聚乙二醇接枝殼聚糖聚離子膠束的制備與體外表征研究

Chinee Journal of New Druge 2007, Vol. 16 No. 13中國新藥雜志2007年第16卷第13期聚乙二醇接枝殼聚糖聚離子膠束的制備與體外表征研究楊可偉,李馨儒,楊卓理,劉艷(北京大學(xué)藥學(xué)院藥劑學(xué)系，北京100083)[摘妻] 目的:制備載有甘草酸二銨(DG)的聚乙二醇接枝殼聚糖(mPEG-CS)聚離子膠束,考察膠束的理化性質(zhì)及體外釋放機制。方法:通過(guò)殼聚糖烷基化合成mPEG-CS,以三聚磷酸鈉為引發(fā)劑,利用靜電相互作用制備載有DC的mPEG-CS聚離子膠束?？疾炷z束的形態(tài)、粒徑和zeta電位。用透析袋法研究載藥膠束在不同介質(zhì)中的釋放動(dòng)力學(xué)。結果:制得膠束的平均粒徑為(38.2+0.9)nm;包封率為(97.6+0.7)%;膠柬的穩定性良好;膠束的釋放與釋放介質(zhì)的種類(lèi)、pH值和濃度有關(guān)。結論:mPEC-CS是一種良好的制備聚離子膠束的高分子材料,聚離子膠東是離子型藥物的良好載體。[關(guān)鍵詞] 聚離子膠柬;殼聚糖;甘草酸二銨;體外釋放[中圖分類(lèi)號] R943. 42;R975. 5[文獻標識碼] A[文章編號] 1003 - 3734(2007)13- 1030 -05Diammonium glycyrrhizinate loaded methoxy PEG-grafted-chitosanpolyion complex micelles: preparation and in vitro characterizationYANG Ke-wei ,LI Xin-ru, YANG Zhuo-li,LIU Yan( Department of Pharmaceutics ,School of Pharmaceuical Sciences ,Peking University ,Bejing 100083 ,China)[Abstract] Objectives: To prepare and characterize the diammonium glyeyrhizinate loaded me-thoxy poly( ethylene glycol ) -grafted-chitosan polyion complex micelles ( mPEG-chitosan PIC micelles).Methods: mPEG-chitosan was synthesized by alkylation of chitosan with mPEG-aldehyde. mPEG -chi-tosan PIC micelles were prepared using sodium tripolyphosphate as an initiator via the electrostatic inter-action. The micelles were observed under the transmission electron microscopy (TEM). Mean size andzeta potential values of the micelles were measured using a zetasizer based on the dynamic light scatter-ing. In vitro release of the diammonium glyrrhizinate-loaded mPEG-chitosan PIC micelles was measuredusing a dialysis method in various buffered solutions. Results : Diammonium glyeyrrhizinate-loadedmPEC-chitosan PIC micelles were successfully prepared with an average diameter of (38.2 +0. 