萘普生/聚乙二醇-聚谷氨酸芐酯共聚物納米膠束

第24卷第1期中山大學(xué)學(xué)報(醫學(xué)科學(xué)版)Vol.24 No.12003年 1月JOURNAL SUN YAT SEN UNIVERSITY ( MEDICAL SCIENCES)Jan. 2003萘普生/聚乙二醇-聚谷氨酸芐酯共聚物納米膠束潘仕榮,馮敏(中山大學(xué)附屬第一醫院心血管研究室,廣東廣州510080)滴要:[目的]研究萘普生( naproxen )聚乙二醇聚谷氨酸芐酯共聚物( PEG- PBLG納米膠束的制備、形態(tài)和體外釋藥規律。[方法]合成了PEG- PBLG兩親嵌段共聚物;采用透析法制備了萘普生/PEG-PBLG載藥膠束通過(guò)透射電鏡觀(guān)察、動(dòng)態(tài)光散射測定、紫外吸光度測定等手段分析膠束的微觀(guān)形態(tài)、粒徑大小和載藥量、測定了載藥膠束的體外釋藥速率。[結果]萘普生/PEG PBLG載藥膠束粒徑在30~ 245 nm范圍膠束呈核殼型結構PEG-PBLG膠束可大大增溶疏水性藥物萘普生/PEG- PBLG膠束具有緩釋作用萘普生的體外釋放速率大小主要由介質(zhì)的pH值決定,也受膠束粒徑的影響。[結論] PEG- PBLG載藥膠束是一種緩釋性 能良好、有應用前景的納米膠束。關(guān)鍵詞:聚乙二醇聚谷氨酸芐酯共聚物;核殼型納米膠束;萘普生;體外釋藥中圖分類(lèi)號:R944.9文獻標識碼:A文章編號: 1000 - 257X( 2003 )1- 0052 -06Naproxen/ Poly( Ethylene Glycol )Poly( Benzyl L -Glutamate ) BlockCopolymer Nano-MicellesPAN Shi-rong , FENG Min( Cardiovascular Rescerch Laboratory , The First Afiliated Hospital SUN Yat-sen University , Guangzhou 510080 , China )Abstract :[Objective ] To study the preparation of Naproxen/ poly( ethylene glycol )-poly( benzylL- glutamate ) copolymer micelles ,their morphology and drug release characteristics in vitro. [ Meth-ods] The poly( ethylene glycol )poly( benzyl glutamate ) amphipathic copolymers were synthesized ，Naproxen/ PEG PBLG copolymer micelles were prepared by dialysis method. Microscopic morphology，diameter and drug- loaded amount of the micelles were examined by means of TEM ,DLS and UV re-spectively , and their in vitro drug release rates were measured. [ Results] The diameters of micelles .were in the range of 35 ~ 245 nm , and the core-shell structure existed in the micelles , PEG- PBLGcopolymer micelles could solubilize hydrophobic drugs. In vitro Naproxen sustained release from mi-celles was observed. [ Conclusion] Drug/PEG-PBLG copolymer micelles display perfect drug -releaseperformance and can be potentially used as a new nano- pharmaceutical carrier.Key words : poly( ethelene glycol )-poly( benzyl glutamate ) copolymers ; core-shell type nano mi-celles ; drug-delivery system ; naproxen ; in vitro sustained drug- release[J SUN Yat-sen Uni( Med Sci),2003 24( 1):52-57 ]由親水嵌段與疏水嵌段組成的兩親型AB嵌這種新型的納米釋藥系統受到了國內外學(xué)者們的段共聚物在水溶液能夠形成球狀膠束其疏水嵌重視1~3。