殼聚糖與聚乙二醇交聯(lián)水凝膠研究

●84●報2010年11月殼聚糖與聚乙二醇交聯(lián)水凝膠研究趙朋',鄭化',鄧超”,齊文靜',田倩',陳敬華2*(1.武漢理工大學(xué)化學(xué)工程學(xué)院,武漢430070;2.江南大學(xué)醫藥學(xué)院,無(wú)錫214122)摘要:研兗對殼聚糖(CS)進(jìn)行化學(xué)修飾得到了不同丙烯?；〈?1.03%,3.55%和5. 21%)的丙烯?；u丙基殼聚糖(AHCS);通過(guò)自由基引發(fā)反應,AHCS與聚乙二醇二丙烯酸酯(PEGDA)交聯(lián)得到殼聚糖(CS)與豪乙二醇(PEG)為主體的交聯(lián)水凝膠。通過(guò)SEM觀(guān)察其為通透性良好的多孔性支架材料。水凝膠的溶膠含量和溶脹度隨丙烯?；〈鹊脑黾佣档?水凝膠中殼聚糖的降解速率也隨丙烯?；〈鹊纳叨档?。對于同一取代度的交聯(lián)水凝膠,其在酸性和堿性條件下的溶脹度大于中性環(huán)境。細胞試驗表明.殼聚糖與豪乙二醇交聯(lián)水凝膠具有良好的生物相容性.關(guān)鍵詞:殼聚糖;聚乙二醇;水凝膠組織損傷或功能缺失是--類(lèi)嚴重影響人類(lèi)健康的疾病,并且醫療費用巨大。目前,治療這類(lèi)疾病的臨床方法主要包括器官移植、修復手術(shù)和醫療器械的使用;但是,這些方法存在諸多問(wèn)題，例如適宜移植器官的缺乏,長(cháng)期使用免疫抑制藥物造成的副作用,以及移植器官功能的漸行性退化等。組織工程(Tissue Engineering)成為解決這些問(wèn)題的有效途徑。組織工程是指運用生命科學(xué)和工程學(xué)的原理,體外或者體內構建仿生組織,從而有效替代功能缺失或者受損組織的學(xué)科[1~8]。機體組織由兩部分組成:細胞及其外環(huán)境,后者包括細胞分化和增殖的天然支架一-細胞外基 質(zhì)(Extracellular matrix, ECM)和各種生物信號分子。組織工程的原理是設計和制備與ECM具有類(lèi)似性質(zhì)或功能的生物材料,為細胞的生長(cháng)提供適宜的環(huán)境,促進(jìn)細胞的分化、增殖及細胞外基質(zhì)的新生進(jìn)而再生組織01。適宜的生物材料不僅能夠有效地替代ECM,還能夠提供生物信號分子的傳遞系統,從而增強其生物活性,因此研究和開(kāi)發(fā)具有優(yōu)異理化及生物相容性能的生物材料是組織工程的重要方向0。隨著(zhù)生命科學(xué)和材料學(xué)的發(fā)展,各種生物材料大量應用于組織工程領(lǐng)域,包括電紡絲纖維'0)、納米復合物門(mén)、水凝膠材料[8等。其中水凝膠是一類(lèi)高含水量的三維網(wǎng)絡(luò )結構的聚合物,通常由物理/化學(xué)交聯(lián)作用制備。水凝膠以其良好的生物相容性,生物可降解性能，模擬組織的力學(xué)性能和ECM的特殊結構，在生物醫藥組織工程等領(lǐng)域得到了廣泛應用0。用于制備水凝膠的高分子分為三類(lèi):(1)天然高分子，例如,膠原蛋白,海藻酸鈉，透明質(zhì)酸和殼聚糖等;(2)合成高分子,例如聚乳酸,聚乙烯醇,聚羥基乙酸等;(3)去細胞組織基質(zhì)等[0]。聚乙二醇(PEG)是一種具有良好生物相容性的水溶性合成高分子,由含PEG嵌段的聚合物行成的水凝膠,其理化性能得到較大的提高。例如,Bryant等1[1]報道,PEG水凝膠的平衡含水量和壓縮模量能夠影響軟骨細胞對ECM糖胺聚糖和II型膠原蛋白的分泌。殼聚糖是一種天然多糖高分子,存在于昆蟲(chóng),類(lèi)生物的外殼中,其化學(xué)性質(zhì)類(lèi)似于植物纖維,由于其與ECM中的糖胺聚糖結構類(lèi)似,生物相容性良好可以被人體自身分泌的溶菌酶降解而廣泛應用于組織工程領(lǐng)域[12]. Ma等["]制備了以殼聚糖,PEG和二甲基丙烯酰胺為基質(zhì)的可注射型水凝膠,細胞試驗表明這種水凝膠具有良好的生物相容性。殼聚糖為水不溶性高分子,本研究首先通過(guò)環(huán)氧丙烷取代反應制備了殼聚糖的水溶性衍生物羥丙基基金項目:國家自然科學(xué)基金資助項目(50873080/E0310);江南大中國煤化工斷團隊計劃項目(JUSRP30905);作者簡(jiǎn)介:趙朋(1984-).男,碩士研究生.