中國醫藥工業(yè)雜志 Chinese Journal of Pharmaceuticals2009,40(5)331聚乙ニ醇單甲醚-琥珀?；腚装彼岬暮铣舌嚰倚?蔡正艷,陶濤業(yè)研究(上海醫藥工業(yè)研究院,上海200437)摘要:聚乙二醇單甲與琥珀酸酐開(kāi)環(huán)酯化,N-羥基琥珀酰亞胺活化羧酸后與胱氨酸反應得二酰胺化合物,用二硫蘇糖醇斷二硫鍵后制得可用于制備長(cháng)循環(huán)脂質(zhì)體的聚乙二醇單甲醚琥珀?；腚装彼?并經(jīng)基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜確認其分子量,總收率23%關(guān)鍵詞:聚乙二醇單甲醚琥珀?；腚装彼?聚乙二醇單甲醚;長(cháng)循環(huán)脂質(zhì)體;基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜合成中圖分類(lèi)號:0626文獻標志碼:A文章編號:101-82520905-031-03 Synthesis of mPEG-Succinylcysteine DENG Jia-xin, CAI Zheng-yan, TAO Tao* (Shanghai Institute of Pharmaceutical Industry, Shanghai 200040) ABSTRACT: mPEG-Succinylcysteine, a material for preparation of long-circulation liposomes, was synthesized from mPEG and succinic anhydride by ring-opening esterification to get mPEG-succinate, which after activation with N-hydroxysuccinimide was amidated with cystine. The disulfide was reductively cleaved by dithiothreitol with an overall yield of 23%. Its molecular mass was determined by MALDI-TOF MS. Key Words: mPEG-succinylcysteine; mPEG; long-circulation liposome; MALDI-TOF MS; synthesis聚乙二醇單甲醚-琥珀?；腚装彼?mPEG-水劑作用下與N-羥基琥珀酰亞胺反應后,再與胱 succinylcysteine,1)是一種可用于制備長(cháng)循環(huán)脂質(zhì)氨酸反應生成二(聚乙二醇單甲醚-琥珀?；?胱體的巰基化聚乙二醇衍生物,它能與含有馬來(lái)酰亞氨酸(4),用二硫蘇糖醇(dithiothreitol,DTT)斷胺的磷脂反應,通過(guò)硫醚鍵生成聚乙二醇化的磷脂,二硫鍵后經(jīng)葡聚糖凝膠柱分離得到1(圖1)本研從而制備聚乙二醇化的脂質(zhì)體12。由于聚乙二醇究對此法進(jìn)行了工藝改進(jìn)。制備2時(shí)反應溫度由能在脂質(zhì)體表面形成水化膜,阻礙血漿成分與脂質(zhì)40℃升至60℃,4h基本反應完全;制備3時(shí)體表面的吸附,從而降低網(wǎng)狀內皮系統對脂質(zhì)體的加入有機堿N-甲基嗎啉可促進(jìn)反應進(jìn)行制備1時(shí),攝取,延長(cháng)脂質(zhì)體的體內循環(huán)時(shí)間。先經(jīng)柱色譜純化4,再用DTT斷開(kāi)二硫鍵,所得1文獻用聚乙二醇單甲醚(mPEG)和琥珀酸純度達到90%以上。酐反應生成聚乙二醇單甲醚-琥珀酸酯(2),在脫聚乙二醇是由重復單元-(CH2CH2O)-構成的高分子聚合物3,電子轟擊(electron bom收稿日期:2009-01-09作者簡(jiǎn)介:鄧家欣(1980-),男,博士研究生,專(zhuān)業(yè)方向:靶向給 bardement)或快原子轟擊(fast atom bombardment藥系統研究質(zhì)譜圖中有大量碎片離子峰,分子離子峰很弱, e-mail: dengjiaxin007@163.com通信聯(lián)系人:陶濤(1959-),研究員,博士生導師,從事工無(wú)法獲得聚乙二醇中各聚合鏈的絕對分子量及分業(yè)藥劑學(xué)研究。布。本研究采用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間Tel:021-55514600×123 e-mail: taotaosipi@hotmail.com質(zhì)譜(matrix-assisted- laser desorption ionization-time332中國醫藥工業(yè)雜志 Chinese Journal of Pharmaceuticals2009,40(5) of flight mass, MALDI-TOF- MS確定1的分子量。無(wú)碎片離子,可以直觀(guān)地反映連接不同端基的聚乙 MALDI-TOF- MS是在田中耕一于1987年發(fā)現的二醇衍生物各聚合鏈的絕對分子量及其分布。2的“軟鐳射脫附(soft laser desorption)”技術(shù)基礎上產(chǎn) MALDI-TOF- MS(m+na,m/z)和3的 MALDI生的一種“軟電離”質(zhì)譜技術(shù)46,能夠將合成的 TOF MS([m+H],m/z)數據可確證合成相應化合高分子體系中各成分離子化,并且基本上只形成單物(MALDI-TOF- MS圖譜存編輯部)電荷離子,其質(zhì)譜圖特點(diǎn)是分子離子峰很強,幾乎 OfCH2CH20+Me o+,Me一OH MeO+CH2CH20-,H mPEG200023 HIN-COCH2CH2COO+CH2CH2O+Me胱氨酸s-c -CHCOOH -C-CHCOOH DTT, OfCH2CH20MeN HN-COCH2CH2COO+-CH2CH2O)-MeH -SH COOH圖11的合成路線(xiàn)實(shí)驗部分2136,2180,2224,2268,2312,2356,2400,2444等, Varian. 