鉛和乙醇對雄性大鼠生殖系統的聯(lián)合毒作用

86中國工業(yè)醫學(xué)雜志2006年10月第19卷第5期 Chinese J Ind Med Oct2006,Vol.19N.5參考文獻[J]. Proc Natl Acad Sci USA, 1991, 88(17): 7797-7801[1] Yoshida M, Watanabe L., Horie K,etl. Neurobehavioral changes in[5]李國君,吳德生,中樞神經(jīng)系統中一氧化氮和一氧化氮合酶研究進(jìn)metallothionein-null mice prenatally exposed to mercury vapor [J]. Toxi展[J]國外醫學(xué)衛生學(xué)分冊,1999,26(2):6568co Lett,2005,155(3):361-3686] Keys SA Zmerman WF. Antioxidant activity of retinal, glutathione[2 Yamada K, Sasaki Y, Masuda K, et al. Role of nitric oxide in learningin bovine photoreceptor cell mem-branes J ] Exp Eye Resand memory processes [J I Nippon Yakurigaku Zasshi, 1998, 1112):8796[7]楊興斌,趙燕,海春旭,等.硒、鋅對索曼神經(jīng)毒劑誘導大鼠過(guò)氧[3] Mittal CK, Harrell WB, Mehta CS, et al. Interaction of heavy metal化損傷的保護機制[J]中國臨床康復,2004,9(8):1792-1793oxicants with brain constitutive nitric oxide synthase[ I]. Mol Cell Bio-[8]劉亞華,李積勝,閆蓓.?；撬徜\對染鉛大鼠海馬NOS活性和hem,1995,149-150:263-265nNOS蛋白及基因表達的影響[J]營(yíng)養學(xué)報,2004,26(5)[4] Dawson TM, Bredt DS, Fotuhi M, et al. Nitric oxide synthase and337-340ronal NADPH diaphorase are identical in brain and peripheral tissues鉛和乙醇對雄性大鼠生殖系統的聯(lián)合毒作用譚成森,靳翠紅,劉秋芳,趙劍,蔡原中國醫科大學(xué)公共衛生學(xué)院毒理教研室,遼寧沈陽(yáng)110001)摘要∶采用整體動(dòng)物實(shí)驗方法,觀(guān)察鉛和乙醇對大鼠精孑數量和質(zhì)量,以及血中性激素水平的聯(lián)合作用。結果顯示,精子計數聯(lián)合組比鉛和乙醇單獨作用組顯著(zhù)減少;精子活動(dòng)度分析聯(lián)合組與其他各組比較顯著(zhù)下降。鉛和乙醇單獨作用均可使雄性大鼠血清睪酮(T)升高,促黃體生成激素〔LH)下降,聯(lián)合作用使T降低,LH較單獨作用組升高。提示鉛和乙醇聯(lián)合染毒對雄性大鼠生殖毒性影響可能具有增毒作用。關(guān)鍵詞:鉛;乙醇;精子;性激素中圖分類(lèi)號:R994.6;R114文獻標識碼:A文章編號:1002-221X(2006)5-0286-02Study of collaborating effect of lead and ethanol on reproductive function in male ratsTAN CheiU Qiu-fang, ZHAO Jian, CAI YuanDepartment of Toxicology, College of Public Health, China Medical University Shenyang 110001, ChinaAbstract: Rats were used to observe the effect of lead and ethanol on the quantity and quality of sperms and the levels of sex hor-mones in the study. The results showed that sperm counts in lead or ethanol administrated group were all decreased compared with