9) nm.Encapsulation eficiency of diammonium glyeyrrhizinate was(97.6 +0.7)%. The micelles were stable atroom temperature for 1 month , and the release rate was dependent on the anionie patterns, pH values and[作者簡(jiǎn)介]呂慶淮(1962-),男,副教授,主要從事精細化[4] KOICHI Y, KIYOSHI T. Proces for producing opicallyl necive學(xué)品的合成工作。聯(lián)系電話(huà):(0539) 2060183 - 800, E-mail:benzene- sulonanide derivatives:EP , 0380144 [P]. 1990 -08 -01.becyis@ 163. com。[5] OFOSU-ASANTE K, STOCK LM. A eletire method for deute-rium exchange in hydroaromatic compounde [J]. J 0rg Chem,[參考文獻]1986, 51(26) :5452 - 5454.6] DAENIKER HU, GROB CA.3-quinuclidone hydrochloride[J].[1] 胡凱， 丁鼎東.帕浴諾司瓊市場(chǎng)前景看好[J].上海醫藥，0rg Synh, 1964, 44:86 -90.2004 ,25(11) :518.[7] CLARK RD, MILLER AB, BERCERJ, u al. 2-( quinuclidin-2] JACOB B, CLARK ROBIN D, ECLEN RICHARD M,et al. Ti3-yI) pyrido[4,3-b] indol-I -ones and isoquinolin -ones potentecyclie 5-HT, receptor antgonists:Us, 5202333 [P]. 199 -04 -13.anlgoniste [J]. J[3] LANCIOIS M, MEYER C, SOULER J L. Synthesis of( R) and中國煤化工”(S)-3-aminoquinuclidine from 3-quinuclidinone and ( S) and(R)-1 -phenethyl. amine [J]. Synth Commun, 1992, 22(13):YHCNMHG編輯:王宇梅/接受日期:2006-07-101895 - 1911.一1030--Chinee Joural of New Druge 2007 Vol. 16 No. 13中國新藥雜志2007年第16卷第13期concentrations of the release media. Conclusion : mPEG-chitosan PIC micelles could be used as a poly-mer carrier suitable for encapsulation of anionic drugs.[Key words] polyion complex micelles ;chitosan ;diammonium glyrhizinate; in viro release近20年來(lái),具有核殼結構的大分子膠束由于材料與方法具有高效、長(cháng)效、安全等特點(diǎn)受到廣泛關(guān)注,已經(jīng)成為藥劑學(xué)領(lǐng)域的一個(gè)研究熱點(diǎn)"。最初,大分子膠1試藥與儀器束主要由兩親性嵌段共聚物形成,聚合物的疏水嵌傅立葉變換紅外光譜儀AVATAR360(美國段在水中通過(guò)疏水相互作用構成膠束的內核,而親.NICOLET) ;納米粒度儀( Malvem Zelasizer , nano se-水嵌段則在膠束內核的周?chē)鷺嫵赡z束的外殼,用于ries. ,ZEN3500 ,UK) ;Hitachi . - 500 型透射電子顯微鏡增溶疏水性藥物。除了疏水相互作用外,聚離子聚(日本HITACHI公司) ;6010型紫外可見(jiàn)分光光度計合物與帶相反電荷的物質(zhì)之間的靜電相互作用也可(惠普上海分析儀器廠(chǎng));臺式離心機TGL- 16C(上作為形成膠束疏水內核的驅動(dòng)力,由此形成一種新海安亭科學(xué)儀器廠(chǎng)); MSL2300型核磁共振儀(德國型膠束-聚離子復合物膠束( polyion complex mielle,Bruker) ;LC- 10AT高效液相色譜儀(SPD - 10A紫PIC micelle)。