黃芪的乙醇提取工藝優(yōu)化研究

安徽農業(yè)科學(xué), Joumal d Anhui Agri,si.200,37(9):4110-4ll貴任編輯張楊林責任校對況玲玲黃芪的乙醇提取工藝優(yōu)化研究昝麗霞(陜西理工學(xué)院生物科學(xué)與工程學(xué)院,陜西漢中n嬰[目的]優(yōu)選黃芪的最佳乙醇提取工藝。[方法]朱用正交試驗法,以干青收率、黃芪甲苷含量、總黃酮含量為指標對形響黃芪中有效威分提取的因素進(jìn)行考察。[結果]黃芪有效成分最佳提取工藝條件為加%乙醇濃度,濫度加0℃,料液比1:12,提取3h。在該工藝條件下,測得干膏得率為25%左右黃芪甲苷含量超過(guò)3%,總黃酮含量在0.8%左右。[結論]優(yōu)選出的黃芪乙醇提取工藝科學(xué)、經(jīng)濟,可有效節約資源,用于工業(yè)生產(chǎn)。關(guān)鍵詞黃芪甲苷;總黃酮;正交試驗;綜合評分中圖分類(lèi)號R97文獻標識碼A文章編號017-6611(2009)09-04110Study on the Optimination of Ethanol Extraction Tect niques for rodix astragaliZAN Li-xia (School of Biological Science and Engineering, Shaanxi University of Technology, Hanzhong, Shaam 723001)Abstract [Objective] The aim watraction techniques for Radi astragali. [Method ] with extract yield, astagtotal flavone content as indices, the influencing factor on the extraction of active components from R. astragali were investigated. I Result] The bestchnological conditions for the extraction of activents from R. astraas follows: 70% ethanol, extraction temperature of 70C, solid-liquid ratio of 1: 12 and extraction time o 3 h. Under these technology conditions, the extract yield was about 25%, the astragaloside content was morethan 3% and total flavone content was about 0.8%.[Conchusion] The optimal technology for the ethanol extraction o R. astagali was scientific and ecanonical. And can save resources and instruct the industrial practice effectivelyKey words Radir astragali; Saponins: Total flavone: Orthogonal eperimental; Synthetical mack黃芪( Radia astragali)為豆科植物膜莢黃芪 astragalus124樣品中黃芪甲苷含量的測定。稱(chēng)取黃芪甲苷對照品ebrananceus(Fsch,)Bge,和蒙古黃芪A. mongholicus(Bg.)2m,用無(wú)水乙醇定容至0m量瓶中,搖勻。分別精密吸取Hsia的干燥根,主要分布于我國西北、華北和東北等地區,對照品溶液0、0.6、0.8、1.0、12、1,4、1.6m于量瓶中,水浴加具有補氣固表脫毒排膿生肌、利尿的功效。筆者采用乙醇熱揮去溶劑,各加入020m濃度5%香草醛冰醋酸溶液和提取正交試驗法以干膏收率黃芪甲苷和總黃酮含量為指0.80ml高氯酸密塞,于7℃水浴恒溫加熱20min,取出后立標采用綜合評分法對黃芪的乙醇提取工藝進(jìn)行了優(yōu)化。即用流水冷卻加冰醋酸5m搖勻,顯色。用未加對照品的1材料與方法溶液作空白對照在540mm處測定,制備標準曲線(xiàn)。11材料TU12型紫外分光光度計(北京惠譜通用儀器參考文獻[2]對黃芪樣品中甲苷進(jìn)行測定,根據回歸方公司),w8OG型微波爐(佛山市順德微波爐電器有限公程計算結果司),Ks120E型超聲波清洗機(寧波生科儀器廠(chǎng)),SH421-1.2,5樣品中總黃酮含量的測定。稱(chēng)取在120℃干燥至恒420型恒溫水浴鍋(河北省黃驊市航天儀器廠(chǎng)),FAON型重的蘆丁對照品10mg,置50m量瓶中加甲醇定容至刻度電子天平(上海天平儀器廠(chǎng))。中藥黃芪(購自陜西漢中藥材搖勻。吸取該溶液0、1、2、34、5m分別置于25m量瓶中加公司),黃芪甲苷對照品(中國藥品生物制品檢定所標號濃度5%NNO21m,依次每隔6min加濃度10%A(NO3)210781-08),蘆丁標準品(批號00802005,中國藥品生物制品ml,濃度4%NaOH0ml,最后各用水稀釋至刻度,搖勻放置15檢定所),試劑均為分析純mn,用第1瓶作空白,在500m處測吸收度繪制標準曲線(xiàn)。12方法參考文獻[3]對黃芪樣品中總黃酮進(jìn)行測定,根據回歸1.21正交試驗設計。選擇料液比提取溫度、提取時(shí)間、方程計算結果乙醇提取溶劑濃度為考察因素每因素各取3個(gè)水平,選用2結果與分析L4(3)正交表進(jìn)行試驗以干膏收率黃芪甲苷含量及黃酮含21千膏收率試驗結果由表1可知3號試驗即乙醇提量為評價(jià)指標采用綜合評分法進(jìn)行數據分析(其權重系數取濃度0%料液比1:2提取溫度0℃條件下提取4h,所分別為0.1、0.504)1得干膏收率最高,為27.13%。