con-trol rats, the sperm count in lead-ethanol collaborating exposure group was much lower than that of lead or ethanol group. The motileof sperm in collaborating exposure group was also obviously decreased compared with lead or ethanol group. Additionally the sex hor-mones determination also revealed that lead or ethanol might induce a marked decline of serum testosterone( t) level and a definite in-crease of serum luteinizing hormone(LH level whereas collaborating exposure of lead and ethanol showed some adverse effect on ser-T and LH levels. It is suggested that the combining exposure of lead and ethanol might produce some additive effect in reproductionKey words: Lead Ethanol Sperm Sex hormone鉛對生殖系統的損傷,已由流行病學(xué)調査和動(dòng)物實(shí)驗廣泛要試劑與儀器證實(shí)12。乙醇對雄性生殖系統的損害近年來(lái)已引起人們的關(guān)醋酸鐓分析純沈陽(yáng)試劑一廠(chǎng))乙釀(分析純沈陽(yáng)市富康注。本研究采用整體動(dòng)物實(shí)驗方法,觀(guān)察鉛和乙醇聯(lián)合作用對消毒藥劑公司)睪酮 testoterone T)放射免疫分析試劑盒(天津大鼠精子數量和質(zhì)量以及血中性激素水平的影響,初步探討鉛九鼎醫學(xué)生物工程有限公司)促黃體生成激素( lutenizing hor-和乙醇對雄性生殖系統的聯(lián)合毒作用及其可能機制。mone LH)放射免疫分析試劑盒(天津九鼎醫學(xué)生物工程有限公1材料與方法司)濕微鏡日本 OLYMPUS)恒溫水浴糧(HH42型,常州國華1.1實(shí)驗動(dòng)物電器公司)放射性免疫測定儀F2003/50G型西安)成年 Wistar雄性大鼠32只,體重180-200g,由中國醫科1.3實(shí)驗方法大學(xué)實(shí)驗動(dòng)物部提供,飼養1周后分組。動(dòng)物室溫度18-23℃,1.3.1動(dòng)物分組及染毒將32只大鼠按體重隨機分為4組:對相對濕度40%~70%,動(dòng)物自由飲水、攝食。照組、醋酸鉛組、乙醇組、聯(lián)合組。乙醇組大鼠按2.16gkg給1.2予26%乙醇,經(jīng)口灌胃染毒,連續8周,每周5d每天1次;醋中國工業(yè)醫學(xué)雜志2006年10月第19卷第5期 Chinese J Ind Med Oct2006,Vol.19No.5287單獨作用組相同;對照組與染鉛組按lml/l00g蒸餾水灌胃,時(shí)玻璃棒沿著(zhù)管壁輕輕剝離,1000/min離心10min,小心吸取間與其他各組相同。血清,按試劑盒說(shuō)明書(shū)應用放射免疫技術(shù)對血清睪酮、促黃體1.3.2睪丸及附睪臟器系數的測定睪丸系數=(睪丸質(zhì)量/生成素水平進(jìn)行測定體重)×100%,附睪系數=(附睪質(zhì)量/體重)×100%4數據處理1.3.3血清鉛含量測定取肝素抗凝血0.1ml,加稀釋液1.0用統計軟件SSl0.0對各項指標的實(shí)驗數據進(jìn)行均值計算各ml,振蕩混勻,原子吸收分光光度計石墨爐法測定組間進(jìn)行單因素方差分析。其中血鉛濃度用幾何平均數表示1.3.4精子檢查大鼠處死后立即剪取一側附睪尾稱(chēng)重后于2結果盛有2m生理鹽水的小燒杯中剪碎用兩層擦鏡紙過(guò)濾淛制成精2.1動(dòng)物體重與睪丸、附睪臟器系數及血鉛濃度子懸液。取一滴懸液推片晾干甲醇固定伊紅染色蒸餾水沖如表1所示,體重、附睪臟器系數各實(shí)驗組和對照組比較洗晾干后鏡檢。每只大鼠計數1000個(gè)精子,記錄畸形精子數并無(wú)統計學(xué)意義(P>0.05)染鉛組和乙醇組的睪丸臟器系數與計算精子畸形率。