研究方向為生物材料,TelMYHCNMHGcom;"通訊聯(lián)系人,Email: jhchenwhut@ 126. com.第11期離分子通報85●殼聚糖;在此基礎上通過(guò)酰胺化反應制備了不同丙烯?；〈鹊谋；u丙基殼聚糖。丙烯?；u丙基殼聚糖與聚乙二醇二丙烯酸酯發(fā)生自由基引發(fā)聚合反應,得到以殼聚糖與聚乙二醇為主體的交聯(lián)水凝膠;研究了丙烯?；u丙基殼聚糖的丙烯?；〈葘λz溶膠含量、溶脹性能、體外降解等性能的影響;并通過(guò)細胞試驗考察了這一交聯(lián)水凝膠的生物相容性。1實(shí)驗1.1 藥品殼聚糖(Chitosan,CS) ,分子量150kDa,脫乙酰度90%,化學(xué)純,國藥集團化學(xué)試劑有限公司;(丙烯酰氧)丙酸(2-CarboxyethyI acrylate) 和聚乙二醇二丙烯酸酯( Polyethylene glycol diacrylate,PEGDA),化學(xué)純,Sigma公司;N=羥基丁二酰亞胺(NHS) ,化學(xué)純,國藥集團化學(xué)試劑有限公司;1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺(EDC) ,化學(xué)純,邁瑞爾化學(xué)技術(shù)有限公司;N, N, N', N'-四甲基乙二胺(TEMED)和過(guò)硫酸銨(APS),化學(xué)純,國藥集團化學(xué)試劑有限公司。1.2丙 烯?；u丙基殼聚糖(Acrylated hydroxypropyI chitosan, AHCS)的制備AHCS的合成路線(xiàn)如圖1所示:首先制備水溶性羥丙基殼聚糖( Hydroxypropyl chitosan, HCS) ;在此基礎上,通過(guò)β(丙烯酰氧)丙酸與HCS的自由氨基的酰胺化反應制備得到了丙烯?；u丙基殼聚糖(AHCS);通過(guò)調控β(丙烯酰氧)丙酸與HCS的投料比率,得到了不同丙烯?；〈鹊腁HCS.HCS的制備:1g殼聚糖加入到20mL異丙醇溶液中,機械攪拌2h.加入lmL的30%的氫氧化鈉水溶液并繼續攪拌5h,- 20C冷凍過(guò)夜。 解凍,加入10mL環(huán)氧丙烷和1mL的10%四甲基氫氧化銨溶液作為催化劑,緩慢升溫至60C ,持續反應8h。反應結束后,過(guò)濾得到羥丙基殼聚糖。用去離子水溶解,透析三天除去雜質(zhì),冷凍干燥得到羥丙基殼聚糖。AHCS的制備:1g羥丙基殼聚糖溶于20mL水,加入不同摩爾量的F(丙烯酰氧)丙酸,其與羥丙基殼聚糖自由氨基摩爾比為1:10,1*15和1:20.加人與β(丙烯酰氧)丙酸等靡爾量的EDC和NHS作為反應的催化劑。30C,pH=4.0 的條件下攪拌,反應20h,再透析三天,冷凍干燥得到三種不同丙烯?；?Acryloyl,Ac)取代度的AHCS.HOHGROH2Co-LorHO1ROJNH2」no-EDC.1S .IHnO=CH3R= fcH.CH0H圖1 AHCS的合成路線(xiàn)Figure 1 Synthesis route of AHCS1.3 AHCS 的紅外光譜表征及取代度的測定把1mg的CS和AHCS樣品分別與250mg的溴化鉀混合,研細壓片后,用紅外光譜儀NICOLETNEXUS 470( Thermo Fisher Scientific)測試其紅外吸收波諸_400MHz NMR中國煤化工'Spectrometer, Bruker)對HCS與AHCS進(jìn)行了H NMR波1.4CS與PEG交聯(lián)水凝膠的制備TYHCNMHG用超純水溶解PEGDA和不同取代度的AHCS,AHCS與PEGDA的重量比為11,總含量為15%●86.高分子報2010年11月(w/w)。加入引發(fā)劑APS和TEMED,最終濃度為20mM?；旌暇鶆蚝?40°C反應24h。交聯(lián)完成后,用超純水浸泡水凝膠24h,每3h換水一次,直至除盡未交聯(lián)的溶膠。凍干得到CS/PEG交聯(lián)水凝膠支架。.5 溶膠含量測定未發(fā)生交聯(lián)的高分子以溶膠形式存在于水凝膠網(wǎng)絡(luò )中,對除去溶膠前后的水凝膠凍干物進(jìn)行稱(chēng)重，溶膠含量為沒(méi)有形成凝膠的高分子與高分子總量的比值。相同條件下制備了純PEG水凝膠作為對照。溶膠百分含量的計算公式為:SC=MuMEmX100%,式中,M。