聚乙二醇( PEG )是無(wú)毒和非致免疫的段構，成膠束的芯而親水嵌段構成水合性外殼膠親水性聚合物具有良好的生物相容性,它常被用束直徑在納米級范圍。疏水嵌段組成的芯可以用作蛋白質(zhì)的修飾以減少抗原性或被用作藥物微球作微藥庫,由于大多數藥物是疏水性的,它們可以表面中國煤化工收41。聚a氨基酸是通過(guò)化學(xué)鍵合或物理包埋方式結合到膠束的芯內，結Mh. CNMH G類(lèi)生物材料主鏈上眾收稿日期2002-05 - 08基金項目廣東省科委科研攻關(guān)基金資助項目( 9622020 -01 )作者簡(jiǎn)喬瘤徑楚1944- )男廣東廣州人研究員博士生導師;馮敏(1974- )女現為新加坡南洋理工大學(xué)博士后.第1期潘仕榮等.萘普生/聚乙二醇_聚谷氨酸芐酯共聚物納米膠束多的肽鍵在體內蛋白酶作用下極容易斷裂降解生( BI200SM美國布魯克海文公司)測定膠束的粒成無(wú)毒的小分子具有良好的生物相容性和生物降徑7。標準曲線(xiàn)的測定萘普生樣品適量用DMF解性。聚谷氨酸芐酯PBLG )是其中一種在緩釋制溶解制成質(zhì)量濃度為0.040mg/mL的溶液。用劑中使用較多的疏水性氨基酸均聚物。萘普生化Hitatch-2000U型雙光束分光光度計在240 ~ 400學(xué)名為d-2( 6-甲氧基-2'-萘基)丙酸[ d-2( 6-nm之間掃描331 nm吸收峰靈敏度高,干擾小選methoxy-2'-naphthyl ) propioric acid] ,是芳香丙酸331 nm為檢測波長(cháng)。精密稱(chēng)取萘普生40 mg ,用類(lèi)非甾體消炎鎮痛藥。為改善病人服藥的順應性DMF溶解并稀釋到100 mL為貯備液。用移液管和安全性國內外先后開(kāi)發(fā)了萘普生控釋片、液體移取0.5 1.0 2.04.08.0 ,10.0 mL貯備液置于緩釋制劑和腸溶制劑但尚未見(jiàn)有萘普生納米膠束25 mL容量瓶中,用DMF定容至刻度。使用75-2的報道。納米膠束研究選擇萘普生作模型藥物對紫外分光光度計(UV)在331nm處測定各溶液的其他藥物亦有參考意義。本文合成了聚乙二醇_聚吸光度擬合標準曲線(xiàn)公式為d naproxen )( g/L)谷氨酸芐酯(PEG-PBLG)兩親嵌段共聚物,由此制=0.1402 A -0.000 96( n=6,r=0.999 8%膠備了萘普生( naproxen )共聚物載藥膠束,并研究束的載藥量測定:定量的載藥膠束干品置入透析了該載藥膠束的微觀(guān)形態(tài)和體外釋藥規律。袋密封袋外加入定量DMF.37C振蕩3H(振蕩器同1.5)用75-2C紫外分光光度計測定DMF液1材料與方法在331 nm處吸光度,由上述標準曲線(xiàn)計算載藥量。1.5萘普生的增溶性試驗1.1主要試劑定義投藥量D=萘普生/(聚合物+萘普生)xNaproxer(浙江仙居制藥股份有限公司批號100%選D分別為5%、10%、20%、30%、40%、98021 )透析袋( SMI公司孔徑:數均相對分子質(zhì)50%和60%,總投料量為20mg,制備萘普生/量Mr≤3500 ),a-甲氧基、w~氨基~聚乙二醇PEG-PBLG膠束,PEG- PBLG的數均相對分子質(zhì)量( MeO-PEG-NH2 )由實(shí)驗室自制5],三光氣(固體，M, ,分別選用7.8x10*、9.9X103與15.2X 103 ,上?；?zhuān)科學(xué)校實(shí)驗化工廠(chǎng)》其它試劑為市售膠束溶液離心除去未包埋藥物。按1.4方法測定分析純所有溶劑使用前須經(jīng)蒸鎦處理。載藥量求最大增溶量。1.2 PEG-PBLG 嵌段共聚物的制備1.6萘普生 膠束的體外釋藥試驗谷氨酸在濃硫酸催化下先進(jìn)行γ_芐酯化、再標準曲線(xiàn)的測定:精密稱(chēng)取萘普生25 mg ,用與三光氣作用制備谷氨酸酯羧酸酐最后在MeO-0.1mol/LNaOH溶解并稀釋到100mL為貯備PEG-NH2引發(fā)下聚合生成PEG-PBLG嵌段共聚液用移液管移取0.1 0.5 ,1.0,1.5 2.0 3.0 mL物6]。由核磁共振法( MNR )測定PEG/PBLG兩貯備液置于25 mL容量瓶中用蒸餾水稀釋至刻度嵌段的物質(zhì)的量比值并計算PBLG嵌段以及共聚制備成1~30mg/L系列濃度溶液用紫外分光光度計在331 nm處測定各溶液的吸光度擬合標準物的數均相對分子質(zhì)量M, n。