床旁分析技術(shù)

●1514●檢驗醫學(xué)與臨床2008年12月第5卷第24期Lab Med Clin,December 2008,Vol, 5,No. 24床旁分析技術(shù)吳曉勇,史俊敏(貴州省貴陽(yáng)市第一人民醫院50002)[關(guān)鍵詞]床旁分析; 醫學(xué)檢驗: 質(zhì)量管理中囝分類(lèi)號:R446文獻標志碼:A文章編號:1672-9455<2008)24-1514-02床旁分析(POCT)是指在患者醫療現場(chǎng)進(jìn)行的實(shí)時(shí)醫學(xué)表面,樣品中的分析物將與抗體結合,加人標記第二抗體。反檢驗([1。從早期的使用液體試劑在試管中反應,發(fā)展為塑料襯應可直接肉限觀(guān)察定性,也可用反射光度計定量檢測。蟄干試劑(尿干化學(xué))和集高新技術(shù)(基因芯片)的反應系統。3.2 層析和液體循環(huán)裝置原理是 利用側向流動(dòng)。溶劑(通該技術(shù)最早用于家庭或醫院患者在床旁監測尿糖和血糖水平.常是樣品)流過(guò)含有標記抗體的多孔基質(zhì)之后,進(jìn)人固定第二隨著(zhù)新技術(shù)的發(fā)展,POCT使用更為便捷,范圍更廣,可監測血抗體的區域產(chǎn)生顏色反應,用反射光度計定量檢測。例如衣原凝狀態(tài)、心肌損害酸堿平衡、感染性疾病、藥物濃度、內分泌體、藥物、毒物、心肌標志物等。另一種利用免疫層析原理不用等?，F已由臨床檢驗擴展到食品衛生、環(huán)境和法醫等。儀器達到定量。例如膽固醇測定:將血液樣加到多孔基質(zhì)-1 P0CT基本技術(shù)端.滲人含有酶標記物的溶劑貯存池，通過(guò)毛細作用樣品和標POCT的儀器要求方便、準確、安全、快捷?？瑟毩⒌?一記物流向固定抗體的反應區發(fā)生反應.樣品中分析物濃度越次性檢測裝置,連接溫度檢測器、混合器、光吸收器、熒光檢測高,反應面積和呈色帶越長(cháng)、越深。器時(shí),既可實(shí)現定量又可進(jìn)行數據處理貯存.如曲線(xiàn)校正.質(zhì)控生物傳感技術(shù)分析結果保存等(2)。生物傳感器含有一個(gè)生物識別分子(酶、細胞、組織抗體、1.1 POCT設備簡(jiǎn)易的試紙條.手掌式讀數檢測器、全自動(dòng)抗原、蛋白質(zhì),DNA等)和一個(gè)傳導裝置。常規應用的兩個(gè)識多通道式檢測器.別分子是酶和抗體或被檢抗體檢測的抗原,傳導裝置是利用電1.2 POCT材料 單層或多層材料裝置.化學(xué)和光化學(xué)原理設計而成。例如將e知抗體標記在一個(gè)反1.2.1單層原理將被檢樣品滴在層析紙上,利用層析紙的射物表面構成光柵,樣品中的抗原被捕獲后將改變折光方式和特殊性質(zhì),血液將均勻分布,待檢成分與預先浸漬在層析紙上反射光的顏色,通過(guò)光學(xué)檢測器而達到定量的目的。另一項技的試劑產(chǎn)生顏色反應,有色產(chǎn)物通過(guò)與標準色板比較而定量。術(shù)是在波導表面產(chǎn)生瞬時(shí)光,以激發(fā)熒光的產(chǎn)生。波導構成反例如尿液中的葡萄糖在試紙中葡糖萄氧化酶的催化下,生成葡應室的一面;其比固有捕獲抗體,標記有熒光的“二抗”沉積于萄糖酸內酯和過(guò)氧化氫。在過(guò)氧化物酶的催化下,過(guò)氧化氫使另一面或置于反應室中,樣品加人后,標記“二”抗被溶解下來(lái)，色素原(鄰甲聯(lián)苯胺、碘化鉀)氧化而呈色。被測物與固化的抗體及標記二抗形成“夾心"。瞬時(shí)波只激發(fā)1.2.2 多層材料 多層的分類(lèi):第一種多層試劑由高分子膠 波導表面的熒光分子,檢測熒光強度可定量被測物濃度。片組成,上層是擴散層也是反射層,由醋酸纖維獻和二氧化鈦5 POCT的質(zhì)量管理(TiO2)色素組成。使反應按順序進(jìn)行,直至終點(diǎn)互不干擾。臨床實(shí)驗室為了獲取正確的檢驗結果,要求正確的從患者在膜的底層檢測反射光的強度監測顏色的變化來(lái)定量。第二身上、在適當時(shí)間采取正確的標本,使用恰當的分析方法,合理種多層試劑由血液分離層和反應層構成，血液樣品經(jīng)過(guò)血漿分的費用,最后獲得可靠的檢驗結果。由于POCT方便、快速，離層時(shí),紅細胞被過(guò)濾掉，上血漿進(jìn)人玻璃纖維構成的貯存池操作容易,可由非檢驗人員操作,不必在正規的實(shí)驗室進(jìn)行,質(zhì)與各種試劑反應,該設計避免了樣品的制備。