DB44/T 540-2008 水產(chǎn)種苗中呋喃唑酮殘留量的測定 ——液相色譜法 Determination of furazolidone residues in fishery seedling by high performance liquid chromatography

本標準規定了水產(chǎn)種苗中呋喃唑酮殘留量的測定方法一液相色譜法。
本標準適用于水產(chǎn)種苗中呋喃唑酮殘留量的測定。？[第1頁(yè)] ICS 67.050 B 50號 DB44 廣 東 省 地 方 標 準 DB44/T 540-2008 水產(chǎn)種苗中呋喃唑酮殘留量的測定 　　　　— —液相色譜法 Determination of furazolidone residues in fishery seedling by high performance liquid chromatography 2008-07-11發(fā) 布 2008-10-01實(shí) 施 廣 東 省 質(zhì) 量 技 術(shù)1監 督 局 發(fā) 布 [第2頁(yè)] DB44/T 540-2008 刖 舀 本 標 準 的 附 錄A為 資 料 性 附 錄 ． 本 標 準 由 廣 東 省 海 洋 與 漁 業(yè) 局 提 出 。 本 標 準 由 中 國 水 產(chǎn) 科 學(xué) 研 究 院 南 海 水 產(chǎn) 研 究 所 質(zhì) 量 與 標 準 化 技 術(shù) 研 究 中 心 歸 口 ． 本 標 準 起 草 單 位 ： 農 業(yè) 部 漁 業(yè) 環(huán) 境 及 水 產(chǎn) 品 質(zhì) 量 監 督 檢 驗 測 試 中 心 （ 廣 州 ） ． 本 標 準 主 要 起 草 人 ： 黃 珂 、 陳 培 基 、 林 欽 、 李 劉 冬 、 黎 智 廣 、 王 增 煥 、 甘 居 利 ． [第3頁(yè)] DB44/T 540-2008 水 產(chǎn) 種 苗 中 呋 喃 唑 酮 殘 留 量 的 測 定 — — 液 相 色 譜 法 范 圍 本 標 準 規 定 了 水 產(chǎn) 種 苗 中 呋 喃 唑 酮 殘 留 量 的 測 定 方 法 一 液 相 色 譜 法 ． 本 標 準 適 用 于 水 產(chǎn) 種 苗 中 呋 喃 唑 酮 殘 留 量 的 測 定 ． 2規范性引用文件 　 　 下 列 文 件 中 的 條 款 通 過(guò) 本 標 準 的 引 用 而 成 為 本 標 準 的 條 款 ． 凡 是 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 其 隨 后 所 有 的 修 改 單 （ 不 包 括 勘 誤 的 內 容 ） 或 修 訂 版 均 不 適 用 于 本 標 準 ， 然 而 ， 鼓 勵 根 據 本 標 準 達 成 協(xié) 議 的 各 方 研 究 是 否 可 使 用 這 些 文 件 的 最 新 版 本 ． 凡 是 不 注 日 期 的 引 用 文 件 ， 其 最 新 版 本 適 用 于 本 標 準 ． 　 　GB/T 6682分 析 實(shí) 驗 室 用 水 規 格 和 試 驗 方 法 3原理 　 　 樣 品 中 呋 喃 唑 酮 用 二 氯 甲 烷 提 取 ， 無(wú) 水 硫 酸 鈉 去 除 水 分 ， 燕 發(fā) 濃 縮 提 取 液 ， 用 正 己 烷 液 一 液 萃 取 除 去 脂 肪 及 其 他 雜 質(zhì) ， 離 心 ， 取 下 層 清 液 經(jīng) 膜 過(guò) 濾 器 后 ， 用 反 相 色 譜 柱 分 離 ， 紫 外 檢 測 器 檢 測 ， 外 標 法 定 量 ． 4試劑和材料 　 　 除 另 有 規 定 外 ， 所 有 試 劑 均 為 分 析 純 ． 試ft用 水 應 符 合GB/T 6682規 定 的 一 級 水 ． 4. 1 PA喃 唑 酮 標 準 品 ：純 度X99.5%. 4.2乙ri：色譜純． 4.3二A甲烷。 4.4正己烷：用乙腈飽和． 4.5 85％磷酸 。 4.6無(wú)水硫酸鈉：經(jīng)640℃灼燒4h后 ， 貯于密閉容Is中備用． 4.7乙Ed水溶液：乙腈十水＝80十20. 4.8呋 喃 唑 酮 標 準r-備 液 ； 稱(chēng) 取10.0 mg呋 喃 唑 酮 標 準 品 ．用 乙i1水 溶 液 溶 解 并 稀 釋 定 容 至50皿L棕 色 容It瓶 中 ， 在 冰 箱 中 冷 藏 保 存 ， 保 存 期 一 個(gè) 月 ． 該 液 1 mL相 當 于 200 μ g呋 喃P-t酮 ． 4.9呋 喃PI酮 標 準 工 作 液 ：臨 用 前 ， 取 呋 喃 唑 酮 標 準 貯 備 液 ， 用 流 動(dòng) 相 稀 釋 成 濃 度 為0. 002 lig/nL^- 1.00 lig/dL的 標 準 工 作 液 。 5儀器和設備 5.1液相色譜儀 ， 配有紫外檢測器． 5.2分析天平：感量0.0 001 g. 5.3天平：感量0.01 g. 5.4高速組織搗碎機． 5.5旋轉蒸發(fā)儀． 5.6離心機。 5.7振蕩器． 