利用PIC膠束,已經(jīng)成功包載蛋白質(zhì)外檢測器,日本SHIMADZU公司),透析袋(膜截留相類(lèi)[2]核酸類(lèi)[3-7]等藥物。PIC 膠束具備傳統聚合對分子質(zhì)量3500 ,美國spectrum)。物膠束的特點(diǎn):結構穩定;粒徑小且粒徑分布窄;體DG(99%，北京天衡藥物研究所,批號:內循環(huán)時(shí)間長(cháng);安全性好;具有靶向性(6.8-10);制備20050520) ;聚乙二醇單甲醚( methoxy poly ( ethylene簡(jiǎn)單,易于貯存等。此外,PIC膠束還具有其獨特優(yōu)glycol) ,mPEG , Mn =2000, Fluka);CS(相對分子質(zhì)勢:載藥范圍廣泛;載藥過(guò)程基本在水溶液中進(jìn)行,量10000,青島思特科技有限公司);三甲基苯磺酸.避免有機溶劑的使用,可以消除溶劑殘留引發(fā)的毒(Tr-nitro benzene sulfonate ,TNBS ,Sigma) ;氰基硼氬化鈉( NaBH,CN , Sigma) ;TPP(徐州天富化工有限公副作用等。殼聚糖( chitosan ,CS)是甲殼索脫乙?；漠a(chǎn)物，司) ;其他試劑均為分析純?；瘜W(xué)名為(1,4)-2-氨基-2-脫氧-B_D-葡聚糖,是自然2 mPEG-CS的合成與表征界中惟一的堿性多糖,是一種具有生物相容性、生物2.1mPEG的醛基化")將mPEG溶于無(wú)水可降解性及pH敏感性的陽(yáng)離子聚合物。在弱酸性DMSO中,加人適量的乙酸酐,室溫下攪拌8h。然介質(zhì)中,殼聚糖分子中的氨基質(zhì)子化,使殼聚糖帶正后用乙醚沉析、過(guò)濾、真空干燥。再用氯仿溶解，電,它可以與某些荷負電的物質(zhì)通過(guò)靜電相互作用發(fā)乙醚沉析,過(guò)濾后真空干燥,重復3次。得到醛基化的mPEG(mPEG-CH0)。產(chǎn)物用紅外光譜進(jìn)行生聚集,故可以作為PIC膠束的聚陽(yáng)離子鏈段。檢測。聚乙二醇( poly( ethylene glycol), PEG)是形成2.2 mPEG-CS 的合成"與表征將CS溶于pH膠束應用最為廣泛的親水嵌段。極強的水化作用及4.9的醋酸鹽緩沖液中，按mPEG-CHO與CS單體高度的構象柔韌性使PEG在膠束外側形成一層致的物質(zhì)的量比1:10加入mPEG-CH0,室溫下振蕩密的水化“殼" ,使膠束具有空間穩定性。同時(shí)PEC24h后,加入NaBH,CN,再于室溫下振蕩48h。然鏈的柔順性使其長(cháng)鏈來(lái)回擺動(dòng),分子構象來(lái)回變動(dòng),后將反應液移人透析袋內,用蒸餾水透析72 h,透析模糊了免疫系統的識別和吞噬,使膠束具有了隱形液過(guò)濾后冷凍干燥。凍干粉用丙酮抽提除去未反應的能力。親水嵌段的這些性質(zhì)可延長(cháng)膠束在體內的的mPEG-CHO,即得到mPEG-CS。聚合產(chǎn)物用'H-循環(huán)時(shí)間,避免被網(wǎng)狀內皮系統吞噬,并且末端具有NMR進(jìn)行檢測。采用TNBS法["3)測定mPEC-CS的功能基團的PEG為膠束的靶向性提供了可能[6.9]。接枝率。本實(shí)驗合成了PEG接枝殼聚糖( mPEG-CS),以2.3 mPEG-CS 的pH敏感度測定將mPEC-CS甘草酸二銨( diammonium glyrrhizinate, DG)為模分散中國煤化工乙酸溶液,用pH型藥物,用三聚磷酸鈉(TPP)作聚集引發(fā)劑,制備載計監0HCNMHGnm處監測該過(guò)程有DG的PIC膠束,并考察了其物理化學(xué)性質(zhì)和體中吸收皮的變化，傭正mrro-us在水中溶解的pH外釋放的機制。值范圍。.一1031一Chinese Jourmal of New Druge 2007 ,Vol.16 No. 13中國新藥雜志2007年第16卷第13期3PIC膠束的制備及包封率的測定0H末端羥基氧化為醛基。將mPEG-CS溶于pH 3.5的醋酸鹽緩沖液中，用氫譜驗證了聚合物mPEG-CS的結構。結果如與DG溶液混合后,在攪拌下向其中滴人適量的下, HNMR(D20,含10% DCI,300 MHz):8 5.12 ~TPP溶液,即得PIC膠束。5.38(H-1,H-1'),3.81(H-3, H4, H-6') ,3.67(H5,將制備的PIC膠束溶液用截留相對分子質(zhì)量為H6),3. 