果見(jiàn)表1。限公司)、黃芩苷(批號110715-200815,購于中國藥表1黃芩提取溶媒考察結果實(shí)驗號黃芩苷含量品生物制品檢定所)、乙醇為醫用級、甲醇為色譜純、水675250%乙醇水為重蒸水。60%乙醇0%乙醇2方法與結果結論:由以上結果可知,60%乙醇作溶媒時(shí),黃芩2.1提取溶媒考察因素水平參考有關(guān)文獻中黃芩的提取工藝研究*3,苷含量高于水和其它濃度乙醇作溶媒時(shí)黃芩苷的含量,選取水、50%乙醇、60%乙醇、70%乙醇、80%乙醇為故選擇60%乙醇為提取溶媒。單因素考察水平,進(jìn)行試驗。22正交試驗實(shí)驗方法:取黃芩選凈,稱(chēng)取15g,分別加入6倍正交設計:選取影響提取物收率的提取次數(A)量的溶劑,回流提取2次,每次1.5小時(shí),提取液濾過(guò)提取時(shí)間(B)、加醇量(C)為考察因素,以黃芩苷的實(shí)用中醫藥雜志2013年6月第29卷6期(總第245期)JOURNAL OF PRACTICAL TRADITIONAL CHINESE MEDICINE 2013. VoL 29 No6含量為指標,選取如下水平進(jìn)行試驗,見(jiàn)表2。定的工藝為AB32C2,即加8倍量60%乙醇提取2次,表2因素水平表第1次2h,第2次1.5h。水平提取次數提取時(shí)間加醇量(相當于藥材倍數23驗證試驗取藥材,凈選干燥,粗碎,按處方配比,稱(chēng)取黃芩15g,以60%乙醇為提取溶媒,按最佳工藝A3B3C3組實(shí)驗方法:取藥材,凈選干燥,粗碎,按處方配比,合條件和選定工藝A2B(3,2)C2的組合條件進(jìn)行重復稱(chēng)取島根15.以6%乙醉為提取溶蝶在平行操作的驗證對比實(shí)驗,測定黃芩苷的含量,測定結果見(jiàn)表5條件下,按I9(3)4正交表,回流提取,提取液合并,濾過(guò),減壓回收乙醇,適量濃縮,轉移至1000mL量瓶中,點(diǎn)這里,物世A, B,C3110.07放冷至室溫,加60%乙醇稀釋至刻度,搖勻,備用。A, B, C307,72A, B,C3106.68黃芩苷的含量測定方法:同上。4A2B(3.2)C2I0408102.96A2B(3.2)C210264實(shí)驗結果見(jiàn)表3和表4。6A2B(3.2)C2表3黃芩正交實(shí)驗表列號由上表可見(jiàn),以黃芩苷的含量為考察指標,最佳工實(shí)驗號4(次)B(h)C(倍)D(空白)Yi(mgg)藝ABC和選定工藝AB(3,2C2的差距均不大;但選定12331223工藝省工節能,故選定AB(3,2C2為提取工藝,即藥材加8倍量60%乙醇提取提取2次,第1次2h,第2次1.5h。101.693討論106.54102,58黃芩中所含黃酮類(lèi)成分為其主要有效成分,此類(lèi)成lj2268426616263.8626669分易溶于乙醇。通過(guò)單因素提取溶媒的考察,得出此類(lèi)296.7928175276.302824031.222869429469285.76成分在60%乙醇中溶解度較大。用正交實(shí)驗設計,優(yōu)選l251456.3970884.1569622.1071123.5688084.3079383.0676341697974976C574161了影響提取物收率的3個(gè)因素,得出最佳提取工藝,結Rj=32+i2+112363985823258.72328059923253209合實(shí)際生產(chǎn),對各影響因素進(jìn)行了優(yōu)化,最終確定了黃Si=Ri/3芩的提取工藝為加8倍量60%乙醇提取2次,第1次提表4方差分析方差來(lái)源離均差平方和自由度均方F值取2h,第2次提取1.5h。135791678.96ABCD[參考文獻2.321]國家藥典委員會(huì ).中華人民共和國藥典(一部)注;Fo0s(2,2)=1900,Fo01(2,2)=9900(2010版)[M].北京:中國醫藥科技出版社,結果:由表3可知,3個(gè)因素的影響大小順序為提2010:283取次數大于加醇量大于提取時(shí)間。最佳工藝為A3BC3,即加10倍量60%乙醇提取3次,每次2h。表4中方[2]高學(xué)敏.中藥學(xué)[M].北京:人民衛生出版社,1998:118差分析表明,A因素對黃芩苷的含量有顯著(zhù)性影響(P<0.05),B因素和C因素對黃芩苷的含量均無(wú)顯著(zhù)性3]李欣,魏朔南.黃芩的生物學(xué)研究進(jìn)展[J].中國野生植物資源,2006,25(6):11-15.影響。A因素中,隨著(zhù)提取次數的增加,黃芩苷的含量雖有不同程度的增加,但Ⅱ到Ⅲ增幅變小,為了縮短生4]丁芳林,張?chǎng)┙?陳波,等,正交法優(yōu)化超聲醇提黃芩活性成分研究[J].湖南中醫藥大學(xué)學(xué)報產(chǎn)周期,采用提取2次。B因素對黃芩苷的含量無(wú)顯著(zhù)性影響,考慮到浸提時(shí)溶媒對藥材組織的浸潤和滲透過(guò)2008,28(3):14-1程,故將提取時(shí)間選為第1次2h,第2次1.5hC因素[5]宋承富,葉萍.黃芩提取物工藝研究[J].中華中醫藥學(xué)刊,2011,29(3):641-644對黃芩苷的含量亦無(wú)顯著(zhù)性影響,考慮到藥材提取的吸[收稿日期]2013-02-16收溶劑膨脹,因此將用量選定為8倍量。故經(jīng)優(yōu)選后確