5.8梨形瓶 ， 具塞 。 [第4頁(yè)] DB44/T 540-2008 5.9離心管 （ 100 mL) 5.10離心管 （ 5.0 mL) 5.11膜 孔 濾 器 （ 0.45 Pm) . 6操作步驟 6.1樣品制備 　 　 貝 苗 等 有 殼 種 苗 去 殼 ， 取 肌 肉 和 體 液 ； 魚(yú) 苗 、 蝦 苗 可 直 接 制 樣 ． 樣 品 切 成 小 塊 后 在 研 缽 或 高 速 組 織 搗 碎 機 中 勻 漿 ， 充 分 混 勻 。 6.2提取 　 　 稱(chēng) 取6. 1試 樣2g （ 精 確 到0.01 g)， 置 于100 ML離 心 管 中 ， 向 管 中 加20 mL二 氯 甲 烷 ， 攪 拌 分 散 后 浸 泡15 min ， 在 振 蕩 器 上 振 蕩10 min后 ， 向 離 心 管 中 加10 g無(wú) 水 硫 酸 鈉 ．再 振 蕩10 min, 4 000 r/min 離 心 10皿in ， 上 清 液 轉 移 至 梨 形 瓶 中 ， 殘 渣 用 15 mL二 氯 甲 烷 按 上 述 方 法 提 取 兩 次 ， 合 并 上 清 液 于 同 一 梨 形 瓶 中 ， 于 旋 轉 蒸 發(fā) 儀 上 在 45℃左 右 水 浴 下 減 壓 蒸 發(fā) 去 除 溶 劑 ， 蒸 發(fā) 速 度 控 制 在 每 秒 一 滴 。 6.3凈化 　 　 用 1.0皿L流 動(dòng) 相 和 2.0mL正 己 烷 溶 解 6.2中 提 取 物 并 充 分 洗 滌 梨 形 瓶 ， 將 液 體 移 人 5.0mL離 心 管 中 ， 在 4 000 r/m i n離 心 5 min ， 用 尖 嘴 吸 管 移 去 上 層 正 己 烷 層 ， 再 向 離 心 管 中 加 入 2.0ML正 己 烷 ， 混 勻 1 min, 離 心 ， 用 尖 嘴 吸 管 移 去 正 已 烷 層 ， 下 層 清 液 經(jīng)0.45皿 膜 孔 濾 器 過(guò) 濾 后 供I.￡ 分 析 ． 6.4測定 6.4. 1色譜條件 6.4.2色 譜 柱 ：Ca‘柱 ， 250 mmX4.6 mm(id)， 粒 度5 Pm. 6.4. 3流 動(dòng) 相 ：乙U Y-11十 水 十 磷 酸 ＝40十 60十 0.1. 6.4.4流速：0.8 %L/min. 6.4.5檢測波長(cháng)：365 nm. 6.4.6柱溫：室溫． 6.4.7進(jìn)樣量：50 W .,. 6.5色譜分析 　 　 根 據 樣 品 液 中 呋 喃 唑 酮 殘 留 量 情 況 ， 選 定 峰 面 積 相 近 的 標 準 工 作 溶 液 。 標 準 工 作 溶 液 和 樣 品 液 中 呋 喃 唑 酮 響 應 值 均 應 在 儀 器 檢 測 線(xiàn) 性 范 圍 內 。 對 標 準 工 作 溶 液 和 樣 品 液 等 體 積 參 插 進(jìn) 樣 進(jìn) 行 測 定 。 在 上 述 色 譜 條 件 下 ， PA喃pt酮 保 留 時(shí) 間 約 為 6 min 。 標 準 品 色 譜 圖 參 見(jiàn) 附 錄A圖A. 1. 7結果計算與表述 　 　 根 據 標 準 工 作 液 和 樣 品 液 的 峰 面 積 ， 按 公 式 （ 1） 計 算 樣 品 中 呋 喃 唑 酮 殘 留 量 。 X ＝魚(yú) 上 里 上 r二 999？？ 。 ． 。 。 一 。 ............................................ (1) 　 　 　 　 　 應 ．xm 式 中 ： 　 　X—樣 品 中 呋 喃 唑 酮 殘 留 量 ， 單 位 為 微 克 每 千 克 （ pg/kg); 　 　 才 — — 樣 品 液 中 呋 喃 唑 酮 的 峰 面 積 ； 　 　 幾 — — 標 準 工 作 溶 液 中 呋 喃 唑 酮 的 峰 面 積 ； 　 　C4 -—標 準 工 作 溶 液 中 呋 喃 唑 酮 的 濃 度 ， 單 位 為 微 克 每 毫 升(μ g/mL); 　 　 獷 — — 樣 品 液 最 終 定 容 體 積 ， 單 位 為 毫 升 （ 。L ） ； 　 　 刃 — — 樣 品 的 稱(chēng) 取 量 ， 單 位 為 克 （ g) 8線(xiàn)性范圍、 檢測限、 回收率 [第5頁(yè)] DB44/T 540-2008 8. 1線(xiàn)性范圍 　 　 本 方 法 的 呋 喃 唑 酮 標 準 工 作 液 線(xiàn) 性 范 圍 為 0.002 pg/mL-r 1.00 pg/mL. 8.2檢測限 　 　 本 方 法 的 檢 測 限 為2 pg/kg. 8.3回收率 　 　 在 樣 品 中 添 加 2 μ g/kg^-500 μ g/kg呋 喃PI IN時(shí) ， ． 回 收 率 為 70%-x100%. 8.4 1復性 　 　 本 方 法 的 相 對 標 準 偏 差 ＜15 %. [第6頁(yè)] DB44/T 540一一2008 附 錄 A 　 　 　 （ 資 料 性 附 錄 ） 呋喃唑酮標準品的色譜圖 DADI A. Sig=385.4 Rot-off 圖A.1 AA喃31酮標準品的色譜圖