為除去溶膠前水凝膠質(zhì)量,Mn為除去Mm溶膠后水凝膠的質(zhì)量。1.6水凝膠支架的微觀(guān)形態(tài)觀(guān)察以荷蘭FEI公司的Quanta200掃描電子顯微鏡(SEM)觀(guān)察水凝膠支架的形態(tài),把水凝膠支架的縱切面噴金,在20kV電壓下觀(guān)察其內部結構。1.7水凝膠的溶脹度測定取質(zhì)量為M的凍干水凝膠支架,置于特定pH值的緩沖液中,37C溶脹24h后,吸去水凝膠表面的水,稱(chēng)取溶脹后質(zhì)量為M2 ,每個(gè)樣品測試三次。水凝膠溶脹度(Swelling Ratio,SR)的計算公式為: SR =M:二Mx100%.本研究分別測定了水凝膠支架在pH值為4.00,7.40和9.18的緩沖液中的溶脹度。M1.8水凝膠支架的體外降解性能測試取質(zhì)量為M的水凝膠支架,置于溶菌酶濃度1mg/mL,pH=7.4的磷酸鹽緩沖液中,37C下進(jìn)行降解。在不同的時(shí)間間隔內,將水凝膠支架從溶液中取出,蒸餾水沖洗后凍干,稱(chēng)取降解后的質(zhì)量為M'.水凝膠支架的降解度(Degradation Ratio,DR)的計算公式為: DR = M-M x 100%。1.9MTT(噻唑蘭)法測試水凝膠支架的生物相容性本研究以鼠成纖維細胞L929對CS/PEG水凝膠支架進(jìn)行了生物相容性測試。細胞株L929由中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院細胞資源中心提供。首先,將細胞株L929接種于細胞培養瓶中,待細胞長(cháng)滿(mǎn)培養瓶面積約70%時(shí),用0.2%的胰酶溶液消化得到游離細胞L929,并用培養基稀釋至5X10*細胞/mL備用。在24孔板中加人300μL的交聯(lián)溶液,按1.4的方法制備得到CS/PEG水凝膠支架,通過(guò)紫外線(xiàn)照射和乙醇浸泡除菌,以PBS溶液充分漂洗除去乙醇。把細胞L929接種在支架表面,接種密度為1. 25X10*細胞/cm2。細胞培養基為含10%滅活胎牛血清,100單位/mL青霉素G和100單位/mL鏈霉素的Dulbecco改良的Eagle培養基(DMEM) ,培養條件為37C,5% COr培養箱中培養。分別在培養2、4、8天后,用MTT法對細胞的生長(cháng)情況進(jìn)行測定,MTT的最終濃度為1mg/mL,37C反應4h,用2mL二甲基亞砜溶解細胞對噻唑蘭的代謝產(chǎn)物甲瓚,在570nm測定其吸光度。2結果與討論2.1 紅外吸收波譜和取代度的測定圖2所示為AHCS與CS的紅外吸收波譜。其中,CS在3419cm-1處吸收峰為- -OH和一NH對稱(chēng)振動(dòng)峰;2934和2892cm1處吸收峰為--CH伸縮振動(dòng)峰;1627cm1和1519cm~'處吸收峰分別為C=O伸縮振動(dòng)及- CN伸縮振動(dòng)峰;1416cm~ 1處峰為- -OH和一CH的環(huán)變形振動(dòng)吸收峰;1154cm-'處峰為糖環(huán)上伯醇和仲醇吸收峰;1088cm-'處峰為一C-0伸縮振動(dòng)吸收峰;897cm1處峰為糖環(huán)脂肪醛吸收峰。與CS的紅外圖譜相比,AHCS增加了新的吸收峰,其中,2970cm~'處吸收峰為--CH3伸縮振動(dòng)峰(羥丙基取代);1710cm-'處峰為-C-CH2彎曲振動(dòng)吸收峰(丙烯?；?;1456cm~-'處峰為羥丙基上亞甲基-CH2一彎曲振動(dòng)吸收峰。另外,AHCS新的C-0基團中國煤化工?；鵆=0吸收峰(1627cm~')重合;- -CN的吸收峰由1519cm~'轉移到I說(shuō)明CS 的自由CNMH G氨基發(fā)生酰胺化反應。紅外圖譜表明,AHCS相比CS增加:為了計算AHCS的羥丙基取代度和丙烯?；〈?對HCS和AHCS進(jìn)行了H'NMR表征,其圖第11期高分子通報87●譜如圖3所示;化學(xué)位移81.5~2.0區間內的吸收峰歸屬為羥丙基的- -CH2-氫原子,峰面積與殼聚糖異頭碳氫(8為5. 3)的峰面積比值為2. 04,AHCS的羥丙基取代度為2.04/2=1.02(平均每個(gè)寡糖單元有1. 02個(gè)羥丙基取代基);同樣方法計算得到摩爾比為1+10.1:15和1:20條件下,丙烯?