山楂黃酮提取工藝研究

安徽農業(yè)科學(xué), Journal of Anhui Agri.Sci.2014,42(33):11857-11858責任編輯李菲菲責任校對況玲玲山楂黃酮提取工藝研究張明(楚雄醫藥高等專(zhuān)科學(xué)校藥學(xué)系,云南楚雄675050摘要[目的]優(yōu)化山楂果實(shí)和葉中黃酮的提取工藝。[方法]采用單因素和正交試驗法研究不同工藝條件對山楂黃酮提取效率的影響,得出最佳提取工藝及相關(guān)參教。[結果]試驗得出,山楂黃酮提取采用最適宜方法為滲漉法,其最佳工藝參數是:溶劑為50%的乙醇,料液比1:8g/ml,浸泡時(shí)間η2h,流速為中速(3ml/min)。[結論]此方法工藝簡(jiǎn)單,成本低,提取率高,無(wú)需加熱,剩余物無(wú)有害殘留,適用于山楂黃酮的大批量提取生產(chǎn)。關(guān)鍵詞山楂黃酮;黃酮提取;滲漉法;正交試驗中圖分類(lèi)號S661.5文獻標識碼A文章編號0517-6611(2014)33-11857-02Resrarch on extract technology to extraction of falconoid from hawthorn fruitsZHANG Ming( Chuxiong Medical College, Chuxiong, Yunnan 675005)Abstract [ Objective] To optimize technique for extracting nlavonoidsfrom hawthom fruit and leaf. Method] Using single-factor and orthogonalest method, effects of different technique conditions on extraction efficiency of favonoids from hawthorn were studied. The optimum extractiontechnique and relevant parameters were obtained. Result] The optimal method for extracting favonoids from hawthorn is percolation. The bestparameters are: 50% ethanol, solid-liquid ratio 1: 8 g/ml, soaking time 72 h, medium flow rate( 3 ml min).[ Conclusion] This process is simple, low cost, high extraction rate, no need for heat, the residual is unharmful to be disposed. The technique is suitable for mass production ofKey words Flavonoid of hawthorn; Extract flavonoids; Percolation method Orthogonal design當今社會(huì ),高血壓、高血脂等心腦血管疾病已嚴重影響1.2方法人類(lèi)的健康,因此,具有降壓、降脂功效的藥物研制一直受到1.2.1原料預處理。將干山楂果粉碎過(guò)20目篩,105℃干人們的廣泛重視燥2h,備用。山楂為薔薇科山楂屬植物果實(shí),又名紅果。山楂果實(shí)含1.22標準曲線(xiàn)制作。精密稱(chēng)取蘆丁15.0mg,加甲醇溶解有大量維生素C胡蘿卜素、黃酮類(lèi)化合物及鈣、鉀、鎂鈉等并定容至100ml,配制成150μg/m的蘆丁標準溶液,作為對礦物質(zhì)同時(shí)含有檸檬酸、蘋(píng)果酸、琥珀酸、山楂酸等多種有照品溶液。分別精密吸取蘆丁標準液0、1.00、2.00、3.00機酸,能增進(jìn)胃蛋白酶的分泌,具有消食化滯、助消化、增進(jìn)4.005.00ml相當于含蘆丁0、150、300、450、600、750μg,置食欲之功能。