7 Tesla FTMS型傅里葉變換高分辨MALD-分別對應聚合度n為40~52的理論分子量,確證tof質(zhì)譜儀,內標為PEG2000結構。聚乙醇單甲醚-琥珀酸酯(2)聚乙二醇單甲醚-琥珀酰亞胺酯(3)500ml四頸瓶中加入氯仿(300ml)、500ml四頸瓶中加入二噁烷(250ml)、2(10.0g,mpg(購自遼陽(yáng)科隆化學(xué)品有限公司,M=2000,4.73mmol)、N-羥基琥珀酰亞胺(2.53g,22.0mmol)、20.0g,10.0mmol)、琥珀酸酐(7.5g,74.mmo)1-乙基-3-(3-二甲胺基丙基)碳二酰亞胺鹽酸鹽和吡啶(5ml),油浴加熱至60℃,攪拌反應4h,(2.32g,12.1mmol)和N-甲基嗎啉(5ml),油浴依次用0.5mol/L鹽酸(30ml)、水(30ml×2)和加熱至50℃攪拌8h,蒸去溶劑,剩余物溶于氯仿飽和鹽水(30ml)洗滌,無(wú)水硫酸鈉干燥,過(guò)濾,(200ml),用0.5mol/L鹽酸(40ml×3)洗滌,無(wú)濾液濃縮至干,剩余物經(jīng)乙酸乙酯重結晶,得水硫酸鈉干燥,過(guò)濾,濾液減壓濃縮至干,得黃白色粉末狀固體2(18g,85.3%)。 MALDI--TOF色黏稠狀液體3(8.36g,80.0%)。直接用于下步M([m+Na]+,mz):1915,1959,2003,2048,2092,反應。中國醫藥工業(yè)雜志 Chinese Journal of Pharmaceuticals 22009,40(5)333二(聚乙二醇單甲醚-琥珀?；?胱氨酸(4)參考文獻:胱氨酸(1.93g,8mmol)加至0.05mol/hb] Suzuki, Watanabe, Masuko et al Preparation of long緩沖液(pH7.4,50ml)中,攪拌下分次加入3(4.42g circulating immunoliposomes containing adriamycin by a2mmol),其間加0.5mol/L氫氧化鈉溶液維持 novel method to coat immunoliposomes with poly(ethylenepH7.4。加畢室溫反應12h,過(guò)濾,濾液中加入甲苯 glycol) []. Biochim Biophys Acta, 1995, 1245(1): 9-16 [2] Hosokawa S, Tagawa T, Niki H, et al. Efficacy of(50ml),減壓濃縮至干,剩余物經(jīng)硅膠柱色譜分 immunoliposomes on cancer models in a cell-surface-離[洗脫液:二氯甲烷-甲醇(10:1)],得黃色 antigen-density-dependent manner [J]. Br J Cancer, 2003.黏稠液體4(2.67g,30.1%)。89(8):1545-1551聚乙二醇單甲醚-琥珀?；腚装彼?1)[3]鄭俊民.藥用高分子材料學(xué)[M].北京:中國醫藥科技出50ml三頸瓶中加入1mol l/ Tris--HC緩沖液版社,2000:161-164(pH8.6,10ml)、4(2.2g,0.5mmol)和DTT4]鄧慧敏,周麗華張珍英,等 MALDI-T-TOf質(zhì)譜法分析聚合(77mg,0.5mmol),室溫反應1h,經(jīng)葡聚糖凝產(chǎn)物[J].質(zhì)譜學(xué)報2003,24(z1):1267-1270 [5] Tanaka K, Waki H, Ido Y, et al. Protein and polymer analyses膠G-50分離[洗脫液:0.05mol/LHBS緩沖液 up to m/z 100 000 by laser ionization time-of-flight masspH6.8)],得黃色黏稠液體1(2.08g,94.6%)。于 spectrometry [] Rapid Commun Mass Spectrum, 198820℃冰箱充氮氣保存。 MALDI-TOF- MS(M+H]2(8):151-153m/):1996,2040,2084,2128,2172,2216,2260,230,[6]陶露絲質(zhì)譜技術(shù)的研究進(jìn)展]中國食品添加劑,2002348,2392,2436等,分別對應聚合度n為40~52(4):153-155的理論分子量,確證結構。廣告索引封面:上?？?lè )康包衣技術(shù)有限公司彩插6:南京中船綠洲環(huán)保有限公司內封1:溫州小倫包衣技術(shù)有限公司彩插7:上海法瑪康醫藥科技有限公司內封2:2009年全國醫藥工業(yè)信息年會(huì )彩插8:貝克曼科爾特商貿(中國)有限公司封二:天津愛(ài)勒易醫藥材料有限公司彩插9:梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司封三:藥物綜合數據庫彩插10:天津鐳釋力醫藥科技開(kāi)發(fā)有限公司封底:第九屆世界制藥原料中國展插1:天津市天大天發(fā)科技有限公司彩插1:深圳麥克維爾空調有限公司插2:上海迪清過(guò)濾技術(shù)有限公司彩插2:賽多利斯科學(xué)儀器(北京)有限公司插3:上海一品顏料有限公司彩插3:上海弗魯克流體機械制造有限公司插4:化學(xué)醫藥與藥物制劑新產(chǎn)品開(kāi)發(fā)參考彩插4:第十四屆中國國際醫藥(工業(yè))展覽會(huì )插5:中國醫藥數字圖書(shū)館暨中國醫藥工業(yè)國際論壇插6:無(wú)錫市佳諾精細化工設備廠(chǎng)彩插5:巴斯夫(中國)有限公司無(wú)錫意凱自動(dòng)化技術(shù)有限公司