；〈?C=CH,氫原子化學(xué)位移δ為6.5~7.0)依次為1. 03%.3. 55%和5.21%.所得到的水凝膠依次命名為.AHCS1.03-PEG,AHCS3. 55-PEG和AHCS5.21-PEG.1710HCS1814643500 300025002000 1500 1000故敷/cm~1圖2 AHCS 與CS的紅外吸收波譜Figure2 The FTIR sectrum of AHCS and CSAHCS圖3 AHCS與 HCS的H'核磁共振譜Figure 3 The H! NMR' pectrum of AHCS and HCS2.2水凝膠的溶膠含量不同Ac取代度的AHCS與PEG共交聯(lián)水凝膠的溶膠含量如圖4所示。其中,隨著(zhù)Ac取代度的增加,溶膠含量減少,從18.95%堿少至15.42%;交聯(lián)水凝膠的溶膠含量與純PEG水凝膠(10.88%)相比增加了約4%~8%。溶膠含量是在交聯(lián)反應完成后,未形成中國煤化工量的比重。在A(yíng)HCS PEG的交聯(lián)體系中,AHCS的可交聯(lián)雙鍵密度為4.6CNMHG可交聯(lián)雙鍵巒度為125mM,這表明高分子交聯(lián)前體的雙鍵密度越高,凝膠的俗膠古重越低。高分子通2010年11月201816! 12-店10AICSI.03PEG AJCS5SP.EC AISS.2I.PEGP圖4不同丙烯酰 基取代度的AHCS PEG水凝膠的溶膠含量Figure4 Sol content of AHCS PEG hydrogels with diferent Ac substitution2.3水凝膠支架的微觀(guān)結構理想的組織工程支架材料不僅需要為細胞的生長(cháng)分化提供三維空間環(huán)境,還需要具有通透性,促進(jìn)物質(zhì)在支架與外界環(huán)境之間交換,為細胞提供營(yíng)養及排泄代謝廢物。圖5所示為AHCS3.55-PEG交聯(lián)水凝膠的SEM微觀(guān)形態(tài)。從圖中可以看出,AHCS3.55-PEG水凝膠是- .種多孔性的支架材料,孔徑集中分布在50~200μm,孔與孔之間的通透性良好。CS與PEG交聯(lián)水凝膠良好的多孔及通透性能夠為細胞提供穩定的生長(cháng)環(huán)境,有利于營(yíng)養物質(zhì).信號分子及代謝物質(zhì)的傳遞。圖5 AHCS3. 55-PEG水凝膠的微觀(guān)形態(tài)Figure 5 Microscopic morphology of AHCS3. 55-PEG hydrogel2.4水凝 膠支架的溶脹度Cs與PEG共交聯(lián)水凝膠的溶脹性能如圖6所示。在相同pH值的溶脹條件下,凝膠的溶脹度隨AHCS的取代度升高而降低,例如在pH=4. 00的條件下, AHCS1.03-PEG(8.63) > AHCS3. 55-PEG(6. 56) > AHCS5. 21-PEG(4.38)。而同一種凝膠在不同的pH值條件下溶脹度不同,其中在酸性pH=4.00和堿性pH=9.18環(huán)境中的溶脹度大于接近中性的pH=7.40的環(huán)境，AHCS3.55-PEG的溶脹度在pH=4.00和9.18的溶脹分別為6. 56和6.29,而在pH=7.40環(huán)境下的溶脹度為4.52. CS與PEG共交聯(lián)水凝膠的溶脹性能主要由AHCS的取代度以及兩種高分子的化學(xué)組成所決定的。AHCS的取代度升高增加了水凝膠的交聯(lián)密度和交聯(lián)度,這一點(diǎn)也與水凝膠的溶膠含量的變化規律相符合;較高的交聯(lián)度及交聯(lián)密度增加了水凝膠高分子交聯(lián)網(wǎng)絡(luò )的強度以及水中國煤化工=降低了水凝膠的溶脹度。與pH=7.40相比,在pH=4.00的溶脹環(huán)境中，發(fā)生質(zhì)子化生成帶正電的銨根離子(一NHt),使得殼聚糖的親水性和分子YHCNMHG=9.18的環(huán)境中,PEG鏈段之間的氫鍵作用降低。CS與PEG共交聯(lián)水凝膠的這兩種性質(zhì)使得其高分子網(wǎng)絡(luò )在pH=第11期高分子通報894.00和9.18的環(huán)境中通透性和親水性增加,而在pH=7.4的環(huán)境中,這兩種作用都不明顯,所以此時(shí)的溶脹度最低。