山楂中的總黃酮類(lèi)成分可促使血管擴張及冠于12.5m比色管中,加30%的乙醇補至5ml,各加入5%亞狀動(dòng)脈血流量增加,對人體可以起到降血壓、降血脂、增大心硝酸鈉溶液0.30ml,搖勻后放置5min,加人10%硝酸鋁溶臟血流量等作用。有研究結果表明,黃酮類(lèi)成分中牡荊素化液0.3m搖勻后放置6min,加1.0mp/ L NaOH溶液2.00合物具有抗癌作用。山楂樹(shù)葉不僅具有果實(shí)所含營(yíng)養價(jià)值m,用30%乙醇定容至刻度,搖勻,放置15mn,以零管為空與藥用價(jià)值,而且黃酮類(lèi)化合物和維生素C含量高于果實(shí)10白。搖勻后用1cm的比色杯,在510m波長(cháng)處測定吸光度,倍左右,因而更具開(kāi)發(fā)利用價(jià)值23。測3次取平均值利用山楂果實(shí)和山楂葉提取黃酮類(lèi)化合物,研制一種具1.2.3不同提取方法單因素提取。有保健功能的飲料酒——山楂黃酮酒,對果露酒、保健酒的1.2.3.1回流提取。取干燥山楂果粉10g,分別分別加發(fā)展是十分有意義的,同時(shí),對進(jìn)行山楂深加工,促進(jìn)林果產(chǎn)50%、70%乙醇60ml(編號①、②),70℃回流提取3次,每次業(yè)發(fā)展將起到積極的作用3。Ih,冷卻,過(guò)濾,轉移至容量瓶,得山楂黃酮提取液,定容至1材料與方法200ml,測總黃酮含量,并精密量取25ml提取液,測浸出物1.1材料含量1.11原料及試劑。山楂,市售;蘆丁標準品,中國藥品生1.2.3.2冷浸提取。取干燥山楂果粉10g,分別加50%、物制品鑒定所。甲醇、乙醇、亞硝酸鈉、硝酸鋁、NaOH,均為70%乙醇80m(編號③④冷浸提取2次,每次24h,冷卻國產(chǎn)分析純試劑過(guò)濾,濃縮提取液,轉移至容量瓶,得山楂黃酮提取液,定容112儀器及設備。雙光束紫外-可見(jiàn)分光光度計,日本至200ml,測總黃酮含量,并精密量取25ml提取液測浸出島津;DWF100植物粉碎機,河北省黃驊市科研器械廠(chǎng);Sar物含量torus萬(wàn)分之一電子天平;恒溫干燥箱;植物粉碎機;超聲波1.2.3.3滲漉法提取。取干燥山楂果粉10g,采用滲漉法提清洗儀;恒溫電熱套;旋轉蒸發(fā)儀。取,分別加50%、70%乙醇100ml(編號⑤、⑥)。干粉用適量溶劑濕潤2h,裝桶加入剩余乙醇靜置72h。中速回收溶基金項目楚雄醫藥高等專(zhuān)科學(xué)校2013年校本項目。劑,轉移至容中國煤化工至20ml,測總作者簡(jiǎn)介張明(1985-),男,云南楚雄人,助教,碩士,從事天然產(chǎn)物提取、分離、純化與生物活性測定研究黃酮含量,并CNMHG物含量。收稿日期2014-10-131.2.4滲漉法操作流程。滲漉法是往藥材粗粉中不斷添加11858安徽農業(yè)科學(xué)2014年提取溶劑使其滲過(guò)藥粉,提取液從下端出口流出的一種溶劑知,各因素影響大小依次是:料液比>提取溶劑濃度>浸泡提取法。根據之前不同方法比較,采用滲漉法具有幾個(gè)優(yōu)時(shí)間>流速。勢,此法可造成良好的濃度差,提取效率較高,且室溫提取不綜合兩者評價(jià),對于滲漉法提取山楂果肉粉末的工藝而破壞成分。比較適合山楂黃酮的提取,其工藝操作流程為:言,影響較大的是料液比和提取溶劑濃度,流速和浸泡時(shí)間藥材粉碎→潤濕→裝筒→排氣→浸漬→滲漉,共6個(gè)步驟。影響不顯著(zhù)。并且在實(shí)際試驗中發(fā)現,浸泡時(shí)間長(cháng)的產(chǎn)品在2結果與分析澄清度和色澤上要優(yōu)于短時(shí)間浸泡產(chǎn)品?？紤]到產(chǎn)品的適21單因素試驗結果從表1可以看出,3種不同方法之間用性,所以直接采用直觀(guān)分析結果作為最佳提取條件。提取結果存在明顯差異,①、②組回流提取和⑤、⑥滲漉法得表3正交試驗結果到的浸出物總量和總黃酮含量(以蘆丁計,以下同)明顯高于試驗號因素浸膏得率總黃酮含量③、④組冷浸提取法。