枳椇子影響乙醇代謝機理研究

Science and Technalogy of Faad inau stry研究與探討枳子影響乙醇代謝機理研究中國農業(yè)大學(xué)食品學(xué)院,北京100094)任發(fā)政羅云波蔣菁莉要為了研究枳撰子解酒保肝機理,實(shí)驗建立了低刺量乙醇乙醇為北京化L廠(chǎng)產(chǎn)品;牛血清蛋白為 Signa公模型組〔自由杖用25%乙酵、3%gkg體重·d)和高劑量司產(chǎn)品;其他試劑均為網(wǎng)產(chǎn)分析純醇模型紅(自由飲用8%乙醇、12體重·d),枳懼浸提液十低醇組、機耦子漫提液+高醇組、枳積子漫提液lCR雄性健康小鼠60只、23-25g維通利華實(shí)組(小鼠自由飲用3mg/m枳模子浸提液),實(shí)驗襯續3d,驗動(dòng)物技術(shù)有限公司提供。測定小鼠肝臟乙脫氨酶AD)H)、翅氧化物歧化酶SO冂)、谷胱甘酞硫轉移醉(GST)活性及丙752紫外分光光度計上海棱光技術(shù)有限公司〔MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量。結饔裹明,長(cháng)期擾入乙醇ectrumlab22pc分光光度計上海棱光技術(shù)有限引起肝臟ADH、SOn、GST酶活性降低,導致MDA含量升高和〔SH舍量下降,幟懼子提取液可拮抗乙醇引起的公司;TDL-40離心機上海安亭科學(xué)儀器丿。12方法關(guān)體詞枳犋子A) H SOD MDA GSI1.2.1動(dòng)物分組1(R雄性健康小鼠60只,按體重中圖分類(lèi)號:T2012文獻標識碼:A文章編號:10020306(2002)12-0036-02大小隨機分組:空白對照組10只,飲用白來(lái)水;低醇模型組10只,飲用2.5%乙醇溶液,平均每只實(shí)驗動(dòng)物的乙醇攝入量為39g/kg體重d:高醇模型組10枳棋子為鼠李科植物積祺 Hovenia dulcis只,飲用8%乙醇溶液,平均每只實(shí)驗動(dòng)物的乙醉平Thunb的帶有肉質(zhì)果柄的果實(shí)或種子、又名雞距子、均攝入量為126g/kg體重d;枳枳子浸提液加低醇拐棗等,其功效主要為清熱利尿、止泅除煩、解酒毒,組10只,乙醇用同低醇模型組,飲用枳祺子液;機用于熱病煩渴、呃逆、嘔吐、小便不利、酒精中毒等藥棋子浸提液加高醇組10只,乙醇用量同高醇組,飲物。近年來(lái),國內外學(xué)者對枳裯了藥揶作用及其機用枳枳子浸提液;枳枳子組10只,飲用枳犋浸提制進(jìn)行了研究。有文獻報道,枳棋子對急性酒精中液毒有預防和治療作用,對CCL和D-氨基半乳糖誘導實(shí)驗周期為30d,末日禁食14h,次日小鼠稱(chēng)重的實(shí)驗性肝掀傷及體外培養的肝細胞損傷具有保護頸椎脫口處死,馬上剖取肝臟,用預冷到4℃的生理作用。為了探討枳褀子解酒保肝機理,本實(shí)驗從不同鹽水沖洗2~3次,濾紙吸干。稱(chēng)取肝重,按19的比例實(shí)驗組小鼠 ADH SOD、GST酶活性及MDA、CSH含加入pH7.4的磷酸鹽緩沖液,冰浴研磨制成肝均漿等方面研究枳根子解灑保肝機理。4℃下放置4h以上,12000r/min低溫離心20min,取材料與方法上清液1.1材料與儀器1.22小鼠肝均漿中ADH活性的測定參照 Blair.AHA枳子浸提液枳模子購自北京宏牛堂,25%乙的方法,測定單位時(shí)間內OD的改變,表示酶活力。測醇浸提2h,回收乙醇,過(guò)濾(每Ioml含生藥25g定條件;pH8.8,肝均漿提取液O.lml,5 mmol/NAD+.lml稀釋為3mg/ml的枳子液待用;氧化型輔酶I25mmn1.乙醇,溫度25℃,波長(cháng)340m,每30s記錄(NAD+)還原型谷光甘肽(GSH)購于北京欣經(jīng)科x值。單位定義:單位時(shí)間內ODw改變0.001為牛物試劑公司;1-氯-2,4--硝基苯(CDNB)為軍一個(gè)活力單位U?？棘斔沽了{法測定蛋白質(zhì)含量串醫學(xué)院藥材供應站產(chǎn)品:SOD試劑盒、GH試劑1.23小鼠肝均漿中MDA含量的測定TBA比色盒、MDA試劑盒購于北京康定泰克有限公司;95%法,具體操作按試劑盒說(shuō)明。1.2.4小鼠肝均漿中SOD活性的測定黃嘌呤氧化本操作按試劑盒說(shuō)明收稿日期:2002-10-08中國煤化工測定采用 willian作者簡(jiǎn)介:任發(fā)政(19612-),男,博士,研究方向:食品科學(xué)CNMHG研究與探討Vol23ANo.12,2002表1枳耦子對小鼠肝臟ADH、SQD、GST活性及GSH、MDA含量的影響ADHU蛋)60mg蛋白) MDAemon/g蛋白) GSt(me/mg蛋白) GSH(mmol/g蛋白)空白對照組53.75±14650.672±00070.44l±0001低醇模型組10.04±1.0678.52±14.170.588±0.003.398±0.U0l醇模型組10.25±03673.20±154510L.69±23.580.578±0.002枳棋了+低酵組122.10±34.36271.53±1147△0.743±0.00△40.520±0.004枳模子+高醉組·16.05±2.86·57.50±8800.39】±D003機根子組0.697±0.0030432±0002注:與空山組比較*p<005,*p<001;與低醇模型組比較“p<00l;與高醇模型組比較報道的方法。