10= JAHCSI .03-PEGJAHCS3.55-PEGAHCSS.21-PEG jpH4.00pH 7.40pH9.18圖6不同丙烯?；〈?的AHCS PEG水凝膠的溶脹度Figure 6 Swelling ratio of AHCS PEG hydrogel with different Ac substitution2.5水凝膠支 架的體外降解曲線(xiàn)殼聚糖能夠被存在于體內各組織中的溶菌酶降解[4],并且降解速率與殼聚糖的脫乙?；潭群蜌ぞ厶堑难苌锼苄杂嘘P(guān)。本文主要研究了CS與PEG交聯(lián)水凝膠的體外降解行為以及AHCS的取代度對水凝膠降解行為的影響,結果如圖7所示. CS與PEG交聯(lián)水凝膠的起始降解速率很快,第五天降解速率逐漸降低,而到第10天,降解基本完全。以AHCS3.55-PEG為例,第3.5.10天的降解后剩余質(zhì)量百分含量依次為78.68%.61.57%和48.78%。隨著(zhù)AHCS取代度的升高,AHCS與PEG共交聯(lián)水凝膠的降解速率依次減慢。如AHCS1.03-PEG、AHCS3. 55-PEG和AHCS5. 21-PEG在第5天時(shí)的剩余質(zhì)量百分含量依次為53. 87% .61. 57%和70. 34%. AHCS與PEG共交聯(lián)水凝膠的降解速率主要是由高分子交聯(lián)網(wǎng)絡(luò )的結構所決定的,致密的網(wǎng)絡(luò )結構能夠延長(cháng)殼聚糖的降解時(shí)間,這種作用隨著(zhù)AHCS.的取代度增加而增強?！? AHCS1.03-PEG;●- AHCS.55-PEG實(shí)9(L工AHCSS.21-PEG已80so-400246810121416182022降解時(shí)間/天圖7 AHCS-PEG 水凝膠的體外降解曲線(xiàn)Figure 7 In vitro degradaiton of AHCS-PEG hydrogel2.6水凝膠支架的生物相容性本研究以MTT法測試了L929細胞在A(yíng)HCS1. 03-PEG中國煤化工以空白孔板(表面經(jīng)處理的聚苯乙烯)作為對照。如圖8所示,細胞對MTTYHCNMHG隨培養天數的增加而增高,說(shuō)明L929細胞能夠在A(yíng)HCS1.03-PEG水凝膠支架上生長(cháng);在第2.4.8天,AHCS1.03-.●90.高分子通指2010年11月PEG水凝膠支架組的吸光度都比空白對照組高,說(shuō)明與空白對照組相比,AHCS1.03-PEG水凝膠支架更有利于L929細胞的增殖。以上結果表明,AHCS1. 03-PEG水凝膠支架具有良好的細胞相容性。AHCS1.03-PEG0.87C對照0.7-0.墜0.30.2-0.12培養時(shí)間/天圖8 AHCS1. 03-PEG水凝膠的細胞相容性測試(MTT法)Figure 8 Cytocompatibility evaluation of AHCS1. 03-PEG bhydroge(MTT assay)3結論(1)通過(guò)對殼聚糖進(jìn)行化學(xué)修飾得到了水溶性的AHCS,丙烯?；〈葹?. 03%,3. 55%和5.21%;在引發(fā)劑APS和TEMED濃度為20mM,AHCS與PEGDA的重量比為1:1,總含量為15%(w/w)的條件下交聯(lián)24h得到CS與PEG交聯(lián)水凝膠;(2)SEM觀(guān)察CS與PEG交聯(lián)水凝膠為通透性良好的多孔支架材料;水凝膠的溶膠含量和溶脹度隨丙烯?；〈鹊脑龈叨档?在酸性或堿性環(huán)境的溶脹度大于中性環(huán)境;CS與PEG交聯(lián)水凝膠的降解速率隨時(shí)間逐漸降低,到第10天降解完全,并且降解速率隨丙烯?；〈冉档投黾?(3)通過(guò)細胞試驗證明了AHCS1.03-PEG是--種生物相容性良好的水凝膠支架材料。參考文獻:[1]劉盛輝,郎美東. 高分子通報20056).113~117.1.[2] Tabata Y.J R Soe Interface,20090 ,6(Suppl 3) ,S311~S324.[3] Langer R.Vacanti J P. Science,1993.260<5110) :920~926.[4]王身國. 