ABCD(Y1)∥%(Y2)∥mg/ml表13種提取方法單因素提取試驗結果12224.8225m溶液浸浸出物浸出物總黃酮總黃酮3編號出物含量總重提取率測定量含量gmg myg 522321.521.48①0.61484.9184627.320.61074.8856674.4867.415③0.5174.733437.503221.841.88④40.59094.727247.2722.480.65495.239252.39657.7865.78K1()72.1072.5078.7073.55⑥0.72605.808059798K2(H1)71.3068.1869.7672.64K3()64.8167.52597462.02在試驗過(guò)程中觀(guān)察到加熱回流法處理的溶劑在冷卻后R(Y)2.431.666.323.85比其他2組提取方法提取的溶液渾濁,多次過(guò)濾后,開(kāi)始是k1(Y2)5.295.336.234.99澄清的,一段時(shí)間后會(huì )有少量絮狀沉淀出現再次加熱或振2(y2)5.335.284925.74K3(Y2)4.864.864.324.75蕩超聲處理都無(wú)法溶解沉淀。R(Y2)0.160.160.630.33綜合以上兩點(diǎn)結論,如果大量生產(chǎn)時(shí)建議采用滲漉法,能夠節約成本提取物的含量和提取操作過(guò)程都相對簡(jiǎn)單,3結論且結果穩定。該研究用滲漉提取法提取山楂黃酮。工藝流程:藥材粉22正交試驗結果按滲漉法的工藝操作要求,以流速、碎→潤濕→裝筒→排氣→浸漬→滲漉。工藝參數:用50%的浸泡時(shí)間、料液比溶劑濃度4個(gè)因素的3個(gè)水平,設計了乙醇作為溶劑,按照1:8g/ml的料液比投料浸泡72h后12(33)的正交試驗。正交試驗因素水平設計見(jiàn)表2,結果見(jiàn)以中速(3m/mn)收集提取液。特點(diǎn):滲漉屬于動(dòng)態(tài)浸出方表3。法溶劑利用率高,有效成分浸出完全,可直接收集浸出液,表2山楂黃酮提取L(3)正交試驗因素水平設計適用于貴重藥材、毒性藥材及高濃度制劑,也可用于有效成因素分含量較低的藥材提取。滲漉過(guò)程中不用加熱,避免有效成水平流速(A)浸泡時(shí)間比濃度(D)分損壞和溶劑的揮發(fā)。收集到的浸出液澄清透明,便于直接mAin(B)/h(C)∥g/ml檢測如用于相關(guān)飲品的制備,具有很強的技術(shù)優(yōu)勢和成本優(yōu)勢。3(中)5(高)1:12另外,采用乙醇作為溶劑,簡(jiǎn)便易行,節約成本,所用試劑對人體較為安全,因此適于大規模生產(chǎn),如生產(chǎn)相關(guān)酒精由正交試驗結果,采用直觀(guān)分析法,山楂果肉粉末滲漉飲品,則直接可以用白酒替代乙醇剩余物以糖、果膠蛋白質(zhì)提取的最佳提取條件為:A2B1C1D2;即用50%的乙醇按照1:8和纖維素等,可以作為食品原料加以綜合利用g/ml的料液比投料,浸泡72h,以中速收集提取液。對以上參考文獻數據進(jìn)行方差分析(置信度=95%),結果如下:影響滲漉提「1]劉北林,董繼生,霍紅山楂黃酮最佳禔取工藝探討[J],工藝技術(shù),2007,28(6):167-170取工藝的諸多因素中,以浸膏獲得率看,F4=8.77,P,>[2】架丹,張保東黃酮類(lèi)化合物提取和分離方法研究進(jìn)展[周口師范0.05;FB=4.00,P8<0.05;Fc=49.39,Pc>0.05;F=256學(xué)院學(xué)報,2007,24(5):88-893]劉北林董繼生霍紅,油松花粉中總黃酮提取的響應面優(yōu)化].現P>0.05。由此可知,各因素影響大小依次是:料液比>提代食品科技,2006,24(3):253-25%6取溶劑濃度>流速>浸泡時(shí)間。[4]蘇剛.山楂黃中國煤化工:m0,21(0以黃酮含量看,FA=446,P1=0.05;F=447,P。>51蘇剛山黃0.05;Fc=63.05,Pc>0.05;Fn=17.65,P。>0.05。由此可[6郭錦棠李伶CNMHGD:81-83山T心黃酮的正交實(shí)驗研究[J]中國藥學(xué)雜志,2005,40(2):1