量控制難于保證。因此●必須加強POCT的質(zhì)量管理。POCT2電化學(xué)檢測裝置的使用必須堅持與合格實(shí)驗室實(shí)踐的標準,開(kāi)展室內質(zhì)控、質(zhì)電化學(xué)終點(diǎn)檢測法是當今POCT技術(shù)的新進(jìn)展，以血糖量保證、能力比對和記錄.校正記錄。檢測為例,使用葡萄糖氧化酶和鐵氰酸鹽反應系統,檢測條有5.1室內質(zhì)控(IQC)IQC是控制檢驗性能的重復性或精密10個(gè)測定點(diǎn),將其安裝于檢測器中,通過(guò)敏感電極檢測氰鐵酸度,保證系列結果的一致性,實(shí)時(shí)評價(jià)檢驗性能是否符合規定鹽的還原產(chǎn)物而定量葡萄糖濃度。該裝置叮小到類(lèi)似于鋼筆,要求,是否建立在可接收范圍內。在分析前.分析中分析一定也有手掌式檢測器。的質(zhì)控物濃度,可以確認分析過(guò)程和操作是否正確。均值標非儀器定量檢測條,不需要特殊檢測器,但可通過(guò)呈色的準差質(zhì)控最常用的質(zhì)控方法，是以生化室內質(zhì)控圖的制作為大小、顏色的深淺而定量。例如膽固醇測定:試劑和樣品通過(guò)例。用單一濃度未定質(zhì)血清反復測定20次(批間、日間),計算層析條中含膽固醇脂和氧化酶的區城,產(chǎn)生過(guò)氧化氫反應,該均值()、警告線(xiàn)(工士2s)和失控線(xiàn)(士3s)。用同批號的質(zhì)控物進(jìn)入含有辣根的過(guò)氧化物酶和MBTH/DMA的檢測區,產(chǎn)血清,隨患者標本分析,結果點(diǎn)在圖上,直線(xiàn)連接。生顏色變化。呈色的大小深淺與含量呈正比。葡萄糖測定:葡5.2-警告一個(gè)結果超出靶萄糖分析系統含有葡萄糖氧化酶、過(guò)氧化物酶指示劑染料和.值的中國煤化工超出靶值的3倍標準葡萄糖氧化酶抑制劑。抑制劑濃度是建立在每- -分析區臨界差。 2fHCNMHG向超出靶值的2倍標值濃度值域上。顏色的變化區城數取決于分析物濃度。準差。R.行動(dòng)表示2個(gè)連續結差異超出4倍標準差。4.行動(dòng)3免疫分析裝置表示4個(gè)連續結果在同- - 方向超出靶值的1倍標準差。102。3.1 流動(dòng)式裝置其原理是將第- -抗體共價(jià)結合在多孔基質(zhì)行動(dòng)表示10個(gè)連續結果在同一側。該規則要求每天做2次質(zhì)檢驗醫學(xué)與臨床2008年12月第5卷第24期L.ab Med ClinDecember 2008,Vol. 5.No. 24●1515●控分析。對于POCT質(zhì)控,要求操作者在分析時(shí)作一次質(zhì)控安全、鍵康要求,如樣品和消耗品的處置;(10)開(kāi)展POCT的分析。不需儀器分析的由制造商提供陰性、陽(yáng)性對照。利弊。培訓后,經(jīng)專(zhuān)門(mén)的相關(guān)組織考核,發(fā)給認可或合格證書(shū)，5.3窒間質(zhì)量評價(jià)(EQA) EQA 是能力比對試驗,是比較不并定期接受檢查和再培訓。同檢驗點(diǎn)的試驗性能。參與實(shí)驗室在同- -時(shí)間 、對同- -樣品進(jìn)6.7 國內外對于 POCT應用的管理方法(門(mén)(1)美 國的管理行分析,將分析結果回報給組織者。組織者對回報結果進(jìn)行分辦法 :按照美國法規,開(kāi)設任何一個(gè)POCT點(diǎn)都必須接受政府析,相互與靶值進(jìn)行比較分析。對每一個(gè)參與者的結果作出評有關(guān)部門(mén)審核,有人員培調訓計劃、認可證書(shū)、有對檢驗科所要求價(jià)。EQA評價(jià)實(shí)驗的實(shí)驗性能，而對患者樣品的檢驗結果的 的所有制度,有質(zhì)量保證、質(zhì)量控制措施,有各項文檔記錄,以質(zhì)黛控制則依賴(lài)于IQC, POCT 開(kāi)展EQA難度較大，及有和檢驗科結果的比對和工作協(xié)調的程序性文件和記錄。5.4 質(zhì)量保證 開(kāi)展臨床實(shí)驗室所要求的質(zhì)控活動(dòng)。要求 經(jīng)審核批準后,在規定時(shí)間內開(kāi)展有關(guān)項目,期間還必須參加POCT儀器穩定方法準確可靠、耐用、操作方便。人員培訓簡(jiǎn)政府指定的室間調耷評價(jià),隨時(shí)接受政府有關(guān)部門(mén)的質(zhì)量評單、易使用者接受。