測定條件:pH5,肝均漿提取液o5l,性的下降,有效地提高SOD酶活性,阻止S(清除1Omml. CDNBO lml.3moM.CsHo.lm,波長(cháng)340mm,體內自由基能力的下降,通過(guò)防止GSH耗竭,恢復記錄單位時(shí)間內ODa值的改變、結果以mg/min產(chǎn)生GST活性,增加(T催化GSH的結合反應,以減少的μmol/1.CDNB-GH絡(luò )合物表示乙醇代謝氧自由基的產(chǎn)生,抑制脂質(zhì)過(guò)氧化反應,抑1.2.6小鼠肝均漿中GSH含量的測定根據GsH制肝臟中MDA的升高,減輕乙醇及其代謝產(chǎn)物對肝與二硫代二硝基苯甲酸反應時(shí)能產(chǎn)生一種黃色物組織的損傷,對杭肝臟脂質(zhì)過(guò)氫化作用而保護肝臟質(zhì),在420mm下有最大吸收峰,可用比色法定量測定4結論CSH,具體操作按試劑盒說(shuō)明。4.1枳棋f可逆轉乙醇所致的乙醇脫氫酶活性的下2實(shí)驗結果降,保持乙醇氧化中間產(chǎn)物乙醛的產(chǎn)生與積累間的積枳子對小鼠肝臟ADH、SD、GST活性及對平衡肝臟GSH、MDA含的能響見(jiàn)表1。4.2枳棋了可抑制乙醇所致的丙二醛升高,提高超1m表1可知,長(cháng)期給予乙醇會(huì )導致小鼠肝臟氧化物歧化酶活性,防止肝細胞膜的脂質(zhì)過(guò)氧化作SOD、GST活性的降低MDA含量升高CH含用,保護肝臟免受由某毒害。量降低,與空白對照組比較,均具有統計學(xué)差異,而43枳福子可阻止乙醇所致的還原型谷胱甘肽的耗枳枳子提取液拮抗了乙醇的上述不良作用。竭,恢復谷胱甘肽硫轉移酶活性,確保GSH氧化還原3討論寸程的順利進(jìn)行,并加速乙醛的代謝火活長(cháng)期和大量攝入乙醇會(huì )造成肝細胞的損傷ADH是乙醇的氧化還原酶,在乙醇代謝中起重要作參考文獻用,ADH活性的變化可影響到血中乙醇的濃度,若該1謝宗萬(wàn),余友岑主編全國中草藥名鑒(上塘).北京:人民出版胸活性下降或受到抑制,可使機體對乙醇的生物利社,19054川度提高,進(jìn)而加重乙醇對腦、肝臟等器官的危害作2嵇揚陸紅枳懼子藥理研究概況中醫藥學(xué)報,2002,30(1):用。乙醇本身較易變成自由基,乙醇在體內的代謝中間產(chǎn)物乙醉和多種氧化自由基可對肝臟產(chǎn)生危3楊王萍乙酵生物代謝及其對肝臟的毒性作用河南醫學(xué)害。在比常生理狀態(tài)下,體內清除自山基的氧化還原研究,1997(1):78-79系統可維撲體內自由基的平衡,但長(cháng)期大量的乙摩4李文杰SOD在治療超氮陰離子自由基所引起的疾病及抗攝入,使白由基產(chǎn)生增加,導致肝臟脂質(zhì)過(guò)氧化。木衷老上的應用中國藥學(xué)雜志,1989,24(7):398研究中,低劑量乙醇模型組小鼠肝臟ADH、SOD酶活5王新月急性酒精性肝損傷中醫藥防護作用實(shí)驗研究概況性降低,MDA含量升高,與空白對照組比較有極顯著(zhù)中國中醫急癥,1998,7(3:135-137性差異(P<0.01),(SH含量及GST酶活性降低,與空6張洪等枳犋子提取物對乙酵所致小鼠肝損傷的拮抗作用白對照組比較差異顯著(zhù)(<005):高劑量乙醇模型組廣東藥學(xué)學(xué)報,2001,17(3:l80~18小鼠肝臟ADH、SOn、ST活性降低,MDA含量升7嵇損、等枳襖子對乙醇所致小鼠肝臟攬傷的預紡作用中藥高,同時(shí)CSH含鰍降低,與空白刈照組比較差異極顯藥理與臨床,20016319-20著(zhù)(<001),證實(shí)了乙醇對肝臟的毒性作用及對肝臟8嵇揚,等枳子酒與枳褀子水提液解酒毒作用比較研究.時(shí)解毒功能的影響。枳褀子能拮抗乙醇所致的各項指珍國醫因藥,2001,12(6:481~483標的改變,小鼠肝臟ADH、SOD、GT酶活性等指標9airA.H.tal. Some catalytic properties of human明顯升高.MDA含量降低,GHH含量升高,與相關(guān)文liver alcohol dehydrogenase. Bio獻報道一紋的,提示枳子對慢性乙醇性肝損傷有10 WiliamH Habig et aL. Assays for Differentiation of定的保護作用。積子解酒保肝作用的機理與以c;iome下幾個(gè)方面有關(guān):可逆轉乙醇所致的乙醇脫氫酶活H中國煤化工2):7130~7139CNMHG