將懸液置于37℃水浴中孵育20min后滴片光對照組比較,無(wú)統計學(xué)意義(P>0.05),但聯(lián)合組的睪丸臟器鏡下計數200個(gè)精子中的活精子數和各級活動(dòng)精子數并計算活系數顯著(zhù)高于對照組(P<0.05)聯(lián)合組與染鉛組的血鉛濃度精率。懸液經(jīng)60℃水浴殺死精子用血球計數板計數精子再折顯著(zhù)高于對照組和乙醇組(P<0.05)聯(lián)合組的血鉛濃度與染算成精子數(個(gè)y附睪尾(g鉛組比較雖無(wú)統計學(xué)意義,但聯(lián)合組均值明顯高于染鉛組1.3.5血清性激素的測定將采集的血液室溫下靜置1h,用表1動(dòng)物睪丸、附睪系數及血鉛濃度測定結果(x±s,G±s,n=8)組別體重(g)睪丸臟器系數(%)附睪臟器系數(%)血鉛濃度(μmo/L)對照組338.80±26.790.885±0.1430.181±0.077染鉛組318.00±48,411,063±0.1580.182±0.02111.610±0.178乙醇組1,064±0.1250.184±0.0220.065±0.00聯(lián)合組1.093±0.1540.174±0.02317.257±0.213與對照組比較,*P<0.05;與聯(lián)合組比較,△P<0.05;表2同。2.2精子質(zhì)量與數量檢查及血清性激素水平乙醇組和染鉛組與對照組比較雖然未見(jiàn)顯著(zhù)性差異(P>0.05),如表2所示,各實(shí)驗組與對照組比較,精子數、活精率均但均值有增大的趨勢,而聯(lián)合組與其他各組比較,顯著(zhù)降低(P顯著(zhù)降低〔P<0.05),聯(lián)合組與染鉛組和乙醇組比較,其精子<0.05)血清LH染鉛組和乙醇組與對照組比較顯著(zhù)降低(P數、活精率也顯著(zhù)降低(P<0.05)而各組之間的精子畸形率<0.05),亦顯著(zhù)低于聯(lián)合組(P<0.05)比較,差異無(wú)統計學(xué)意義(P>0.05)血清睪酮濃度測定結果表2各組精子數量、質(zhì)量及血清性激素水平檢查結果(x±s,n=8)精子數(107/g)舌精率(%)精子畸形率(%)T( ng/dlLH mIU/mI對照組90.00±6.365.6±4.0297.85±91.866.91±0.97染鉛組1.925±0.486·△63.60±4.72·△5.9±4.9370.85±151.30△5.33±0.29*△乙醇組2.082±0.296*△72.00±6.04·△5.5±3.423.00±109.83△5.42±0.47·△聯(lián)合組1.637±0.39343.63±9.755,8±3.383.84±35.506.48±1.283討論作用組比較亦顯著(zhù)升高。顯示鉛和乙醇的聯(lián)合作用可能使睪丸本實(shí)驗發(fā)現,聯(lián)合組睪丸系數與對照組比較顯著(zhù)升高。染損傷加重, Leydig細胞受損,分泌T能力下降,引起垂體促性腺鉛組、乙醇組和聯(lián)合組精子計數與對照組比較顯著(zhù)減少,聯(lián)合激素LH代償性升高。T分泌減少可以引起精子的產(chǎn)生和發(fā)育障組與鉛和乙醇單獨作用組比較顯著(zhù)減少。聯(lián)合組精子活動(dòng)度較礙,使精子數目減少,活精率下降,這與本研究的結果一致。其他各組均顯著(zhù)下降。以上結果表明鉛和乙醇對大鼠睪丸系數提示鉛和乙醇對雄性大鼠的生殖內分泌的變化呈現明顯的增毒及精子有比較明顯的增毒作用。作用。睪酮對于維持精子的發(fā)生和成熟是必需的,由睪丸的 Leydig參考文獻細胞分泌,該細胞是LH作用的靶細胞,LH是控制T產(chǎn)生的主[1] Suzan a wadi, ghayasuddin ahmad. Effects of lead on the male repro-要刺激因子。本研究中,血清T水平乙醇組和染鉛組與對照組Ictive system in mice [J ] Journal of Toxicology and Environmental比較有增高的趨勢,血清LH水平染鉛組和乙醇組與對照組比較Health,1999,56:513522顯著(zhù)降低,與某些報道的結果相反34。這可能與睪丸中曲細精2 Lancranjan L. Reproductive ability of workman occupationally exposed to管受損使支持細胞分泌的雄激素結合蛋白(ABP)減少有關(guān)。ABP使曲細精管上皮結合的T減少,導致血清中T水平升高。ers for lead [j]. Toxic Lett, 1988, 24: 285