52(-0CH2),3.25(-0CH,),3.09(H-2),3000的超濾管進(jìn)行超濾,用HPLC法測定濾液中DG2.09(NHAc),與文獻[14,15]相符,證明已將mPEG的濃度。色譜條件:DiamondODSCrg色譜柱(150接枝到CS.上。按TNBS法測定的接枝率為9.89%。mmx4.6 mm,5 μm) ,流動(dòng)相:甲醇-5%冰醋酸水溶CS為堿性多糖,一般在低pH值下易溶,在高液(82:18),檢測波長(cháng):252nm,流速:1.0mL.min-1pH值下難溶。為了評價(jià)mPEG-CS的溶解性與pH柱溫:30 C。按照如下公式計算包封率:包封值的關(guān)系,在 420 nm波長(cháng)處對不同pH值下溶液的率/%=(投藥量-濾液中DG濃度x超濾前膠束溶透光率進(jìn)行了考察。將mPEG-CS直接分散在蒸餾液體積)/投藥量x 100。水中,得混濁液體,隨著(zhù)乙酸溶液的加入,體系的pH4膠束的形態(tài)及粒徑考察.值逐漸下降,體系慢慢變澄清,透光率值也逐漸增用動(dòng)態(tài)光散射( Dynamic light scattering, DLS)法大。當pH<5.58時(shí)溶液完全澄清,透光率值趨于測定膠柬的粒徑及粒徑分布(Plydispersityindex，穩定。因此mPEG-CS在pH<5.58的水溶液中可PDI) ,用納米粒度儀測膠束zeta電位。以磷鉬酸負以完全溶解,在pH >5.58的水溶液中部分溶解,所染法制備膠束樣品,于透射電鏡( Transmission elec-以在制備膠束時(shí)應注意控制溶液的pH值。tron microscopy ,TEM)下觀(guān)察膠束的形態(tài)。2PIC膠束的形態(tài)與粒徑5藥物在膠束中的位置考察.圖1為膠束的透射電鏡照片。圖1A清晰地顯將膠束溶液超濾后,冷凍干燥,用KBr壓片法示出膠東呈球形,粒子大小均勻,計算得到的平均粒進(jìn)行紅外光譜的測定,并同時(shí)記錄DG的紅外光譜,徑為(21.6 +4.8)nm(n= 100)。由圖2B清晰可考察藥物在膠束中的位置。見(jiàn),在膠束的內核外有一冠狀層,該圖清晰地顯示出6膠束的初步穩定性考察膠束的核殼型結構。將新鮮制備的膠束溶液密封于西林瓶中,置于60 C的恒溫箱中,于0,2 ,4,7,14d分別取樣測量粒徑。同時(shí)將新鮮制備的膠束溶液超濾,除去游離的藥物后,密封于西林瓶中,于室溫下放置1個(gè)月,測量粒徑變化,同時(shí)超濾膠束溶液,用HPLC法測定濾液中藥物的含量,考察膠束中藥物的泄露情況。A放大5x10*倍B放大1x10*倍7體外釋放試驗圖1 甘草酸二銨的PIC膠束的透射電鏡圖取1 mL膠束溶液裝入透析袋內,置于30 mL,DLS法測得膠束的粒徑為(38.2 +0.9) nm。比37 C的釋放介質(zhì)中,攪拌,分別于0.25 ,0.5,0.75，TEM 法測得的粒徑要大,原因是DLS方法中膠束粒1,1.5,2,3,4,6,8,12,20h定時(shí)取出釋放介質(zhì)3.0子處于“濕"狀態(tài),膠束表面的PEC鏈溶劑化,呈舒mL,同時(shí)補充相同體積的新鮮釋放介質(zhì)。用HPLC展狀態(tài),膠束的粒徑相對較大;而進(jìn)行TEM測定時(shí),法測定釋放介質(zhì)中的藥物含量,繪制釋放曲線(xiàn)。并膠束粒子處于“干燥”狀態(tài),膠束表面的PEG鏈呈卷分別考察膠束在不同釋放介質(zhì)、不同pH值的緩沖縮狀,故膠束的粒徑相對較小。液和不同濃度的磷酸鹽緩沖液(PBS)中的釋放動(dòng)力3藥物在膠束中的位置學(xué),以探究PIC膠束的藥物釋放規律。圖2為膠束凍干粉和DG的紅外光譜圖。形成膠束后,DG在1717cm:'處的羰基峰消失,而出結果與討論現1577 cm~'的大峰,表明DG的羰基與CS的氨基1 mPEG-CS的表征發(fā)生熱中你用北亦了甘光學(xué)性質(zhì),這與文獻mPEG-CHO的傅立葉變換紅外光譜與mPEG- [16中國煤化工包封在膠東內核。0H的譜圖相比,在1 738 cm~'處出現醛基特征峰，采CN M H G為(97.6+0.7)%其他峰位置與mPEC-0H一致,證明已經(jīng)將mPEG- (n=4)。