曲線(xiàn)方程為:p( naproxen )( mg/L) = 150.0A1.3 Naproxen/ PEG-PBLG載藥膠束的制備稱(chēng)取定重和定配比的PEG- PBLG與naproxen42.41( n=6 r=0.999 8%溶解于N ,N-二甲基甲酰胺( DMF )中然后轉移至透析袋倒入定量的萘普生膠束溶液并密封透透析袋內置蒸餾水中透析在2 h.5h8h和12 h析袋放入含50 mL釋藥介質(zhì)的錐形瓶?jì)柔屗幗橘|(zhì)分別替換新鮮蒸餾水24 h后將透析袋內膠束溶液分別為:①HCl溶液( pH=1.1 )②鄰苯二甲酸氫鉀離心除去未包埋藥物上清液經(jīng)0.45μm濾膜過(guò)緩沖溶液(pH=4.0);③磷酸鹽緩沖溶液(pH=.溶彩+1= 10)錐形瓶放在的濾4C保存膠束溶液,或冷凍干燥后得膠束干中國煤化1自制二圖( 94士4 )beat/min溫品28]。MHCNMHG度保.1_1兒。心時(shí)以詳并更換新鮮介質(zhì)用1.4 萘普生膠束的的表征膠束的形態(tài)和粒徑分析:在Philips CM10透射75-2C紫外分光光度計測定樣品在331nm處吸光電鏡SEM)上觀(guān)察膠束的微觀(guān)形態(tài)3]使用動(dòng)態(tài)光度按上述標準曲線(xiàn)方程計算釋藥量。散射( dyh荔熱據ght scatter ,DLS )粒子分析儀54中山大學(xué)學(xué)報(醫學(xué)科學(xué)版)第24卷2.3共 聚物載藥膠束的粒徑大小及其分布2結果M77和M79是使用同一種PEG-PBLG共聚物數均相對分子質(zhì)量為7.8x 103 )并在相同的制2.1 PEG- PBLG嵌段共聚物的數均相對分子質(zhì)量備條件下得到的共聚物膠束,所不同的是M77不在PEG-PBLG的聚合反應中,PBLG 聚合度和載藥(透析前共聚物的DMF溶液不加入萘普生其共聚物數均相對分子質(zhì)量M,都隨反應開(kāi)始時(shí)的單它操作同載藥膠束) ,M79則含萘普生13.7%(表體/引發(fā)劑質(zhì)量比摩爾數比)的變化而改變(表1)2)圖2為使用動(dòng)態(tài)光散射法所測定的這兩種共聚物膠束的粒徑及其分布圖。用作體外釋藥試驗表1單體/引發(fā) 劑質(zhì)量比、PBLG聚合度和共聚物數等研究的共聚物膠束的載藥量與粒徑數據列于表均相對分子質(zhì)量M,n2。載藥量主要由萘普生的投料量決定,PEG-Table 1 Anhydridd monomer ) initiator amount of substancePBLG的數均相對分子質(zhì)量也有影響,詳見(jiàn)圖3。ratid nλ/n; ) in moles .degree of polymerization ofM89的PEG-PBLG數均相對分子質(zhì)量最大，粒徑PBLQ DPpBLG; ) and number -average relative molec-也最大達245nm;M79數均相對分子質(zhì)量最小,ular mass of copolymer( M)粒徑最小，僅35.7 nm ;M30、M40的數均相對分子nμ/n1DPpLGMrm質(zhì)量中等粒徑也處中等在126~ 128 nm之間。12.5/110.2x 10325/13111.8X 103100-50/11715.2X 10375/15920.1X 103100/17822.1X 103重50150/123.6X 103DP : degree of polymerization5.050.0 500.0 .5.050.0 500.02.2共聚物載藥膠束的微觀(guān)形態(tài)d/ nm圖1透射電鏡照片清晰地表明了膠束的核-圖2使用DLS法測得共聚物膠束的粒徑及其分布殼型結構疏水性的PBLG不能被磷鎢酸染色,在( X軸為對數刻度)電鏡視野下呈亮白色的內核,親水性的PEG雖然Fig.2 Diameter and distribution of copolymer micelles mea-本身不被染色,但它吸附了水相中的部分磷鎢酸，sured by DLS method X axis is in logarithmic scale )Left : un- loaded micell of 33.2 nm in diameter ( M77 ); Right :在電鏡視野下呈灰色暈環(huán),而電鏡視野背景是磷鎢drug-loaded micelX 13.7% )of 35.7 nm in diameter( M79 )酸溶液相,干燥后不透電子束,呈現暗黑色背景。計算出膠束直徑約220 nm內核直徑約180 nm外表2共聚物/ 萘普生載藥膠束的粒徑和載藥量殼厚度約20 nm。