維護保養、試劑保存方便。估,不合格者將取消其開(kāi)展資格。POCT的所有活動(dòng)計劃都必6 POCT 應用指南0]須服從美國病理家學(xué)會(huì )的實(shí)驗室認可標準要求,POCT的所有開(kāi)展POCT的主要原因是縮矩檢驗時(shí)間?；颊叩氖芤媸菣z查項 月都須經(jīng)過(guò)認可。認可內容包括能力比對、質(zhì)氧控制和縮短住院時(shí)間.檢查方便。醫院受益是節省支持性耗材。質(zhì)量改善、標本處理試劑、校正和標準物及過(guò)程、儀器設備、人6.1 問(wèn)題分析 檢驗項目少,操作人員缺乏正規的培訓,工作 員素質(zhì)和職責.實(shí)驗室安全等。(2)英國的管理辦法:POCT檢環(huán)境不- .定符合分析要求。驗也需要通過(guò)英國皇家病理學(xué)會(huì )的認可,其認可標準包括組織6.2 生物安全問(wèn)題 生物安全保障困難.管理、人員和指南、設施和設備、政策和策略、人員發(fā)展及教育6.3效益分析哪些患者需要效 益分析,現在實(shí)驗室服務(wù)存5個(gè)方面。在什么樣的問(wèn)題.實(shí)驗室的檢驗費用與POCT比較差異是否POCT是臨床實(shí)踐的一部分。從商業(yè)上講,它有幾十億美較大,實(shí)施POCT人員能否標準操作，提供準確.可靠的檢驗元的市場(chǎng)。高精技術(shù)的應用及操作指南的管理體系的逐步健結果,患者是否接受,是否有適合的儀器.便于保存的試劑和消全,使POCT的應用前景廣泛,但真正效益還并非明確,盡管耗品。最重要的問(wèn)題是使用POCT臨床受益什么?患者受益它的使用極 大縮短了檢驗結果回報時(shí)間( turn around time,什么?是否能提高醫療服務(wù)水平?TAT),但對死亡率、住院率、住院時(shí)間的改善并不明顯。因6.4 性能分析POCT的服務(wù)文持與實(shí)驗室檢驗有很大的不 此,關(guān)于POCT的有效性還有待進(jìn)一步研究。由于醫生對快同,如技術(shù)、裝備、人員素質(zhì)、實(shí)驗條件、質(zhì)量保證體系等。速診斷的要求(特別是 在加強病房、急診室),患者作自我臨測POCT的性能評價(jià)包括儀器的技術(shù)性能、人員素質(zhì)、結果分析的需要,以及新 技術(shù)的整合,使得POCT的發(fā)展勢頭必將繼續判斷解釋、標本的采集管理、生物安全措施.檢驗結果的可靠下去。性、結果的記錄等。6.5 設備的選型 需要用于哪些項目的檢驗?要求的準確性參考文獻和精確性.檢驗周期是多少?常規分析量是多少?要求的環(huán)境1 陶 義訓.對POCT的認識[J].上海醫學(xué)檢驗雜志,999,14條件、消耗品的貯存條件.維護保養條件,體積大小,儀器使用(3);3. .的難易程度,安全支持條件.檢驗結果與專(zhuān)業(yè)實(shí)驗室結果是否2叢玉隆.當代檢驗分析技術(shù)與臨床[M].北京:中國科技出-致。版社,2002.368.6.6 人員培訓為保證POCT的檢驗質(zhì)量,有必要對使用者3彭黎明.檢驗醫學(xué)自動(dòng)化及臨床應用[M].北京:人民衛生進(jìn)行培訓。培訓內容包括分析前、分析中和分析后的全過(guò)程，出版社,2000. 14.具體內容為:(1)檢驗.臨床、病理生理的基本知識;(2)標本類(lèi)4 Hadson MP. Cavdiac mauvestpoint of care tesing[J]. Clin型、采樣時(shí)間要求.生理變化、藥物影響等;(3)標本采集技術(shù);chim Acta,2999 ,4(2) :32-37.(4)分析儀器及試劑準備;(5)試驗操作;(6)質(zhì)量控制和質(zhì)控分析.解釋;(7)結果記錄、報告和保存;(8)結果解釋及咨詢(xún);(9)(收藊8期:2008-06-30)(上接第15f1頁(yè))3米洪元,楊健.SCRP在A(yíng)OPP中的價(jià)值[J].中華臨床醫藥雜志,2002 ,3(22) :68.參考文獻.4楊健.外周血WBC增多與臨床[J].醫師進(jìn)修雜志,1990,131楊健,陳高紅. C-反應蛋白的臨床應用近況[J].重慶醫藥，(4) :29-31.1992 ,21(2):123-125.2黃維周,徐勉珍,諶輝,等. C反應蛋白在感染性疾病中的臨中國煤化工(稿日期200807-03)床研究[J].中華內科雜志,1993,32(1) :55-56.MHCNMHG