-一 1032一Chinee Jourmal of New Drugs 2007,Vol. 16 No. 13中國新藥雜志200年第16卷第13期根據膠束在不同釋放介質(zhì)中的釋放行為,可以1717,推測DG-PIC膠束的釋放機制可能為由離子交換誘s 1600se導的溶脹和擴散。由于膠束的內核帶正電,在核殼的界面區域可吸附一定量的甘草酸負離子。在釋放15773500 3000 2500 2000 1500 1000 500初期,首先是吸附在界面區域的藥物與釋放介質(zhì)中的陰離子發(fā)生交換,產(chǎn)生突釋現象。隨后膠束內核圖2 DG原料(A)和DC-PIC膠束(B)的紅外光譜圖中的甘草酸負離子和三聚磷酸根負離子與溶液中的4膠束的初步穩定性圖3為60C放置過(guò)程中膠束的粒徑和多分散陰離子逐漸發(fā)生交換，導致膠東內核的離子相互作性的變化情況。結果表明,在60下7d之內,膠用減弱,釋放介質(zhì)慢慢滲透進(jìn)人內核,使膠束溶脹，束的粒徑和多分散性指數(PDI)只有微小變化,說(shuō)又進(jìn)一步加速內核的離子交換,如此相互作用,最終明膠束的結構至少可以在7 d內保持穩定。14d 時(shí)使藥物完全釋放出來(lái)。對于膠束在純水中的釋放，粒子的粒徑明顯增大,PDI也相應增大,說(shuō)明膠束間由于沒(méi)有可供交換的離子,所以?xún)H有核殼界面區域發(fā)生了聚集。而在室溫下,即使放置1個(gè)月,膠束的吸附的部分藥物緩慢釋放到水中。另外,與等濃度的粒徑只發(fā)生微小變化(由38 nm變?yōu)?1 nm)。由此氯離子相比，磷酸根離子所帶電荷更多,離子交換能可見(jiàn),此類(lèi)膠束對熱不穩定,應避免在高溫下貯存。力更強,所以在PBS中藥物的釋放更快。膠束zreta電位隨藥物釋放的變化進(jìn)一步 證明DC-PIC膠東藥物的釋放主要由離子交換控制?！隽］p9+ PDI5.2 釋放介質(zhì)的pH值對釋放行為的影響 圖5為載藥PIC膠束在等濃度(50 mmol.L")不同pH值的釋放介質(zhì)中的釋放曲線(xiàn)。經(jīng)過(guò)20 h,膠東在pH4.0的PBS中釋放63%,在pH 7.4的PBS中釋放圖360心時(shí)膠束溶液的粒徑和PDI隨時(shí)間的變化曲線(xiàn)91% ,在pH9.0的PBS中釋放97%。隨著(zhù)釋放介膠束室溫放置1個(gè)月后,僅有0.05%的藥物泄質(zhì)pH值的升高,藥物釋放加快。這可能與CS的結漏,表明藥物在室溫條件下可以穩定存在于膠束內構特點(diǎn)有關(guān)。CS 的pKa為6.5,其荷電情況與溶液核中。載藥膠束的長(cháng)期穩定性正在進(jìn)- -步的實(shí)驗研的pH值有關(guān)。Shu等”計算出不同pH值時(shí)CS的究中。帶電狀態(tài)。在酸性溶液中CS帶正電荷較多，隨著(zhù)5體外釋放pH值升高,氨基逐漸脫質(zhì)子化,單位鏈長(cháng)的CS所5.1 釋放介質(zhì)種類(lèi)對釋放行為的影響 圖4為載帶正電荷數減少。同樣在本研究中,釋放介質(zhì)的pH藥膠束在不同釋放介質(zhì)中的釋放曲線(xiàn)。由圖4可知，值越高,PEG接枝的CS脫質(zhì)子化的程度也越大,使在蒸餾水中藥物釋放極其緩慢,20 h僅釋放6. 7% ;在CS鏈上的正電荷數減少,與甘草酸負離子和三聚磷生理氯化鈉溶液中,20 h藥物釋放72. 2%;在與生理酸根負離子的相互作用減弱,導致藥物釋放加速。氯化鈉溶液同濃度(154 mmol.L-")的pH 7.4的?PBs(H9.0)30 to PBS(pH7.4)PBS中藥物釋放最快,20h釋放93. 5%。粒徑測量、凸 PBS(H4.0)需酸鹽圾沖液(PH4.)結果顯示,膠束在純水中釋放前后的粒徑和zeta電位均只發(fā)生微小變化。而在PBS中釋放20h后膠束粒徑由最初的45nm增大到300nm,zeta電位由最初的40mV下降到0。1416182022圖S膠東在不同 pH的釋放介質(zhì)(50 mmolL1)t女DG綹纏在PBS中的釋放作對照中釋放曲線(xiàn)(n=3)去PH 7.,4的154 mmolrL'PBS生理氯化的落誡此外,從圖5中還可以看出,即使同是pH4.0也盛飾水的釋中國煤化工中液中的釋放比在PBCN M H G的藥物釋放受釋放101214181820介質(zhì)中陰離于性質(zhì)的影響。