Table2 Diameter and drug _loaded amount of naproxen/copolymer micellesDrug- loadedMicelles No.d/nmamount( % )M309.9x 10311.0128M4023.8126M777.8x 103033.213.735.7中國煤化工200nm16.6245FYHCNMHG圖1空載載藥膠束的透射電鏡照片2.4萘 普生的增溶性評價(jià)Fig.1 TEM photogragh of un-loaded copolymer micelles將載藥量對投藥量D作圖(圖3)投藥量增( copolymer ME 15.2x 103 ,micelles stained by 1 % phospho-atungstic acid'第1期潘仕榮等.萘普生/聚乙二醇聚谷氨酸芐酯共聚物納米膠束Men=7 800加時(shí)膠束中藥含量隨之增加當萘普生投藥量增- rMrn=9 900加到一定值時(shí)膠束中載藥量達到最大值,此值即-0-Mr.n=15 200膠束的最大增溶量。萘普生在共聚物膠束中增溶量的數據見(jiàn)表3 ,萘普生在膠束中的增溶量比在水中的溶解度大得多隨著(zhù)共聚物數均相對分子質(zhì)量的增大其膠束的增溶效果也越見(jiàn)增強;另一方面0t隨著(zhù)透釋介質(zhì)pH值的減小其增溶效果也現增強。2.5不同條件 下載藥膠束的體外釋藥速率20D/ %06(2.5.1在不同 pH值的釋藥介質(zhì)中釋藥圖4表圖3投藥量D對不同相對分子量共聚物膠束載藥量的影響明在不同pH介質(zhì)中,M40載藥膠束釋藥初期都(pH=6.3)會(huì )出現突釋相隨后釋藥速率逐漸減慢,進(jìn)入一個(gè)Fig.3 The effect of drug-feeded amount D on drug- loaded較長(cháng)的緩釋期。萘普生在pH= 1.1的介質(zhì)中釋藥amount of copolymer micalles with different relative速率最小在中性或堿性介質(zhì)中釋藥速率加快在molecular mass at pH= 6.3pH= 10.0的介質(zhì)中釋藥速率最大。表3萘普生在不同pH水中的溶解度及在不同數均相對分子質(zhì)量共聚物膠束中的增溶量Table 3 Solubility of naproxen in water at different pH and naproxen- solubilized amount in PEG PBLGmicelles with different relative molecular mass 1s( naproxen )Naproxen- solubilized amount / ( mg/L)pH/( mg/L)2)M,n=7.8X 103Mrn=9.9X 103M,n= 15.2x 1036.381.41852713451.111.12553434141)d copolymer micelles )= 1 g/L ;2)The s( naproxen )V( me/L ) was solubility of naproxen in water at 25 C100.0 r一+■pH1.1.。pH4.0.nm和245nm兩者間相差由1~7倍。圖5表明一pH7. 4●. pH10. 0了載藥膠束的粒徑大小對釋藥速率的影響96 h后80.0.-.■M79膠束的藥物累積釋放量為M89膠束的1.260.040.0"3討論20. 03.1決定 PEG-PBLG嵌段共聚物的數均相對分子質(zhì)量的因素0.0PEG-PBLG嵌段共聚物的數均相對分子質(zhì)量40508(t/h是決定膠束能否生成、粒徑大小的重要因素。本研究采用a-甲氧基、w氨基聚乙二醇作為聚合反應.圖4M40膠束(粒徑126nm)在不同pH介質(zhì)的釋藥曲線(xiàn)的引發(fā)劑由干PFG的數均相對分子質(zhì)量已選用Fig.4 In vitro drug-released curves of M40 micell in50dYH中國煤化工分子質(zhì)量的大小取決different pH media于1CNMHGG嵌段的長(cháng)短又受單體/引發(fā)劑的物質(zhì)的量比( n/nγ )影響。由表1可2.5.2不 同粒徑載藥膠束的釋藥M79、 M30、以看到,當nλ/n1增大時(shí),PBLG嵌段的聚合度M89的載藥量分別為11.0%、 13.7%和16.6%大DPpBuc隨之增大。n/n1 比值越大即引發(fā)劑的相小在同一數童敬范圍,但粒徑分別為35.7 nm 12856中山大學(xué)學(xué)報(醫學(xué)科學(xué)版)第24卷70nm時(shí)微球在體內就會(huì )不易被識別9。