122樣品溶液的制備。稱(chēng)取9份黃芪藥材粉末(過(guò)40目2.2黃芪中甲苷含量的測定結果篩)每份10g,按正交表各列號項下條件分別進(jìn)行提取,過(guò)221標準曲線(xiàn)繪制結果。以吸收度值A為縱坐標黃芪濾濾液合并離心取上清液減壓濃編至無(wú)醇味加水定容甲苷量c(g)為橫坐標進(jìn)行線(xiàn)性回歸得方程:A=487805C于100ml量瓶中,備用。7.317,r=0.994(n=6)。表明黃芪甲苷在120~320鵂12.3千膏收率試驗。量取9份樣品溶液各50m1,置已干范圍內有良好的線(xiàn)性關(guān)系。燥至恒重的蒸發(fā)皿中水浴蒸干,殘渣于106℃干燥3h取2.22含量測定結果。由表1可知2號試驗即乙醇提取出,置干燥器中放置30min后迅速稱(chēng)重計算。濃度1:1n面沮度“nq條件下提取3h,測得甲苷含中國煤化工基金項目陜西省教育廳專(zhuān)項科研計劃項日(6K):陜西理工季院2,3CNMHG作者摘介普麗霞(1-),女陳西韓城人,項士,講師,從事天然藥231標準曲線(xiàn)繪制結果。以吸收度(Y作縱坐標蘆丁濃物有效成分研究度(X)作橫坐標繪制標準曲線(xiàn)得回歸方程:Y=0.4995X+收稿日期20001-150003,r=0.99n=5)。結果表明峰面積與濃度呈良好3褻9期昝麗霞黃甕的乙醇提取工藝優(yōu)化研究4111的線(xiàn)性關(guān)系濃度70%料液比1:12,提取溫度70℃條件下提取4h,測得232含量測定結果。由表1可知,3號試驗即乙醇提取黃酮含量最高,為09%。表1正交試驗方案及結果因素Fass評價(jià)指標 Evaluation ind提取濃度提取時(shí)間提取溫度干膏得率∥%黃芪甲苷含量∥%黃酮含量∥%綜合評分Exraction concentration Soid-liqunid ratio Extraction time Extract3.1803191,4126.100.5%480m∞∞∞∞3.3717.03.000.2I:1017.5079.2.623.130.8685.48:100568,402.787.0注:千膏收率評分=干膏收率最大干膏收率x0.1×100:黃芪甲苷含量評分=黃芪甲苷含量/最大黃芪甲苷含量x0.5×100;總黃酮含量評分x總黃酮含量/最大黃酮含量x0.4×100;綜合評分=干膏收率評分+黃芪甲苷含量評分+總黃酮含量評分。最憂(yōu)水平為AB3C2DNote: The extract yield mark s extract yield/maximum etract yield O 1 x 100: Astragalaside oontent mark astragaloside content/ maximum astragaloside can-tent x0. 5x 100: Total flavone content mark total flavone content/ mmmm total flavone content 0. 4 x 100; Synthetical mark= extract yield markcontent mark+ total flavone content mak. The optiman level is A, B,Cl24因素影響分析結果表1表明,乙醇提取試驗中根據率最高。在通常情況下,人們認為提取時(shí)間越長(cháng),有效成分極差大小得出各因素作用主次為A>B>C>D,即提取濃度提出率越高。該試驗結果顯示,長(cháng)時(shí)間高溫條件將會(huì )使黃>料液比>提取時(shí)間>提取溫度;最佳工藝組合為芪甲苷分子結構發(fā)生改變從而使其喪失生物活性。因此AB3C2D3,即乙醇提取濃度7%料液比1:12提取溫度70℃降低提取溫度對保持甲苷提取物活性具有重要意義熱浸法的條件下提取3h。方差分析結果表明提取濃度對提取效果更好地保持了甲苷的活性,使甲苷提取率有所提高。的影響有顯著(zhù)意義,其他3因素的影響無(wú)顯著(zhù)意義。(2)黃芪中甲苷和黃酮均為黃芪的有效成分。該試驗采25驗證試驗結果為驗證上述優(yōu)選的微波提取工藝最佳用正交設計,以黃芪中黃芪甲苷和總黃酮2種成分的含量作條件的穩定性稱(chēng)取20g黃芪3份,分別按所確定的最佳條為優(yōu)選正交方案的指標進(jìn)行考察以綜合評分值優(yōu)選黃芪熱件進(jìn)行提取測得結果見(jiàn)表2。浸提的工藝,以節約藥品用量,降低能量得到最大產(chǎn)率為原衰2證試驗結果則,重復驗證試驗表明優(yōu)選出的工藝科學(xué)、經(jīng)濟,可用于指ble 2 The results d validation te導工業(yè)生產(chǎn)。黃芪藥材粗粉∥g干膏黃芪甲總黃酮參考文獻Crude powder frun[]羅毅劉剛周本宏等綜合評分法優(yōu)選黃芪的水煎提工藝[刀]中國Astragaloside Total flavone醫院學(xué)雜志,2004,2411):667-60.cuta(2]姚麗哪林政義陳芳不同種類(lèi)黃芪的皂苷含量比較[門(mén)]淮海醫藥25.863.41x06,23(2):102025.233.200833]陳永城李寶才張健,等.蘆丁提取工藝改進(jìn)的研究[門(mén)]中醫藥學(xué)刊x0042():x061[4]歐陽(yáng)臻常鈺,李永輝,等桑葉多糖的提取純化及其含量測定[時(shí)珍國醫國藥,06,3(10):1403結論與討論(1)試驗結果表明熱浸法提取黃芪中甲苷和黃酮的效4N以ⅧA八心mN,W%乳原成體細形體內及體外性的實(shí)驗研究(上接第4059頁(yè))regenesis[J].J Bad Chen,0,1(46):3081-3037[3] KENNEY N J SMITH G H. 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