圖4不同釋放介質(zhì)中膠束的釋放曲線(xiàn)(n=3)5.3釋放介質(zhì)濃度對釋放行為的影響圖6 為Chinese Journal of New Drygs 2007 .Vol.16 No. 13中國新藥雜志2007年第16卷第13期DG-PIC膠束在不同濃度的PBS中的釋放曲線(xiàn)。緩.4] 魏曉紅,梁文權,潘遠江. PEC化殼秦糖/DNA自組裝復合沖液濃度越低,藥物釋放越慢。這是由于釋放介質(zhì).物的制備、表征和體外Hela細胞轉染研究[J].高等學(xué)?；瘜W(xué)學(xué)報, 2003, 24(11) :1993 - 1996.的濃度降低,導致釋放介質(zhì)中的陰離子與甘草酸負[5] HARADA A. TOGAWA H, KATAOKA K. Physicochemical離子和三聚磷酸根負離子的交換變慢,于是藥物釋propertics and nuclease reistance of antisenseoligodeoxynucleoti-放速度減慢。des entrapped in the core of polyion complex micelleas composedof poly( ethylene gyeol) .poly( L.lygine ) bloeok copolymers[J].Eur J Pharm Sei2001, 13(1) :35 -42.心154 mol/L'PBS合50 mmol-L'PBS6] WAKEBAYASHI D, NISHIYAMA N, YAMASAKI Y, et al.女5 mmo'rL'PBSLactose-conjugated polyion complex micelles incorporating pla8-mid DNA as a targeable gene vector system: their preparationand gene transfecting eficiency against eultured HepC2 celle0246810121416182022[].J Control Release, 2004, 95(3) :653 -664.圖6膠東在不同濃度PBS( pH =7.4)中的釋放曲線(xiàn)(n=3)7] TIAN HY, DENG C, LIN H, et al. Biodegradable cationie PEG-PEI-PBLG hyerbranched bloek copolymer; synthesis and micelle結論characteization[J]. Biomatrias, 2005 .26(20) :4209 -4217.[8] Y00 HS, PARK TC. Folate receptor targeted biodegradable pol-本實(shí)驗的研究結果表明,mPEC-CS是一種很好ymerie doxorubicin micelles[J]. J Control Release, 2004, 96的制備PIC膠束的高分子材料。制備的膠束可高效(2) :273 -283.包載DG,具有粒徑小、穩定性好的優(yōu)點(diǎn)。該膠東的9] YAMaMOTO Y, NACASAKI Y, KATO Y, at al. Long-circulat.釋放機制為主要由離子交換誘導的溶脹和擴散,ing poly( ehylene glycol) -olyl(,1Lactie) bok copolymer mi.體外釋放動(dòng)力學(xué)與釋放介質(zhì)的種類(lèi)、pH值和濃度celle with modulated surfce charge[J]. J Control Release,有關(guān)。2001, 77(1):27 -38.本實(shí)驗雖然以DG為模型藥物,但此類(lèi)膠束的.[10] LEE ES, NA K, BAE YH. Doxonubicin loaded pH- snsitive pol-ymerie micelle for reveral of reistant MCF-7 tumor[J].J Con-載藥范圍可以擴展到其他一些帶負電的藥物,如核trol Release, 2005 ,103(2) :405 -418.酸、多肽和蛋白質(zhì)類(lèi)藥物。用mPEG-CS制備PIC膠[11] LLANOS GR, SEFTON MV. Imobilization of Poly( ethylene gy-束可以解決殼聚糖納米粒粒徑大和穩定性差的問(wèn).col) onto a Poly( vinyl alcohol)Hydrogel. 