本文制備的膠束外層PEG的厚度已達20 nm ,所以能減少遲60血液中巨噬細胞對納米微球的攝取延長(cháng)膠束在血50 t2液中的半衰期有利于制成長(cháng)循環(huán)的納米膠束。3.3影 響共聚物載藥膠束的粒徑大小的因素PEG-PBLG共聚物載藥膠束溶液為無(wú)色半透& 30一一35.7 nm(M79)明溶液,用DLS法測得的各種膠束的粒徑在35~20口128 nm(M30)245nm范圍,分布較窄。共聚物中的疏水嵌段越長(cháng)其形成膠束的粒徑就越大(表2)制備溶劑對莫104-r245nm(M89)膠束的粒徑也有很大影響采用數均相對分子質(zhì)量為7.8X 103的共聚物制備膠束,在其它制備條件247:9相同時(shí),由純DMF制備的膠束粒徑較大(106t/h圖5不同粒徑膠束的釋藥曲線(xiàn)(介質(zhì)為pH=7.4nm )而由純四氫呋喃( THF )制備的膠束粒徑很小磷酸鹽緩沖溶液)(78nm),但選用DMF/THF混合比例為55/45時(shí)Fig.5 In vitro drug- released curves of micelles with differ-制備的膠束粒徑最大( 215 nm)共聚物/ 溶劑比越ent diameter in pH= 7.4 phosphate buffer solution大制得的膠束粒徑就越大。圖2表明，載藥膠束M79的粒徑為35.7 nm空載膠束M77的粒徑為對用量越少生成的活性中心越少,鏈增長(cháng)反應得33.2 nm可見(jiàn)對同一共聚物和相同制備條件的膠到PBLG嵌段較長(cháng)的共聚物6。束來(lái)說(shuō)載藥膠束的粒徑比空載膠束的粒徑略有增.3.2共聚物載藥膠束的制備加粒度分布范圍也稍為變寬以上結果與Sung等PEG-PBLG的親水嵌段和疏水嵌段大小必須的報道是相近的8]。有適當比例,才能生成熱力學(xué)穩定的核殼型結構,3.4共聚物膠束對萘普生的增溶性文獻報道制備膠束的兩親共聚物數均相對分子質(zhì)數均相對分子質(zhì)量為7.8x 103、9.9x 103與量都在12x 103~18X 103之間78。若親水嵌段15.2X 103的PEG-PBLG中疏水嵌段數均相對分太大,疏水嵌段太小,PEG-PBLG就會(huì )變成水溶性子質(zhì)量分別是2.8x 103、4.9x103和10.2x 103分子膠束難以生成若疏水嵌段太大親水嵌段太其膠束對萘普生增溶量分別是萘普生在pH=6.3小則形成芯核直徑很大外殼很薄的結構體系極水中溶解度的2.2.3.3和4.2倍(表3),可見(jiàn)不穩定會(huì )導致沉淀產(chǎn)生7。我們的實(shí)驗表明,當PEG-PBLG膠束增溶能力隨疏水嵌段的長(cháng)度增加PEG嵌段的數均相對分子質(zhì)量固定為5x 103時(shí),而增強。因為隨著(zhù)疏水嵌段鏈長(cháng)增加膠束的內核PEG-PBLG數均相對分子質(zhì)量大到19X10時(shí)膠直徑也增加,包埋藥物的容量也隨之增加。在pH束開(kāi)始伴有少量沉淀, 隨著(zhù)數均相對分子質(zhì)量繼=1.1的酸性溶液中,以上3種膠束對萘普生增溶續增大沉淀物就越來(lái)越多所以制備膠束的PEG-量分別是萘普生原藥在水中溶解度的23、41和PBLG的數均相對分子質(zhì)量應該在20x103以下為37.5倍,PEGPBLG膠束增溶能力隨透析介質(zhì)的宜。pH值降低而增強。由于萘普生分子內含有一個(gè)羧PEG-PBLG是兩親型嵌段共聚物,而萘普生在基pH值降低不利于羧基的電離,引起在酸性水中水中幾乎不溶。透析法是共聚物和藥物分子溶解、的溶解度下降但卻更有利于以未離解分子的形式分散和締合水分子和溶劑分子在透析膜兩邊的相被PBLG疏水鏈所包埋形成藥含量更大的內核?；B透共聚物分子自發(fā)兩親平衡的過(guò)程,最后藥3.5_影響載藥膠束的體外釋藥速率的因素物被包埋在核內生成核-殼型結構的載藥納米膠3MH中國煤化工釋藥速率越大在束這是載藥膠束具有熱力學(xué)穩定性的原因。有學(xué)CNMH&內的萘普生呈未解離者認為藥物/兩親共聚物膠束是- -種自組裝系統狀態(tài)釋放速率較慢在堿性條件下萘普生的羧基( self- assembling system58。巨噬細胞對納米微球會(huì )發(fā)生電離形成離子態(tài)在水中溶解度增大,內核攝取量的減少與其表面PEG層的厚度有關(guān)。文獻表皮的萘普生首先離子化釋放芯核內部的藥物也報道,直徑存敵據的微球表面PEG層的厚度為10不斷離子化向芯核表面遷移釋放速率要比酸性和第1期潘仕榮等.萘普生/聚乙二醇聚谷氨酸芐酯共聚物納米膠束中性條件加快。