中國康復理論與實(shí)賤，2002.8(5):267 ~269.[5] Kim B s, Mooney D J. Trends Biotechnol, 1998,16(5) :224~230.[6] Zhang X.Reagan M R,Kaplan D L. Advanced Drug Delivery Reviews, 2009.61(12) :988~ 1006.[7] Kim H W,Knowles J C.Kim H E.J Biomed Mater Res Part B: Appl Biomater,2005.74B(2):686~698.[8] 蔣瑛.陳滑,陳明,等.高分子通報，2007,(10):26~33.[9]楊連利,柴國正. 材料導報，2007.21(2);112~115.[10] Drury J L.Mooney D J. Biomater, 2003,24(24) :4337~ 4351.[11] Bryant s J,Anseth K s. J Biomed Mater Res,2002,59(1) :63~72.[12] Di Martino A.ittinger M,Risbud M v. Biomater. 2005.26(30) :5983~5990.[13] Ma G. Yang D,Li Q, Wang K.Chen B,Kennedy J F.Nie J. Carbohydr Polym,2010.79(3) :620~627.[14] Hori R Y,Mockros L F. J Biomech, 1976,9(4) :259~268.中國煤化工YHCNMHG第11期離分子通指●91●Study on a Chitosan and Polyethylene Glycol Crosslinked HydrogelZHAO Peng' ,ZHENG Hua' ,DENG Chao' ,Qi Wen-jing' ,TIAN Qian' ,CHEN Jing-hua*(1. College of Chemical Engineering , Wuhan Univ of Technology ,Wuhan 430070,China;2. College of Medicine and Pharmaceutics ,J iangnan Univ ,Wuti 214122 ,China)Abstract:In this study, acrylated hydroxypropyl chitosan ( AHCS) with different substitutiondegree (SD) of acryloyl, ie, 1. 03%，3. 55% and 5. 21%, was prepared by chemical modification ofchitosan (CS). Through free radical initiation reaction， AHCS and polyethylene glycol diacrylate(PEGDA) were crosslinked to form CS-PEG hydrogel. SEM indicated it was a porous scaffold withhigh connection rate. Our results suggested that the sol content (SC) and swelling ratio (SR) of thehydrogels decreased with increase of SD, and SR was higher in acid or alkaline conditions than inneutral condition. While the degradation rate (DR) of chitosan in the hydrogels also decreased withincrease of SD. Cell experiment indicated that chitosan and polyethylene glycol crosslinked hydrogel hadgood biocompatibility.Key words: Chitosan; Polyethylene glycol; Hydrogel中國煤化工MYHCNMHG