1. Syathesis and Charac-題。因此PIC膠束有望成為一些帶負電藥物的優(yōu)良trization[J]. Macromolecules, 1991, 24(23) :6065 -6072.載體。有關(guān)DG的mPEG-CS PIC膠束在大鼠體內的[12] 王鵬,莫秀梅,相羽誠一 ,等.甲殼胺-g-PEC的合成及醫用性能的研究[J].功能高分子學(xué)報，1997, 10(3):359 -364.藥動(dòng)學(xué)正在研究中。[13] BERNKOP SCHNURCH A, KRAJICEK ME. Mucoadhesive pol-[作者簡(jiǎn)介]楊可偉(1982-),男,碩士研究生。 聯(lián)系電yimers as platorms for peroral pepide delivery and absorption:話(huà):(010)82801508 ,E-mail:kwyang@ bjmu. edu. cn。synthesis and evaluation of dierent ehitosan-EDTA conjugates[通訊作者]劉艷(1964-),女,副教授,主要從事新型藥[].J Control Relese , 1998 ,50<2) :215 -223.物載體的研究。聯(lián)系電話(huà):(010)82801508 ,E-mi:anliu@ [14] SUcImOTO M, MORIMOrO M, SASHWA H, eal. Pepare-bjmu. edu. en。tion and characterization of water -soluble chitin and chitosan de-rivatives[J]. Cabohydrate Polymers, 1998, 36(1) :49 -s9.[參考文獻][15] BHATTARAI N, RAMAY HR, CUNNJ, et al. PEC-gafted ch-itoan 8 an injectable thermosensitive hydrogel for Bustained pro-[1] KATAOKA K, HARADA A, NAGASAKI Y. Block copolymertein rlease[J]. J Control Release, 2005, 103(3) :609 - 624.micelles for drug delivery : design, characterization and biological[16] WU Y, YANG WL, WANG CC, et al. Chitosan nanparticles asaignificance[J]. Adu Drug Delie Rer ,200, 47(1);113 -131.a novel delivery sytem for smmonium glyrhizinte[J]. Int JHARADA A, KATAOKA K. Novel polyjion complex micelles明Pham ,2005 , 295<2) :235 -245.trapping enryme molecules in the core. [ I ]: Characterization[17] SHU xz, ZHU KJ. The influence of mulivalent phophate struc-of the mielle prepared at non-stoichiomelrie mixing ralios[J].ture on the properties of ionically cos-linked chitosan flms forLangmuir, 99 15(12): 4208 -4212.controlled drug release[J]. Eur J Pharm Biopharm，2002, 54KAKIZAWA Y, KATAOKA K. Block copolymer mecele for de-中國煤化工livery of gene and relaied compounds[J]. Adu Drug Deliv Rev,MHCNMHG日.200-05-10.2002, 54(2):203 -222.一1034 一