堿性越強離子化速度越快釋放lease from core-shell type nanoparticles in vitro[ J]. J越快。Control Rel , 199851( 2-3 ):169.3.5.2 載藥膠束粒徑越大,釋藥速率越小 根據[3] YuBG , Okano T , Kataoka K ,et al. Polymeric mi-Hguchi方程10] :dm/dt=0.5 S[2DC,C/ t]/2 ,celles for drug delivery : solubilization and haemolytic ac-tivity of amphotericinHJ] J Control Rel ,1998 ,53( 1-在其他變量相同的情況下釋藥速率與膠束的表面3): 131.積成正比即粒徑越大者釋藥越慢。我們實(shí)驗結果[ 4]Desai N P , HubbellJ A. Solution technique to incopo-與Hguchi方程是一致的 ,M79粒徑最小釋藥速率rate polyethylene oxide and other water-soluble polymers最快;M30粒徑中等，釋藥速率適中、M89粒徑最into surfaces of polymeric biomaterials[ J ] Biomaterials ，大釋藥速率最慢。1991 ,12X2):144.以?xún)捎H共聚物PEG-PBLG為載體,用透析法[5]Johann L , Jan C , Joke V ,et al . Facile methods for the可制備PEG- PBLG/萘普生載藥膠束。膠束粒徑在introduction of an a- -amino end-group[ J ]. Makromol35~ 245 nm范圍膠束呈核~核殼型結構,PEG-Chem Rapid Commun,1991 12 1-2 ):159.PBLG膠束可大大增溶藥物特別是疏水性藥物如[6]潘仕榮黃寧芳周群等.聚a~谷氨酸r-芐酯合成的改進(jìn)J].生物醫學(xué)工程學(xué)雜志,1990 X4 )321.萘普生。PEG-PBLG/萘普生膠束具有緩釋作用,[7]Jiahorng L, Takao A , Kazunori K ,et al. Visualization釋放介質(zhì)的pH值對萘普生的釋放有較大影響釋.of PEO-PBLA Pyrene polymeric micelles by atomic force放速率隨pH值增加而明顯加快粒徑對藥物的釋microscop[J] Pharm Res , 1998 ,15 11):1721.放也有-定影響。[ 8 ]Sung B L, Teruo O , Kazunori K. Preparation and char-(在使用動(dòng)態(tài)光散射法測定膠束粒徑的工作中得到暨acterization of the micell forming polymeric drug in-南大學(xué)生物醫學(xué)工程所王耀熊教授和屠美副教授的無(wú)私幫domethacin- incorporated poly( ethelene oxide )-poly( β-助特此致謝)benzyl L aspartiate ) block copolymer micelles[ J ]. J參考文獻:Pharm Sci ,1996 ,85 1 ):85.[9]趙錦花.新型藥物載體一-PEG修飾聚氰基丙烯酸納[1 ] Kataoka K , Matsumoto T , Yokoyama M ,et al. Dox-米微球的制備及其性能研究[ D]天津大學(xué),2001.orubicin- loaded poly( ethylene glycol )paly( β-benzy)-L-58.aspartate ) copolymer micelles : their pharmaceutical[ 10]奚念朱.控速釋藥體系和緩釋制劑J].藥學(xué)學(xué)報,characteristics and biological significanceC J ]. J Control1984 ,1X9)715.Rel ,2000 64( 1-3):143.[2]Jong Y 1 ,CheonJ B , Kim S H ,et al. Clonazepam re-(編輯劉清海)(上接第51頁(yè)from page51)[3] Piao Y S, Peltoketo H, Oikarinen J. 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